1) Onkofetální antigeny
• CEA (karcinoembryonální antigen)
• AFP (a1-fetoprotein)
• CA 19-9 (carbohydrate antigen 19-9)
• CA 50 (carbohydrate antigen 50)
• CA 195 (carbohydrate antigen 195)
CA 242 (carbohydrate antigen 242)
• CA 72-4 (carbohydrate antigen 72-4, = Tu
asociovaný antigen – TAG 72)
• CA 125 (carbohydrate antigen 125)
• CA 15-3 (carbohydrate antigen 15-3)
• MCA (mucinous carcinoma antigen), MSA (mamární
sérový antigen)
• SCC, lépe SCCA (squamous cell carcinoma antigen)
• CYFRA 21-1 (cytokeratin fragment)
4710_narodové markery
CEA (karcinoembryonální antigen)
• onkofetální glykoprotein vyskytující se především v epitelu GIT,
bronchů a prsní žlázy; nejdéle stanovovaný Tu marker,
• podílí se pravděpodobně na procesu adheze a metastazování
buněk
• ↑: *Ca tlustého střeva, pankreatu, žaludku, žlučových cest
• *Ca vaječníků, dělohy, prostaty, plic, prsu
*chronické selhání ledvin, jater, nespecifické střevní
záněty, TBC, autoimunitní choroby ad.
*kuřáci
• In: kontrola léčby kolorektálního Ca a Ca prsu, určení
prognózy kolorektálního Ca
• cut off < 5,0 ng/ml; patologické hodnoty 8,0 ng/ml;
48TEST 10_narodové markery
AFP (a1-fetoprotein)
• onkofetální protein fyziologicky produkovaný žloutkovým
váčkem a játry plodu, má transportní fci (vazba steroidů,
těžkých kovů, bil, MK, retinoidů, drog, ATB)
• ↑: *primární Ca jater (kromě anaplastického), metastázy
jiných malignit do jater, germinální Tu
*Ca GIT, pankreatu, prsu, bronchů
*jaterní cirhóza, hepatitida, chronické renální selhání
*Downův sy a rozštěpy neurální trubice v graviditě
• In: dg a monitoring primárního Ca jater a germinálních
Tu, monitorování HbsAg a antiHCV pozitivních pacientů
• cut off < 10 mg/l
49
TEST 10_narodové markery
CA 19-9 (carbohydrate antigen 19-9)
• glykoprotein fetálního epitelu GIT, pankreatu a jater; u dospělých je
velice omezeně produkován epitelem bronchů a GIT, obsahuje
determinant krevní skupiny sialylovaný antigen Lewis a (gen na chr.
19, Ag netvoří 5-10% populace)
• ↑: *Ca pankreatu
*Ca žlučníku a žlučových cest, jater, GIT; prsu, dělohy, ovarií
*onemocnění žlučových cest, jater, žaludku a střeva
• In: monitoring Ca pankreatu, žaludku a kolorektálního Ca, dg a
monitoring Ca žlučníku, žlučových cest a jater
• cut off ≤ 40 IU/ml
5010_narodové markery
2) onkoplacentární antigeny:
• hCG (lidský choriový gonadotropin)
• SP-1 (Schwangerschaftsprotein;
b1-specifický těhotenský glykoprotein)
5110_narodové markery
hCG (lidský choriový gonadotropin)
• Glykoprotein (sialová kyselina) tvořený trofoblastickými buňkami
placenty. Skládá se z a a b podjednotky, která může být štěpena na
močový gonadotropinový peptid b-core fragment. Stanovuje se celk.
hCG, b-podjednotka (nejčastěji) nebo b-core fragment.
