Předmět: Biofarmaceutika Kurz: Bioléčiva – biofarmaceutika
4. rok studia
Peptidická léčiva.
doc. PharmDr. Oldřich Farsa, Ph.D.
Rozdělení v současnosti používaných terapeutických peptidů
1. Hormony
1.1 Liberiny a statiny („releasing“&“inhibiting“)
1.2.Somatotropin
1.3 Oxytocin, vasopresin a jejich analogy
1.4 Insuliny a glukagon
1.5 Kalcitonin
1.5 Krevní faktory erythropoetinového typu
1.6 Imunomodulátory – faktory stimulující kolonie
1.7 Imunomodulátory - interferony
2. Toxiny
3. Faktory srážení krve a koagulancia
4. Antibiotika
Jedno- a třípísmenné symboly L--aminokyselin
Jednopísmenný Třípísmenný
A Ala alanin
B Asx asparagová kys. nebo asparagin
C Cys cystein
D Asp asparagová kys.
E Glu glutamová kys.
F Phe fenylalanin
G Gly glycin
H His histidin
I Ile isoleucine
K Lys lysin
L Leu leucin
M Met methionin
N Asn asparagin
P Pro prolin
Q Gln glutamin
R Arg arginin
S Ser serin
T Thr threonin
U Sec selenocystein
V Val valin
W Trp tryptofan
X Xaa neznámá nebo „jiná“ aminokyselina
Y Tyr tyrosin
Z Glx glutamová kys. nebo glutamin (nebo látky
jako 4-karboxyglutamová kys. nebo 5-oxoprolin)
1. Hormony
1.1 Liberiny a statiny („releasing“ & „inhibiting“)
Gonadorelin a jeho analogy
●
hormon hypothalamu
●
stimuluje uvolňování folikuly stimulujícího hormonu a luteinizačního hormonu z hypofýzy
gonadorelin-acetát Gonadorelini acetas ČL 2009
buserelin Buserelinum ČL 2009
goserelin Goserelinum ČL 2009
Agonisté gonadorelinu
Gonadorelin a jeho analogy
Agonisté
leuprorelin (syn. leuprolid) Leuprorelinum ČL2009
OH
OH
OH
O
OH
O
NN
H
O
O
O N
H
O
NH2
NH
O
NH
NH NH2
CH3
CH3
N
H
N
N
H
N
H
N
H
N
H
N
H
N
H
O
O
OH
O
O
O
O
OH
N
H
O
OH
OHO
OH
OH
Krátkodobé a dlouhodobé působení agonistů gonadorelinu
Analoga gonadorelinu
Antagonisté gonadorelinu
. CH3
COOH
. CH3
COOH
N
H O
N
H
Cl
N
H
O
N
H
OH
N
H
O
OH
N
H
O
N
H
O
CH3
CH3
N
H O
N
O
N
H
O
CH3
NH2
N
O
CH3
N
NH N
H
CH3
CH3
N
N
H
N
H
CH3
CH3
OO
ganirelix
N
H O
N
H
O
Cl
N
H
O
N
H O
OH
N
H O
OH
N
H
O
NH
N
H
O
CH3
CH3
N
H
NH2
NH
N
H
O
N
O
N
H
O
CH3
NH2
O NH2
N
O
CH3
cetrorelix
Gonadorelin a jeho analogy
●
příprava: chemická syntéza
●
použití: především asistovaná reprodukce
●
výhody analogů: podstatně větší stabilita  delší eliminační poločas 
možnost podávat v podstatně delších intervalech; injekce agonisty nahradí infuzi gonadorelinu
Vztahy mezi strukturou a aktivitou
●
záměna glycinu v pozici 6 za objemnější AK vede ke zvýšení stability
●
sekvence prvních 3 AK nutná pro vazbu na receptor a pro agonistický účinek; u agonistů zachována,
antagonisté mají změněnou za 3 nefyziol. AK, važí se na GnRH
Kortikotropin a jeho analogy
Kortikotropin = ACTH; hormon hypofýzy stimulující tvorbu gluko- a mineralokortikoidů v
kůře nadledvinek a růst těchto žláz
●
polypeptid z 39 AK; prvních 24 totožných u všech druhů
●
prvních 24 AK odpovídá za biol. aktivita, koncových 15 AK za imunospecificitu
kortikotropin
tetrakosaktid
syn. cosyntropin [USAN]
Tetracosactidum ČL 2009
Synacten
SynVL
●
látka používaná jako standard
k
MS identifikaci tetrakosktidu
Použití kortikotropinu a tetrakosaktidu
●
diagnostika funkce nadledvinek
●
substituční terapie při nedostaku glukokortikoidů
●
náhrada depotního podávání glukokortikoidů při dlouhodobé terapii
N
N
N
N
H
N
N
HOH
N
H
N
H
N
H
N
