FC6803 Biosféra Katedra fyziky, chemie a odborného vzdělávání Poříčí 7 Mgr. Adéla Matoušková Earth Day Activity: Build a Biosphere in a Bottle | Expect More Arizona podzim 2020 Kultivace mikroorganismů (bakterií) Kultivace •= cílené udržování či rozmnožování mikroorganismů v podmínkách in vitro. • - pěstování a rozmnožování buněk, tkání v laboratorních podmínkách Bakterie – jak vidět neviditelné? Bakterie Návod na kultivaci bakterií z jednoduchých pomůcek •Pomůcky: - skleněné Petriho misky (5-7cm) • - vatové tyčinky/skleněné tyčinky, • - technický líh, • - hrnec nebo velká kádinka, • - vařič • - uzavíratelný igelitový sáček, •- lihový kahan •Materiál: •- hovězí vývar (nebo hovězí bujón – uvařit dle návodu), cukr, sůl, želatina (nebo agar ze zdravé výživy), destilovaná voda • • • Severochema Líh technický 500 ml nakoupit u OBI Petriho miska, PS - VERKON Vatové tyčinky do uší - volné - Caretrade Postup 1.Dezinfekce Petriho misek – vařit v hrnci s vodou 10 minut, vytahovat je pinzetou vyvařenou ve vodě nebo ožehnutou nad kahanem 2. Příprava živné půdy – v hrnci zahřát 250 ml vývaru (ten vařit v destilované vodě), přidat 2 čajové lžičky cukru, špetku soli a 2 sáčky práškové želatiny/agaru. Přivést k varu, vařit 1 minutu. 3. Směs živné půdy nalévat do vydesinfikovaných P. misek – vrstva cca 3 až 5 mm 4. Nechat ztuhnout – buď zavřenou P. misku nebo pootevřenou v blízkosti zapálených kahanů. Po úplném ztuhnutí misky obrátit dnem vzhůru. Stěry z prostředí a z těla •Skleněnou vydezinfikovat (lihem) nebo vatovou tyčinku setřít plochu předmětu (mobil, víko odpadkového koše, klika ...) •Potřít médium v Petriho misce •Otisknout špinavý prst do P. misky a na jinou P. misku vydezinfikovaný prst. • •Necháme při pokojové teplotě 1 týden. • DŮLEŽITÉ: Pracujeme na stole vydesinfikovaném technickým lihem, misky otevíráme jen krátce, aby se neinfikovaly ze vzduchu!! •Po uplynutí doby kultivace (týden) pozorujeme a vyhodnocujeme narostlé kolonie •Co hodnotíme? - velikost - počet kolonií, - tvar -profil -povrch -transparence (průhledná, průsvitná, neprůsvitná), -barva (bezbarvá, pigmentace), … Atlas mikroorganismů: https://old.vscht.cz/main/soucasti/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/obsah.htm světlé – bakterie, tmavé nebo barevné - plísně Pozorování a vyhodnocení kolonií obrazek Stěr či otisk mikroflóry: z paty (A), prstů na noze (B), prstů na ruce před umytím (C), prstů na ruce po umytí (D), rtů (E), podpaží (F), rtů a nosu (G), ucha (H), úst (I) a mobilu (K) Které části těla vykazovaly největší druhovou diverzitu mikroorganismů? (Kopecká a Knotková, 2017) (Rosypal, 1981) Escherichia coli Pseudomonas putida Serratia marcescens Saccharomyces cerevisiae Bacillus cereus Kocuria rosea Micrococcus luteus Staphylococcus aureus SA 812 •Je mytí tuhým mýdlem účinné? •Jak správně mýt ruce? •Odpovídá •doc. RNDr. Jaroslav Julák, CSc. •Ústav imunologie a mikrobiologie 1. LF UK a VFN Bakterie na rukou https://www.ceskatelevize.cz/ivysilani/10214135017-zazraky-prirody/bonus/28299-bakterie-na-rukou Použité zdroje •Slide 3: www.symprove.cz/svet-neviditelny-clovek-bakterie/ •Slide 4: https://www.obi.cz/redidla-odstran-nateru-louhovace-a-cist-pr/severochema-lih-technicky-500-ml/p/41 99568, https://www.verkon.cz/sklenene-petriho-misky/, https://www.caretrade.cz/vatove-tycinky-do-usi-volne/ •Slide 8: KOPECKÁ J. a G. ROTKOVÁ. Skripta ke cvičení z obecné mikrobiologie, cytologie a morfologie bakterií. [online]. 2017 Dostupné z: http://is.muni.cz/th/411619/prif_b/ •Slide 9: ROZSYPAL, S. Obecná bakteriologie. Praha: SPN, 1981. Učebnice pro vysoké školy. • KOPECKÁ J. a G. ROTKOVÁ. Skripta ke cvičení z obecné mikrobiologie, cytologie a morfologie bakterií. [online]. 2017 Dostupné z: http://is.muni.cz/th/411619/prif_b/ •Slide 10: KOPECKÁ J. a G. ROTKOVÁ. Skripta ke cvičení z obecné mikrobiologie, cytologie a morfologie bakterií. [online]. 2017 Dostupné z: http://is.muni.cz/th/411619/prif_b/ •Slide 11: KOPECKÁ J. a G. ROTKOVÁ. Skripta ke cvičení z obecné mikrobiologie, cytologie a morfologie bakterií. [online]. 2017 Dostupné z: http://is.muni.cz/th/411619/prif_b/ •Slide 12: https://cs.wikipedia.org/wiki/Krevn%C3%AD_agar#/media/Soubor:Agarplate_redbloodcells_edit.jpg • • • • • •