• ↑: *mola hydatidosa, chorio Ca, Ca testes, ovarií
*malobuněčný Ca plic, Ca GIT, jater, ledvin, prsu
*ovariální cysta, myom
*těhotenství (FYZIOLOGICKY), menopauza
• In: dg a monitoring moly a nádorů germinativního původu
• Jeho hladina v séru se zvyšuje s růstem nádoru
• cut off < 2,00 IU/l muži, < 10,00 IU/l netěhotné ženy (bhCG) 52
TEST
10_narodové markery
SP-1 (Schwangerschaftsprotein;
b1-specifický těhotenský glykoprotein)
• směs glykoproteinů produkovaných trofoblastickými
buňkami placenty
• ↑: *stejné jako hCG, tj. chorioCa, germinativní Tu
*těhotenství
5310_narodové markery
3) enzymy:
• PSA (prostatický sérový antigen)
• NSE (neuron specifická enoláza)
• ProGRP (pro-gastrin-releasing peptide)
• TK (thymidinkináza)
• LD (laktátdehydrogenáza)
• ALP (alkalická fosfatáza)
• Tumor M2-PK
(nádorový izoenzym pyruvátkinázy)
• GC-C (guanylyl-cykláza c)
• Kathepsiny
54
TEST
10_narodové markery
PSA (prostatický sérový antigen)
• objev 1979, nejvýznamnější marker pro včasnou detekci a
monitoring. Glykoproteinová proteáza (1 řet., 237 AK, Mr = 33 000)
produkovaná epiteliálními bb. prostaty zdravé i maligně
transformované, sekretována do seminální tekutiny, kt. zkapalňuje.
V séru 85% ve formě vázané (a1-antichymotrypsin, a2-makroglobulin)
a volný – fPSA.
• Poměr volného a vázaného PSA je důležitý pro rozlišení benigní
hypertrofie od adenokarcinomu prostaty
• ↑: *Ca prostaty (senzitivita 73%)
*Ca kolorektální, plic, prsu, nadledvin, jater
*jiná postižení prostaty (zánět, ben. hyperplázie BHP),
urologické manipulace
• In: screening (muži > 50 let 1x ročně, rodinná zátěž, mikční obtíže),
dg a monitoring průběhu a léčby Ca prostaty, monitoring BHP
cut off 4,0 µg/l (= ng/ml) (> 50 let), 2,5 µg/l (< 50 let, viz. dále věkově
specifické intervaly)
5510_narodové markery
TEST
NSE (neuron specifická enoláza)
• enzym glykolýzy (2-fosfoglycerát → fosfoenolpyruvát),
výskyt v neuroendokrinních strukturách
• ↑: *Tu neuroektodermového původu (neuroblastom,
meduloblastom, retinoblastom), neuroendokrinního
původu (malobuněčný plicní Ca, medulární Ca
tyroidey, karcinoid, feochromocytom), APUDomy
*seminom, Ca ledvin
*choroby plic a jater, renální selhání
• In: dg a monitoring malobuněčného Ca plic aj.
neuroendokrinních a neuroektodermálních nádorů
doplňkový marker pro dg seminomu
• cut off < 15 mg/l
5610_narodové markery
ProGRP (pro-gastrin-releasing peptide)
• není enzym!; prekursor tzv. gastrin-releasing peptidů –
hormonů vyskytujících se v GIT, nervové tkáni a u
malobuněčného plicního Ca
• ↑: * malobuněčný plicní Ca
* benigní onemocnění plic
* ↓ renálních fcí
• In: dg a monitoring malobuněčného Ca plic, dif. dg plicních
ložisek (malobuněčný x nemalobuněčný)
• cut off 22,3 ng/l (zdravý), 38,3 ng/l (při benigním postižení
plic)
5710_narodové markery
TK (thymidinkináza)
• enzym syntézy DNA (thymidin → thymidinmonofosfát),
inkorporace Thymidinu do DNA, během S fáze.
• 2 izoenzymy: 95% TK1 (fetální, cytoplazmatická), 5% TK2
(adultní, mtch).
• ↑: *hematologické malignity
*melanom,Ca tyroidey, plic, prsu, prostaty, testes,
kolorektální, močového měchýře
*psoriáza, virózy, sarkoidóza, kolagenózy, revmatická
onemocnění, perniciózní a megaloblastická anémie
• In: dg a monitoring hemoblastóz a lymfomů
doplňkový marker u všech nádorových diagnóz pro
určení stupně proliferace, signalizuje ↑ agresivitu
-velikost koreluje s velikostí nádoru, i s proliferační aktivitiou
• cut off < 9 IU/l (hladinu stanovit před zahájením chemoterapie,
inhibitory syntézy DNA způs. falešnou pozitivitu TK!)