H
N
H
NH
OH
O
NH2
O
OH
O
S
CH3
O
OHO
O
O
N
H
N
H
N
H
O
NH
NH2 NH
O
O
ONH
O
NH2
O
NH
CH3
CH3
O
NH
N
H
O
N
H
N
H
N
H
NH2
O
NH2
O
NH
NH2
NH
O
NH
NH2
NH
O
O
N
H
N
H
N
H
CH3 CH3
O
O
NH2
CH3CH3
O
NH
OH
O
OOH
tetrakosaktid
●
používán od r. 1961
●
připravován synteticky
●
zneužíván sportovci k dopingu
Protirelin – syntetický thyreotropin-releasing hormone (TRH)
●
hormon hypothalamu, stimulující tvorbu thyreotropinu v hypofýze a prolaktinu
●
též neurotransmitter v CNS, podílí se na regulaci příjmu potravy, reguluje
energetický metabolismus aj,
N
O
NH2
O
N
H
N
O NH
N
H
O
protirelin
5-oxoprolyl-histidyl-prolinamid
Protirelinum ČL 2009
●
struktura objasněna r. 1969, používán od r. 1976
●
podáván p.o.
●
používán jako posilovač kognitivních funkcí k terapii následků poškození mozku
a míchy a neurodegenerativních onemocnění (Alzheimer, Parkinson, motorická
neuronální choroba aj.)
Somatostatin
●
cyklický tetradekapeptid tvořený zejména v hypothalamu
●
inhibuje tvorbu růstového hormonu (somatotropinu) v hypofýze
●
ovlivňuje funkci ledvin, pankreatu a GITu
●
též neurotransmitter v CNS („neuropeptid“)
NH
N
H
NH
O
O
N
H
N
H
O
O
N
H
N
H
O
CH3
OH
NH2
O
N
H
N
H
O
O
NH2
O
N
H
N
H
O
CH3
OH
O
N
H
S
NH2
N
H
O
OH
S
O
N
H
OH O
O
CH3
NH2
somatostatin
Somatostatinum ČL 2009
Somatostatin-UCB
inf.
●
připravován synteticky
●
terapie akromegalie
1.2 Somatotropin
= růstový hormon (GH)
●
peptid ze 191 AK vylučovaný v předním laloku hypofýzy
●
stimuluje mitózu, růst buněk a diferenciaci buněk určitých tkání
●
ovliňuje expresi genů a metabolismus
●
sekvence AK známá od r. 1972, sekvence nukleotidů kódujícho genu od r. 1977
somatotropin
Somatropinum ČL2009
●
lidský, připravený rekombinantní technikou používán od r. 1985
●
substituční terapie při deficitu přirozeného GH
terciární struktura prasečího GH
1 MATGSRTSLL LAFGLLCLPW LQEGSAFPTI PLSRLFDNAM LRAHRLHQLA FDTYQEFEEA YIPKEQKYSF LQNPQTSLCF SESIPTPSNR EETQQKSNLE 100
101 LLRISLLLIQ SWLEPVQFLR SVFANSLVYG ASDSNVYDLL KDLEEGIQTL MGRLEDGSPR TGQIFKQTYS KFDTNSHNDD ALLKNYGLLY CFRKDMDKVE 200
201 TFLRIVQCRS VEGSCGF
Analoga somatototropinu (růstového hormonu)
pegvisomant
●
analog – antagonista lidského růstového hormonu (GH), v němž je Gly v pozici 120
nahrazen Lys, přidáno 8 AK pro lepší vazbu na receptor a je pegylován na Phe v pol. 1 a
na 8 Lys
●
připravován rekombinantní technikou a následnou reakcí s oxiranem (polyadice)
●
pegylace snižuje antigenicitu a prodlužuje biologický poločas
●
použití: léčba akromegalie
Primární struktura lidského somatotropinu
1.3 Oxytocin, vasopresiny a jejich analogy
Vasotocin
= fylogenetický prekurzor oxytocinu i vasopressinů u nižších organismů než savců
Oxytocinum ČL 2009
●
připravován synteticky
●
používán k navození porodu a posílení děložních stahů
Oxytocin
●
cyklický nonapeptid vylučovaný zadním lalokem hypofýzy
●
stimuluje kontrakce dělohy a vylučování mléka u savců
N
O
N
H
O
NH
S
O
S
NHO
NH
N
H
O
NH2
O
NH2
NH2
O
N
H
N
H
O
NH2
NH
O
NH
NH2
O
O
CH3
CH3
OH
H-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH2
Vasopresin
=antidiuretický hormon (ADH)
●
oktapeptidy produkované neurohypofýzou všech obratlovců (prekurzor synt. v hypothalamu)
●
sekvence AK se liší dle druhu
●
řídí množství vody v těle (regulace ledvin, plic aj.)