5810_narodové markery
LD (laktátdehydrogenáza)
• enzym glykolýzy (laktát ↔ pyruvát). Vyšetření je velmi
nespecifické. Hladina koreluje s velikostí nádorové masy.
• v současnosti LD i její izoenzymy řadíme k obsoletním
vyšetřením!
• ↑: *hematologické malignity, zvláště akutní leukemie,
non-hodgkinský lymfom
* ostatní nádory
*↑ izoenzymu LD5 spojeno s jaterními
metastázami. * srdeční selhání, hypotyreóza,
anémie, onemocnění plic, jater (izoenzymy)
• In: monitoring léčby akutní leukemie, non-hodgkinského
lymfomu, testikulárního Ca a Ewingova Sa
• ref. hodnoty : ♂ 3,3 - 7,5 mkat/l, ♀ 3,3 - 6,3 mkat/l
5910_narodové markery
ALP (alkalická fosfatáza)
• Zn2+ glykoprotein katalyzujcí v alkalickém prostředí (pH= 8-
10) hydrolýzu monoesterů H3PO4 a transfosforylaci (přenos
fosfátové skupiny na jiný alkohol za vzniku esteru)
• kostní izoenzym (B-ALP)
• ↑: *osteoSa, kostní metastázy
*jiná postižení kostí
*růst
• jaterní izoenzym (L-ALP)
• ↑: *jaterní metastázy
*jiná onemocnění jater
• Reganův izoenzym (podobný placentárnímu)
• ↑: Tu GIT, plic
• ref. hodnoty : dospělí 0,5-2,15 mkat/l, 1 měsíc - 15 let
1,35-7,5 mkat/l, novorozenci 1,2-6,3
mkat/l 6010_narodové markery
Tumor M2-PK
(nádorový izoenzym pyruvátkinázy)
• enzym glykolýzy (fosfoenolpyruvát → pyruvát).
Maligní izoenzym – dimer, nemaligní – tetramer.
Nový marker pro nádory, kde není možnost stanovení
jiného solubilního markeru.
• ↑: *Ca testes, ledvin, plic, prsu, pankreatu,
tlustého střeva *zánětlivá
onem., poruchy renální fce
• cut off = 30 U/ml
6110_narodové markery
GC-C (guanylyl-cykláza c)
• enzym katalyzující syntézu cGMP z GTP lokalizovaný v
epiteliálních bb. GIT. Receptor pro termostabilní průjem
způsobující enterotoxiny (např. z E. coli).
• nový marker pro průkaz metaplazie epitelu,
detekuje 1 maligní buňku na 10 milionů
normálních – v současnosti nejpreciznější
dostupný Tu marker
• ↑: *Ca jícnu
*Ca žaludku, tlustého střeva
6210_narodové markery
Kathepsiny
• lyzosomální proteinázy, které se podílejí na degradaci pojivové tkáně
a buněčných membrán, čímž usnadňují progresi nádoru a tvorbu
metastáz
• Kathepsin B ↑: Ca mammae, ovaria, kolorektálního,
žaludku, laryngu
• Kathepsin H ↑: Ca mammae, plic, hlavy a krku, hlavně
při progresi a metastázách
• Kathepsin D ↑: adenoCa mammae
• Kathepsin K zprostředkovává resorpci kostí za
fyziologických podmínek
6310_narodové markery
4) hormony:
• Prolaktin
• ACTH (adrenokortikotropní hormon)
• PTH (parathormon)
• Kalcitonin
• Další hormony-inzulin, glukagon, VIP,
gastrin, dopamin, adrenalin, noradrenalin
• TG (tyreoglobulin)
64
TEST
10_narodové markery
Prolaktin
• peptidový (198 AK) hormon produkovaný eosinofilními buňkami
předního laloku hypofýzy. Sekrece stimulována TRH a inhibována
dopaminem. V prsu stimuluje lobuloalveolární růst a laktaci.
• ↑: *prolaktinom * Ca
prostaty, prsu
• ref. hodnoty muži 80 – 390 mIU/l
ženy netěhotné, nekojící 70 – 520 mIU/l
• cirkadiánní rytmus s maximem brzy ráno u obou pohlaví
65TEST 10_narodové markery
ACTH (adrenokortikotropní hormon)
• polypeptidický (39 AK) hormon předního laloku hypofýzy, stimuluje
sekreci glukokortikoidů. Jeho sekrece stimulována kortikotropinreleasing
hormonem hypotalamu.
• ↑: *nádory hypofýzy
*ektopická tvorba: SCLC, Ca pankreatu, prsu, GIT *m.
Addison, centrální Cushingův sy
• fyziologické rozmezí 10-60 ng/l; cut off okolo 46,0 ng/l (cirkadiánní
rytmus s maximem brzy ráno – dodržet odběr mezi 6:00 – 10:00)
6610_narodové markery
ADH (antidiuretický hormon)
• peptidový (9 AK) hormon hypothalamu. Stimulací inzerce aquaporinů
2 do membrány distálních a sběrných kanálků a ↑ transkripce genu
pro AQP2 umožňuje reabsorpci vody zpět do cirkulace.
• ↑: *SCLC, adenoCa plic *pneumonie,
porfyrie
• ref. interval 2 - 8 ng/l
6710_narodové markery
PTH (parathormon)
• peptidový (84 AK) hormon tvořený na ribosomech příštítných tělísek.
Syntéza a exkrece řízeny kalcemií. Účinky PTH směřují k jejímu
zvýšení: aktivace osteoklastů, zvýšení resorpce Ca++ v ledvinách a
zvýšení vstřebávání Ca++ střevem stimulací tvorby D-hormonu v
ledvinách.
• ↑: *Tu příštítných tělísek
*sekundární a primární hyperparatyreóza
• ref. hodnoty 10 – 65 ng/l, 1,6 – 6,9 pmol/l
6810_narodové markery
Kalcitonin
• peptidový (32 AK) hormon produkovaný parafolikulárními (=C)
buňkami štítné žlázy. Potlačuje uvolňování Ca++ z kostí inhibicí
osteoklastů.
• ↑: *medulární Ca tyroidey, včetně MEN sy *Ca
plic, prsu, ledvin, jater, karcinoid
• In: monitoring medulárního Ca tyroidey, záchyt metastáz
• cut off ≤ 19 ng/l
6910_narodové markery
Další hormonální markery
• hormony fyziologicky produkované jednotlivými
endokrinními žlázami, v přítomnosti maligního
onemocnění ve ↑ míře, příp. ektopicky
• inzulin, glukagon, VIP, gastrin, dopamin, adrenalin,
noradrenalin
7010_narodové markery
TG (tyreoglobulin)
• glykoprotein obsahující jód, za normálních podmínek
syntetizován ve folikulárních buňkách štítné žlázy. Funguje
jako prohormon pro T4 a T3.
• ↑: * papilární a folikulární Ca tyroidey * m.
Basedow, tyroiditida, akutní intermitentní porfyrie,
jaterní postižení, VVV *
těhotenství, novorozenci, estrogeny
• In: sledování postoperačního stavu pacientů u Ca
tyroidey (ne medulárního!)
• normální hodnoty 2 - 70 ng/ml; cut off okolo 33 ng/ml
(současně stanovit PL x TG, které mohou způsobit faleš.
negativitu) 7110_narodové markery
5) sérové bílkoviny:
• Feritin
• β2-M (β2-mikroglobulin)
• Monoklonální imunoglobuliny (paraproteiny)
• hMAM, MGB 1 (human mamaglobin)
7210_narodové markery
Feritin
• zásobní protein obsahující železo (Fe3+), produkován
retikuloendoteliálními bb. jater, sleziny, kostní dřeně
• ↑: *AML, lymfomy, MM, melanom, neuroblastom, hepatom, Ca
mammae
• *akutní hepatitida a nekróza jaterních buněk, záněty (pozitivní
RAF)
• In: monitoring Hodgkinova lymfomu a melanomu
• ref. hodnoty muži, postmenopauzální ženy 48 - 708 pmol/l,
ženy 20 - 640 pmol/l
• cut off muži, postmenopauzální ženy 400 mg/l,
ženy 150 mg/l
7310_narodové markery
β2-M (β2-mikroglobulin)
• součást HLA 1. třídy, napomáhá funkci TC . Fyziologická produkce
je nejintenzivnější v B-lymfocytech a plazmocytech; přítomen ve
všech bb. kromě ery a trofoblastických.