●
potenciální neurotransmittery
●
používány zejména syntetické deriváty
Desmopressin
Desmopressinum ČL 2009
●
cyklický nonapeptid
●
připravován synteticky
●
antidiuretikum (enuresis nocturna, ...)
N
O
N
H
O
NH
S
O
S
NHO
NH
N
H
O
NH2
O
NH2
NH2
O
N
H
N
H
O
NH2
NH
O
NH
NH2
O
O
OH
N
O
N
H
O
NH
S
O
S
NHO
NH
O
NH2
O
NH2
NH2
O
NH2
N
H
N
H
O
O
NH
NH2
O
O
OH
VAP
●
savci kromě Suidae pouze
Analoga vasopresinů
Felypressin
Felypressinum ČL2009
T
T
Terlipressin
NH2Pro
PheGly TyrCys
LysGln
GlyNH2 Gly
Asn Cys Gly
H-Gly-Gly-Gly-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly-NH2
●
vazokonstriktor, léčba krvácení z varixů apod., léčba oběhového šoku
Glypressin ®
inj., Remestyp ®
inj.
1.4 Insuliny a glukagon
Insulin
●
secernován převážně -buňkami Langerhansových ostrůvků pankreatu
●
umožňuje utilizaci glukosy buňkami organismu
●
izolovali Banting a Best r. 1921 z pankreatu psa
Humánní insulin TP
C
COOHF
NS
H
Q N
ES C Y
Y
C
T
A
I
V TVL LG
E SV QI Y CC
KN L R GENH
2
L
F G
G L
FV
E
Q
C
H YL
NH
2
COOH
řetězec B (30 AK)
řetězec A (21 AK)
●
tvoří se z prekurzoru – proinsulinu o 110 AK
10 20 30 40 50 60
MALWMRLLPL LALLALWGPD PAAAFVNQHL CGSHLVEALY LVCGERGFFY TPKTRREAED
70 80 90 100 110
LQVGQVELGG GPGAGSLQPL ALEGSLQKRG IVEQCCTSIC SLYQLENYCN
1-24 signální sekvence;25-54 řetězec B; 57-87 peptid C; 90-110 řetězec A
●
dnes získáván rekombinantní technikou nebo semisynteticky z prasečího
Insulinum humanum ČL2009
●
syn. humulin
Insulin bovinní (hovězí)
Insulinum bovinum ČL2009
●
izolace z hovězích slinivek
Insulin prasečí
Insulinum porcinum ČL2009
Analogy insulinu
lidský
aspart
Insulinum aspartum ČL 2009
●
rekombinantní technika
●
krátkodobě působící
insulin-lispro
Insulinum lisprum ČL 2009
●
rekombinantní
●
krátkodobě působící
insulin-detemir
●
řetězec B jen 29 AK, na LysB29
tetradekanoyl (myristoyl)
●
rekombinantně-polosyntetický
insulin-glargin
Gly21A
-L-Arg30B
-L-Arg31B
-insulin
Lantus®
●
inzulin první volby, nestačí-li u diabetu 2. typu perorální antidiabetika
●dlouhý T½
, podáván typicky 1x denně s.c. před spaním
insulin-glulisin
●
krátkodobě působící
NH
CH3CH3
NH
NH2
O
NH
NH2 O
NH
N
N
H
NH
CH3
CH3
NH
S
S
O NH
O
N
H
O
NH
O NH
S
S
NH
NH
NH
NH
NH O
NH2
CH3
CH3
O
CH3
CH3
O
O
OHO
O
NH2
O
O
NH
O
N
H
OH
O
N
H
CH3
CH3
O
N
H
OH
O
N
H
O NH2
O
N
H
CH3
CH3
O
N
H
O OH
O
N
H
O
NH2
O
N
H
OH
O
N
H O
NH
O
OH
O
NH2
S
S
NH
NH
OHO
NH
NH
NH2NH
NH
NH
NH
NH
OH
NH
OH CH3
N
NH
NH
OH O
NH
O
OH
O O
OH
O
O
O
O
O
O
O
O
O
O
O
N
H
O
CH3 CH3
N
H
O
CH3
CH3
N
H
O
OH
N
H
O
CH3
CH3
N
H
O
CH3
N
H
O
OH O
N
H
O
CH3CH3
N
H
O
CH3
CH3
N
H
O
N
NH
N
H
O
OH
N
H
O
N
H
O
CH3
CH3
OH
CH3
OH
O
O
O
O
ONH2
O
insulin degludec
B29N(epsilon)-omega-karboxypentadekanoyl-gama-L-glutamoyl desB30 humánní insulin
●
velmi dlouhá doba působení
●
Tresiba ®
●
s.c. podání
Shrnutí používaných obměn insulinu
Glukagon
●