• ↑: *leukémie, lymfomy B-řady, mnohočetný myelom
*chronické autoimunitní záněty a choroby ledvin a
jater
*po chemo- a aktinoterapii
• In: dg MM, volba cílené léčby u CLL
• cut off = 2,4 mg/l
7410_narodové markery
Monoklonální imunoglobuliny (paraproteiny)
• produkovány nádorovými buňkami (plazmocyty) u monoklonálních
gamapatií. V séru se identifikují celé Ig, těžké řetězce (IgG, M, A; D, E)
a volné lehké řetězce k a l (Bence-Jonesovy bílkoviny), ty vzhledem k
nízké Mr (cca 22000) přecházejí do moče → prerenální „over-flow“
proteinurie.
• ↑: *mnohočetný myelom, Waldenströmova
makroglobulinémie, lymfomy, leukémie, osteogenní Sa,
kostní metastázy
*monoklonální gamapatie nejistého významu (MGUS)
(benigní ?, pouze nález paraproteinu bez jiných klin. symptomů)
• In: dg, dif. dg a monitoring MM
• ref. hodnoty: S-VLŘ (volné lehké řet./S): k = 3,3-
19,4 mg/l, l = 5,7-26,3 mg/l, index k/l = 0,26-1,65, jiné u CHRI;
polyklonální VLŘ/U = 1-10 mg/24h; k/U = 1,25-5,5
mg/l, l/U = 0,51-3,2 mg/l, index k/l = 0,82-3,0
7510_narodové markery
hMAM, MGB 1 (human mamaglobin)
• nový marker Ca prsu
• kyselý glykopeptid (Mr = 10 500, gen na chr. 11q12.2) z
rodiny sekretoglobinů (uteroglobinů)
• mRNAmamaglobin: 10 – 20x zvýšený u Ca prsu
• In: * detekce mikrometastáz
* screening/časná diagnostika
* určení prognózy (pozitivita v uzlinách)
* sledování účinnosti terapie a průběhu
choroby
7610_narodové markery
6) receptory (tkáňové markery):
• Estrogenový a progesteronový receptor
• Amplifikace Her2
• EGFR (epidermal growth factor receptor)
77
TEST
10_narodové markery
Estrogenový a progesteronový receptor
• Nejvýznamnější prognostické markery Ca prsu.
Průkaz v homogenátu nádorové tkáně
(imunohistochemicky,ELISA, ligandovou analýzou) .
• In: Ca prsu: pozitivita = ↑ diferenciace bb., ↓
invazivita, lepší prognóza; je indikací k léčbě
antiestrogeny
• imunohistochemický průkaz: hodnotí se %
pozitivity
• ELISA: cut off < 15 fmol/mg proteinu
7810_narodové markeryTEST
Amplifikace Her2
• Her2/neu (erbB2) = gen na chromozómu 17q, jeho
produktem je transmembránový receptor s
tyrosinkinázovou aktivitou.
• Prognostický a prediktivní faktor invazivního Ca
mammae spojený s horší prognózou
• Prokazuje se amplifikace genu (fluorescenční in situ
hybridizací - FISH), exprese vlastního receptoru
(imunohistochemicky) nebo extracelulární doména
receptoru uvolňovaná do krve (ELISA, toto stanovení
se zatím nedoporučuje).
• U amplifikace Her2/neu pozitivních pacientek lze k
terapii využít monoklonální PL x extracelulární
doméně = preparát trastuzumab.
7910_narodové markery
EGFR (epidermal growth factor receptor)
• ↑ exprese vede k ↑ proliferaci a motilitě bb. a ochraně před
apoptózou. Inhibice aktivity → inhibice buň. proliferace,
angiogeneze, motility a metastazování, podpora apoptózy.