peptid o 29 AK z pankreatu podporující štěpení jaterního glykogenu a zvyšující glykémii
●
způsobuje relaxaci hladkého svalstva žaludku a střev podobně jako cholinergika
Glucagonum ČL2009
●
izolován z vepřových nebo hovězích slinivek
Glucagonum humanum ČL2009
●
připravován rekombinantní technikou; sekvence AK totožná
●
použití: terapie těžké hypoglykémie, diagnostika GIT radiologicky apod.
Analoga GLP-1
GLP-1: Glucagon-like peptide 1 = glukagonu podobný peptid 1 = střevní hormon, jenž spolu
s glukoso-dependentním inzulinotropním polypeptidem (GIP) potencuje sekreci inzulinu
indukovanou jídlem
●
potecuje všechny kroky biosyntézy inzulinu, má pozitivní vliv na funkci a přežívání -buněk
●
snižuje nadbytečnou produkci glukosy v játrech, zpomaluje vyprazdňování žaludku, vedoucí
k postprandiální hyperglykémii, centrální efekt vede ke snížení chuti k jídlu ( pokles
tělesné hhmotnosti), pravděpodobně i pozitivní účinky na kardiovaskulární systém
●
nevýhody GLP-1 jako léčiva: nutnost podávání v kontinuální infuzi, extrémně krátký biol.
poločas T1/2
= 2 – 3 min (rychlý rozklad peptidasami)  potřeba stabilnějších analogů
Analoga GLP-1
liraglutid
γ-L-glutamoyl(N-α-α-α-hexadekanoyl)-Lys,26
Arg34
-GLP-1(7–37)
●
sekvence AK zbytků z 93 % shodná s fragmentem 7-37 nativního GLP-1
●
silná vazba na sérový albumin, vzájemná asociace molekul, nepodléhá
glomerulární filtraci  T1/2
= 12,5 hod po s.c. injekci
●
zlepšuje funkci  i  buněk
●
Victoza ®
Exenatid
●
syn. exendin 4
●
syntetický analog exendinu 3, který byl izolován z ještěrky Heloderma suspectum
●
záměna Ser(2)-Asp(3) za Gly(2)-Glu(3)
Byetta ®, Bydureon ®
Kalcitonin
●
tvořen C-buňkami štítné žlázy ( = parafolikulární bb. – Baber 1876), u nižších
obratlovců ultimobranchiálními tělísky, vznikajícími z 5. žaberní štěrbiny
●
peptid ze 32 aminokyselin (lososí – Onchorhyncus kisutch; humánní 139 AK)
●
receptory na osteoklastech (ale též ledviny, mozek)
●
 vylučování Ca2+
z kosti (  kalcémie)
●
 tvorbu osteoklastů
●
aplikace spolu s Ca2+
k léčbě osteoporózy
Kalcitonin
N
N
N
H
N
H O
NH2O
O
NH
N
H
N
H
N
H
N
H
S
S
N
H
NH2
O
O O
O
OH
O
OH
O
O
NH2
OH
N
H
N
HO
O
N
H
O
N
H
O
NH2
O N
H NH
O
OH
ONH
NH2
O
O
NH
O
N
H
O
N
H
N
H O
N
NH
O
NH2
O
N
H
OH
N
H
O
OH
O
O
N
H
O
NH
NH
NH2
O N
H
NH
OH
N
H
N
H
N
H
NH2
O
O
OH
O
O
OH
N
H
N
HO
O
OH
O
ONH2
OH
Calcitoninum salmonis ČL 2009 = kalcitonin lososí (syntetický; sekvence
AK odpovídá lososímu hormonu)
Miacalcic®
inj., nasal; Osteodon®
; Tonocalcin®
1.5 Krevní faktory erythopoetinového typu
Erythropoietins
erythropoietin (EPO)
= glycosylated protein from 165 AA
Erythropoietini solutio concentrata EP
= a solution containing a group of closely related glycoproteins, which are not to distinguish
from the natural human erythopoietin (human urine erythropoietin, huEPO), from the point of
view of 165 amino acids sequence and their average profile of glycosylation
●
naturally released from kidneys of adults and in liver of foetus
●
stimulates stem cells of bone marrow to proliferation and differentiation
●
produced in vitro mostly in rodent cell lines by a method based on the recombinant DNA
●
technology
●
INN names: epoetin + greek letter spelt in full (eg. epoetin beta)
●
various epoetins differ in glycosylation, complex branched oligomeric sugar chains are
attached
●
treatment of anaemia in chronic kidney failure, missused for doping
Mr
about 30 600
Mr
of protein aglycon 18235.87
INN name:
epoetin
Year of
discovery/a
pproval
Production
organism / tissue
Mr
CAS
Glycosylation
pattern
Originator product/
biosimilar
Brand names
®, generic
codes
alfa 2000 Chinese hamster
ovary 113427-24-0
similar to
uhEPO
orig/biosim Eprex,
Binocrit,
Abseamed
beta 1997 Chinese hamster
ovary
122312-54-3 orig Neorecormon
gama 1990 C127 murine cells
transfected with
huEPO cRNA
28 000-31 000
130455-76-4
orig TYB-5220
delta 2002 -
2009
human
fibrosarcoma cell
line HT-1080
261356-80-3 less O-acetyls
in O-glycan
chains; similar
to uhEPO
orig Dynepo
epsilon 1995 154725-65-2 orig
zeta 2007 Chinese hamster
ovary
32 000-40 000
604802-70-2
biosim. of
EPO alfa
Silapo,
Retacrit
theta 2009 Chinese hamster
ovary 762263-14-9
sugars
represent 40
% of total Mr
orig Biopoin,
Eporatio
kappa 2010 Chinese hamster
ovary
11096-26-7 biosim. of
EPO alfa
Epoetin alfa
BS injection
®
omega 1986 BHK-21 cells of of
Chinese hamster
kidney
148363-16-0 greater
sialylation of
tetraantenary Nlinked
chains
orig Epomax,
Hemax
Stručný přehled dosud popsaných epoetinů
Epoetins´ glycosylation
Sites of N-glycosylation: Asn24, Asn38, Asn83 (= N24, N38, N83)
Site of O-glycosylation: Ser126 (= S126)
Epoetins´ glycosylation: some more specific occuring sugars
CH3
O
NH
OH
OH O
OH
OH
OH
O
OH H
H
N-acetylneuraminic
acid (= sialic acid)
O
OH
OH
OHOH
O
NH
O
CH3
O
OHOH
OH
H
HH
H
N-acetyllactosamine
O
OH
CH3
OHOH
OH
H
H
L-fucose
Epoetins´ glycosylation: secondary structure of N-attached oligosaccharide chains
Epoetins´ glycosylation: secondary structure of N-attached oligosaccharide chains
continued
Epoetins´ glycosylation: secondary structure of N-attachedoligosaccharide chains
continued
Epoetins´ glycosylation: secondary structure of N-attached oligosaccharide
chains continued
Differences in individual epotins' glycosylation pattern: CZE in accordance with the
European Pharmacopoea continued
=epoetin alfa =epoetin alfa
=epoetin zeta =epoetin delta
Brinks V. et al., Pharm. Res. 28, 386-393 (2011)
Epoetin conjugates
Methoxy-polythylenglycol-epoetin beta
Total Mr
cca 60 000
N
OO
NH
O
EPO chain
EPO chain
O
O
O
n
Lys52 (Lys45)
Attachement of poly(oxoethylene) chain to EPO by a „monamide“ linker