• ↑ exprese u 85 % pacientů s kolorektálním Ca (= horší
prognóza)
• průkaz imunohistochemicky
• v případě pozitivity možno k terapii využít inhibitory EGFR monoklonální
PL x EGFR (např. preparát cetuximab, erlotinib)
8010_narodové markery
• 7) ostatní:
• Aneuploidie DNA
• TPA, TPS [tkáňový polypeptidický
(specifický) antigen]
• CgA (chromogranin A)
• Neuropeptid Y
• S-100 b
• 5-HIOK (5-hydroxyindoloctová kyselina)
8110_narodové markery
DNA plodie
• cytometrické vyšetření obsahu DNA v nádorové
tkáni; doplnění histologického nálezu
• spojena s horší prognózou u CaP a kratším
přežitím u Ca střeva a mozkových Tu
8210_narodové markery
Aneuploidie DNA- odchylky od normálního
počtu chromozomů
TPA, TPS [tkáňový polypeptidický
(specifický) antigen]
• nespecifické fragmenty cytokeratinů (TPA 8, 18, 19; TPS 18) tvořené
normálními i nádorovými buňkami, ve zvýšené míře při nárůstu
proliferační aktivity
• ↑: *Ca prsu, GIT, ledvin, moč. měchýře *Ca
žlučníku, jater, pankreatu, plic,varlat, prostaty, štítné žlázy,
dělohy, ovarií, Tu orofaciální oblasti
*hepatitida, jaterní cirhóza, DM, revmatická
onemocnění, záněty urogenitálního traktu a plic
• In: monitoring Tu močového měchýře, prsu, plic, GIT, ledvin
• cut off ≤ 140 IU/l
8310_narodové markery
CgA (chromogranin A)
• glykoprotein sekrečních granulí neuroendokrinních bb. Prekurzor
funkčních peptidů, např. vazostatinu, pankreastatinu, parastatinu.
Reguluje ukládání a/nebo sekreci hormonů a peptidů v buňce.
• ↑: *neuroendokrinní Tu *renální a
hepatální onemocnění, léčba kortikosteroidy
• In: dg a monitoring karcinoidu, feochromocytomu, SCLC, MEN I,
neuroendokrinních Tu GIT, dětských neuroblastomů
• ref. hodnota < 35 mg/l
8410_narodové markery
S-100 b
• Ca2+- vázající protein exprimovaný gliovými a Schwanovými bb.
NS a melanomy. S-100 je homo nebo heterodimer z podjednotek
a a b (NS b-b, sval a-a). Účastní se přenosu signálu, regulace
enzymové aktivity a homeostázy → stimuluje růst neuronů a ↑
jejich přežití.
• ↑: *maligní melanom klin. stadia II, III a IV (a-podj. v
dysplastických névech, b-podj. = invazivita)
*Downova a Alzheimerova chor.
*poranění mozku, kostí, infekty
• In: monitoring maligního melanomu
• cut off < 0,1 mg/l
8510_narodové markery
5-HIOK (5-hydroxyindoloctová kyselina)
• produkt metabolismu serotoninu, který vzniká z tryptofanu
• ↑: *karcinoid aj. neuroendokrinní Tu
*astma, průjmy aj. onemocnění GIT
• In: dg a monitoring léčby serotonin-produkujícího karcinoidního
tumoru
• Normální hodnoty/ U ≤ 50 µmol/24h
• Stanovuje se ve 24 hod sběru moči (dieta 2 dny před sběrem a během
sběru: vynechat kávu a jiné potraviny s kofeinem, silný čaj, alkohol, kakao,
ořechy, čokoládu, potraviny s vanilinem, sýry, kiwi, ananas, banány, citrusy,
zeleninu, bylinkové čaje, ovocné šťávy = zdroje Trp)
8610_narodové markery
87
(Racek, 2006)
10_narodové markery
88
Pozitivita Tu markerů u benigních onemocnění
(Klinickábiochemieametabolismus,2009)
10_narodové markery
Markery pro dg a monitorování kostních metastáz
• P1NP (N-terminální propeptid prokolagenu typu 1):
monitoring kostní novotvorby, vysoce specifický pro tvorbu
osteoblastických metastáz. Uvolňován do IC prostředí v kostní matrix
během tvorby kolagenu, následně do krve → stanovení /S.
• ↑: MM, CaP, osteoporóza, hyperparathyreóza, hyperthyreóza
• In: dg kostního rozsevu solidních Tu a MM
• cut off muži < 65 mg/l, ženy < 74 mg/l
8910_narodové markery
Markery pro dg a monitorování kostních metastáz
• b-CTX (b-Cross Laps, C-terminální telopeptid): marker
kostní resorpce
• In: dg kostního rozsevu solidních Tu (hl. CaP), monitoring
účinnosti antiresorpční terapie
• ref. hodnota < 0,704 mg/l
• ICTP (telopeptid kolagenu typu I):
koncová nehelikální část kolagenu I, marker kostní resorpce
zprostředkované MMP9 (matrix metaloproteinázou 9),
aktivované v patologických stavech (Fyziologickou kostní resorpci
zprostředkovává kathepsin K.)
• ↑: *osteolytické metastázy
*revmatoidní artritida, imobilizace, ↓ renální fce
• In: monitoring léčby
• cut off 5,3 mg/l
9010_narodové markery
Nové biomarkery v diagnostice mezoteliomu
• Mezotelin, SMRP (soluble mesothelin-related
proteins, MESOMARK)
• MPF (megakaryocyty potencující faktor)
• osteopontin
91
Mezoteliom je nádor vycházející z mezotelu (výstelka tělních dutin pocházející z
coelomového epitelu − mezodermálního původu).
Biologická povaha mezoteliomu může být benigní i maligní (u maligních mezoteliomů je
charakteristické implantační metastazování – diseminace po seróze (tzv. difuzní maligní
mezoteliom), vzniká deskovité ztluštění viscerálního i parietálního serózního listu, dále
nádor invazivně vrůstá do tělní stěny a do vnitřních orgánů).
10_narodové markery
Další perspektivní prognostické a prediktivní
markery
• MMP-7 (matrilyzin): metaloproteináza působící při
degradaci EC matrix, invazi a progresi Tu
• In: léčba Ca prsu
• Heparanáza: štěpí heparan-sulfát. ↑ metastatický
potenciál Tu, ↓ pooperační přežívání; např. u Ca
pankreatu.
9210_narodové markery
Další perspektivní prognostické a prediktivní
markery
• sIL-2Ra (rozpustný fragment receptoru pro
interleukin 2a): prognostický marker spinocelulárních Ca
hlavy a krku; dříve používán u hemoblastóz
• RECAF (receptor pro AFP): slouží ke vnášení molekul do
fetálních a maligních bb., kde exprimován. Stanovitelný ve
tkáni Ca prsu, ovarií, plic, žaludku, prostaty, čípku, lymfomu,
melanomu ad.
9310_narodové markery
Další perspektivní prognostické a prediktivní
markery
• Kallikreiny (hK = human kallikrein)
• Ser proteázy exprimované hormonálně závislými tkáněmi
• hK2 - prostata, diff. dg CaP x BHP
• hK3 = PSA
• hK4 - žlázový epitel prostaty, matrix zubní skloviny
• hK11 - žlázový epitel prostaty, diff. dg CaP x BHP
• hK14 - ovariální Ca
• hK15
9410_narodové markery
Geny jako tumor markery
• BCR-abl gen na filadelfském chromozómu – CML
• gen PML-RAR – promyelocytární leukémie
• genové mutace, např. BAT-26, APC, K-ras, p53 –
kolorektální Ca; BRCA1, 2, HER2/neu (=erbB2, viz.
výše), c-myc, ras, p53 – Ca prsu
95
TEST
10_narodové markery
8) CIRKULUJÍCÍ BUNĚČNÉ ELEMENTY
Maligní buňky cirkulují v periferní krvi pacientů se solidním nádem. Je možné je
detekovat na základě přítomnosti nukleových kyselin; stanovení na základě průkazu
DNA je vhodné především u nádorů se specifickými genetickými abnormalitami
(detekce fúzních genů, mutace Ras, či p53) častěji se provádí stanovení na základě
qrt-PCR mRNA, kdy je cílový transkript exprimován specificky v nádorových buňkách
(gen pro CEA, AFP, tyrozinázu).
Hodnocení: Cirkulující nádorové buňky je možné detekovat metodami molekulární
biologie a pomocí průtokové cytometrie, většinou na základě exprese povrchových
znaků epiteliálních buněk nebo adhezivních molekul (EpCAM). Před tuto metodu je
možné předřadit koncentrační krok založený na izolaci buněk pomocí
paramagnetických částic.
Doporučené použití pro klinické účely: Jde o postupy nové, vhodné spíše pro
specializovaná pracoviště.
Množství nádorových buněk cirkulujících v periferní krvi se zdá být prognostickým
faktorem a ukazatelem progrese a rozsahu onemocnění, především u melanomu,
karcinomu prsu, prostaty a kolorekta.