Plasmatic T1/2
cca 139 h  „continuous erythropoietin receptor activator“, CERA
Mircera ® (s.c. or i.v.) for treatment of anemia in chronic renal disease
Epoetin analogues with altered protein sequence
Darbepoetin alfa
●
sequence of EPO alfa changed: Asn30, Thr32, Val87, Asn88 and Thr90  2 new
sites of N-glycosylation  5 sites of N-glycosylation in total; 2 new oligosaccharide
chains attached
●total Mr
30 000 – 37 000
●
recombinant
●
indicated for treatment of anemia caused by a chemotherapy of non-myeloid cancers
or by chronic renal failure
Aranesp ® (originator); Nespo ® (biosimilar – approved in EU 2001 - 2008)
OH
LA
A
E E
A
L
A A
QN
DE
H
R
R
T
E
W
K
G
L
S
L
L
Y
P
V
R
Q A
S
V LQ
F
G
N
Q
N
L
E
F
T
G
A
V
L
YR
G
R
ST
DG
I A
G
A
I K
C
V
V G
A K
V
K
C
V
K
P D
SQE A L
S
M
A
E
CG
YL
L L
G R
T
E
N
R
T
L A T
T
L
R
D
L
D
S
I
AA
P
A
K
L
FL R
C
S
Y
AK
N
V
P
L
K
L
L
NH2
Q
R
NT
V
L
Q L
NP S
N
F
E
T
E
VI
T
L
TR
P V
E
T
T
V
A
E
I
R
S
SD
W
Primary structure of darbepoetin alfa aglycone. New asparagine residues, to which new cabohydrate chains are attached, are in red, other
changed amino acid residues in blue.
1.6 Faktory stimulující kolonie (CSF)
= proteins supporting survival and expansion of pluripotent stem cells
and stimulate them to differentiation into various types of leukocytes
GM-CSF: Granulocyte macrophage colony stimulating factor
10 20 30 40 50
MWLQSLLLLG TVACSISAPA RSPSPSTQPW EHVNAIQEAR RLLNLSRDTA
60 70 80 90 100
AEMNETVEVI SEMFDLQEPT CLQTRLELYK QGLRGSLTKL KGPLTMMASH
110 120 130 140
YKQHCPPTPE TSCATQIITF ESFKENLKDF LLVIPFDCWE PVQE
signaling peptide
GM-CSF
Sites of glycosylation: O-: Ser22, Ser24, Ser26, Thr27; N-: Asn44, Asn54
https://www.uniprot.org/uniprot/P04141
1.6 Imunomodulátory – faktory stimulující kolonie
molgramostim
= rekombinantní forma faktoru stimulujícího kolonie granulocytů a makrofágů (GM-CSF)
●
stimuluje diferenciaci a proliferaci pluripotentních kmenových buněk leukocytů ve zralé granulocyty a
makrofágy
●
není glykosylovaný
●
výroba rekombinantní technikou za použití bakterií jako hostitelských buněk
●
léčba leukopenie při chemoterapii nádorů a AIDS (Leucomax ®)
sargramostim
●
glykosylovaný analog GM-CSF
●
Pro23 – Leu23
●3 hlavní komponenty o Mr
19 500, 16 800 a 15 500
●
rekombinantně na S. cerevisiae
●
při útlumu tvorby leukocytů při chemoterapii; pro mobilizaci leukocytů v periferní krvi před
leukaferézou; pro urychlení normalizace počtu leukocytů po transplantaci kostní dřeně
●
Leukine ® (reg. v USA)
Filgrastim a pegfilgrastim
G-CSF = humánní faktor stimulující kolonie neutrofilních granulocytů; neglykosylovaný, 174 AK
Sekvence G-CSF a jeho prekurzoru
●
filgrastim: analog G-CSF s přidaným Met na N-konci
●
rekombinantně na E. coli
●
léčba neutropenie při chemoterapii nádorových onemocnění a při AIDS
●
s.c., i.v.