10_narodové markery 96
Markery angiogeneze
• CEC (cirkulující endotelové bb.) a EPC (cirkulující endoteliální prekurzory)
Nádorová angiogeneze/neovaskularizace umožňuje růst nádoru!
Význam stanovení díky novým terapeutikům
– inhibitorům angiogeneze (např. bevacizumab, sunitinib)
Metodika stanovení: průtoková cytometrie na základě exprese specifických povrchových
markerů (CD 146, 31, 105 aj.)
Angiogenezi přímo v nádoru je možné stanovit na základě hodnocení denzity kapilár ve
tkáni a na úrovni systémové je možné detekovat řadu aktivátorů např. VEGF, bFGF, IL-8,
EGF nebo inhibitorů (angiostatin, endostatin, trombospondin) angiogeneze, které se do
periferní krve uvolňují z nádoru. Řada těchto molekul je produkována krevními destičkami,
případně leukocyty, proto sérum není vhodným materiálem pro stanovení těchto molekul.
Nejvhodnějším materiálem se zdá být plazma s aditivy inhibujícími aktivaci destiček
(CTADzkumavka).Aktivaci angiogeneze lze hodnotit na základě přítomnosti endoteliálních
buněk v cirkulaci.
Hodnocení: Průtokovou cytometrií na základě exprese specifických povrchových markerů
(CD146,CD31, VEGF-R2, CD105) je možné detekovat různé buněčné subsety včetně
aktivovaných endoteliálních buněk, zralých endoteliálních buněk, a endoteliálních progenitorů
odvozených z kostní dřeně. Doporučené použití pro klinické účely: I když jde zatím spíše o
metody vhodné pro specializovaná pracoviště, má hodnocení parametrů angiogeneze
narůstající význam především díky novým protinádorovým terapeutikům – inhibitorům
angiogeneze např. bevacizumab, sunitinib.
9710_narodové markery
Genetické změny při rozvoji kolorektálního Ca
Chromozóm 5q 12q 17p 18q
Mutace ztráta aktivace ztráta ztráta
APC, K-ras p23, BAT-26 DCC
b-katenin
98
pozdní
Ca
normální
epitel adenom
pozdní
adeno
m časný Ca
Zásadní mutace pro ↑ expresi EGFR
(mutovaná alela = ↑ exprese EGFR, nelze ovlivnit cetuximabem;
nemutovaná „wild-type“ alela – lze zablokovat cetuximabem)
10_narodové markery
99
Co je dobré si zapamatovat:
I. Látky známé jako tumor markery se v určité koncentraci vyskytují v těle každého z nás.
U většiny zdravých jedinců se nicméně vyskytují v nízké koncentraci. Je to zvýšená
koncentrace tumor markerů, co nás znepokojuje, nikoliv jejich pouhá přítomnost.
II. Tumor markery nejsou příliš spolehlivé. Může se snadno stát, že u člověka s nádorem
nebudou zvýšené, nebo že naopak budou zvýšené u člověka bez nádorového
onemocnění (záněty, nezhoubné nádory, neznámá příčina). Proto je náhodně zjištěné
zvýšení specifického tumor markeru spíše určitým vodítkem, že se v určité tělní soustavě
může dít něco nenormálního, a že bychom měli tuto soustavu dále vyšetřovat.
III. Kupodivu největší význam tumor markerů je až po nálezu určitého nádoru. Růst
koncentrace příslušného tumor markeru v krvi je totiž velmi často přímo úměrný
počtu nádorových buněk v těle. Pokud víme o existenci nádoru, změříme koncentraci
příslušného tumor markeru a pak začneme s léčbou (chirurgie, ozařování, chemoterapie).
Během léčby průběžně sledujeme koncentraci tumor markeru a v případě úspěšné
likvidace nádoru by měla koncentrace klesat. Po zaléčení pacient dochází na pravidelné
kontroly, kde se opět zjišťují koncentrace tumor markeru. Zůstávají-li nízké, stav pacienta
je stabilizovaný. Pokud se jejich hodnota zvýší, znamená to, že se nádorový proces opět
rozeběhl, a že je nutná další léčba.
10_narodové markery