Neupogen ®, Accofil ®, Filgrastim Hexal ®, Filgrastim Ratiofarm ®, Nivestim ®, Tevagrastim ®,
Zarzio ®.
Konjugáty filgrastimu
Pegfilgrastim má kovalentně vázaný PEG řetězec o Mr
cca 20 000 na N-konci
●
připojen na aminoskupinu N-konc. Met přes propylovou spojku
●
delší eliminační poločas
●
výroba rekombinantní a polosyntetická
●
Neulasta ®
●
na 1 cyklus chemoterapie stačí jediná dávka
Konjugáty filgrastimu
lipegfilgrastim (Longquex ®)
z N-Met-G-CSF vypuštěny aminokyseliny 37-39, na OH Thr133 připojena 2-deoxy-galaktopyranosylová
jednotka, na ni molekula kys. neuraminové, na její aminoskupinu pak
fragment N-karboxyglycinu, na který je karbamátovou vazbou konečně napojen
polyoxoethylenový řetězec, zakončený CH3
●glykosylovaný; celková Mr je asi 39 000
balugrastim (CG10639) = konjugát G-CSF, z jehož sekvence byly vypuštěny Ala1, Val37, Ser38
a Glu39, s humánním sérovým albuminem o 585 AK
●celková sekvence 759 AK, Mr cca 85 000
●T1/2
cca 19 dní !
●
ve studiích 2. a 3. fáze při léčbě nádoru prsu účinnost srovnatelná s pegfilgrastimem
Human stem cell factor (SCF)
1 MEGICRNRVT NNVKDVTKLV ANLPKDYMIT LKYVPGMDVL PSHCWISEMV
51 VQLSDSLTDL LDKFSNISEG LSNYSIIDKL VNIVDDLVEC VKENSSKDLK
101 KSFKSPEPRL FTPEEFFRIF NRSIDAFKDF VVASETSDCV VSSTLSPEKD
151 SRVSVTKPFM LPPVAA
●
ligand for the receptor-type protein-tyrosine kinase KIT ( synonym KITLG).
●
plays an essential role in the regulation of cell survival and proliferation,
hematopoiesis, stem cell maintenance, gametogenesis, mast cell development,
migration and function, and in melanogenesis
●
KITLG/SCF binding can activate several signaling pathways
●
166 AA
●
two differentially glycosylated forms, LMW-SCF and HMW-SCF
●
peripheral blood progenitor cell mobilization
http://www.uniprot.org/uniprot/P21583
A recombinant form of SCF: ancestim (Stemgen ®)
●
dimer
●
non-glycosylated
●
indicated for the setting of autologous peripheral blood progenitor cell transplantation in
patients at risk of poor peripheral blood progenitor cell mobilisation combined with filgrastim
●
temporarily approved e.g. in Canada and New Zealand, currently withdrawn
●
namísto něj používána malá molekula – plerixafor Mozobil ®
http://www.medsafe.govt.nz/regulatory/ProductDetail.asp?ID=8093
1.7 Imunomodulátory - interferony
interferon 2
Interferoni alfa-2 solutio concentrata ČL 2017
X1 = Lys 2a
X1 = Arg 2b
●
protivirová aktivita v průběhu syntézy virové RNA a bílkoviny
●
antiproliferační aktivita
●
výroba rekombinantní technikou na bakteriích
●
Introna ® , Roferon ®
●
též pegylovaný: peginterferon alfa-2a (Pegasys ® ) - na N-konci N2
, N6
-dikarboxy-Lys
esterifikovaný PEG-monomethyletherem
interferon 
= peptid ze 166 AK
●
produkován fibroblasty jako odpověď na stimulaci živým nebo inaktivovaným virem nebo dvouvláknovou RNA
●
terapie roztroušené sklerózy
●
Avonex ® , Betaferon ® , Extavia ® : i.m. injekce
interferon 1b
●
vylučován lidskými T-lymfocyty jako odpověď na virové infekce a jiná agens
●
imunomodulační účinky
●
nekovalentní dimer 2 identických monomerů
Sekvence monomeru:
●
výroba rekombinantní technikou na bakteriích
Interferoni gamma-1b solutio concentrata ČL 2017
●
roztok formy interferonu , která má na N-konci Met