Kalibrace PT na Sysmex CA 560 Jindra Kučerová Centrální laboratoře Sysmex CA 560 Sysmex CA 560 Sysmex CA 560  Sysmex® CA 560 je automatický koagulometr pro kvantitativní stanovení koagulačních, chromogenních a imunologických (LIA) metod Popis analyzátoru  Stojan s reakčními kyvetami (ReactionTube Rack) – v jednom stojanu může být 30 kyvet, mohou se vložit 2 stojany  Vzorková jednotka (Sampler) – vpředu přístroje, jeden stojan na vzorky  Stojan na reagencie (Reagent Rack) – chlazené pozice 1, 2, 3, 4  Vzorková jednotka (Sampler) – může být vložen 1 stojan  Čtečka čárového kódu pro vzorky – pohybuje se podél stojanu se vzorky  Inkubační pozice pro vzorky – 6 inkubačních pozic  Pipetor – nabírá vzorky i reagencie, musí mít teplotu 37o  Odpadní nádoba použitých reakčních kyvet  Nádoba na kapalný odpad- kontinuální likvidace odpadu  Prostor pro promývací a ředící roztoky  Stop spínač - nouzové zastavení přístroje (např. výpadek proudu, hrozba mechanického poškození přístroje)  LCD dotyková obrazovka (display )- slouží k ovládaní přístroje  Hlavní spínač - v levém dolním rohu boční strany přístroje  Lampa  Kryt přístroje Popis analyzátoru Centrální řídící jednotka  Je zabudována v přístroji a skládá se z PC a monitoru, který slouží zároveň jako ovládací prvek touch screen.Tiskárna integrovaná a tisk probíhá na termopapír. Popis analyzátoru Pipetovací systém  Je založen na XYZ principu. Přístroj má 1 pipetovací rameno, které se pohybuje v ose XYZ. Pipetování vzorků, reagencií a diluentu probíhá podle odpovídajícího testprotokolu. Jako dávkovací zařízení je použita syringe s keramickým pístem. Pipetované objemy jsou 4- 200 µl. Jehla je před každým pipetováním proplachována vně i uvnitř v promývací stanici. V pipetoru je zabudován detektor hladiny reagencií a vzorků. Pipetor je vyhřívaný což zabezpečuje inkubaci reagencie. Popis analyzátoru Vzorky  Do přístroje je možno současně vložit až 10 vzorků (1 stojan po 10 vzorcích). Pipetor najíždí do jednotlivých vzorků. Jakmile jsou vzorky z celého stojanu napipetovány, je možno jej osadit novými vzorky a znovu zapojit do provozu.Tento postup zaručuje kontinuální přidávání vzorků bez přerušení práce přístroje. Do každého stojanu je možno umístit až 10 vzorků v různých zkumavkách. Problémy nečiní ani zkumavky o průměru 15 mm. Kontroly a kalibrátory se rovněž vkládají do stojanů pro vzorky. Přístroj má integrovanou čtečku čárových kodů pro vzorky čímž je zabezpečen proti záměně vzorků. Popis analyzátoru Reagencie  Pro vkládání reagencií jsou určeny pozice 1-10 uvnitř přístroje. Pozice 11 je určena pro čisticí roztok, pozice 12 pro pufr. Pozice 1-4 jsou chlazeny na max. 15o.C. Reagencie je možno umístit v 5 ml lahvičkách případně i cupech pro snížení mrtvého objemu Popis analyzátoru Optický systém  Zdroj světla: koagulační měřicí kanály – LED diody s vlnovou délkou 660 nm chromogenní a imunologické měřicí kanály – halogenová lampa a filtry 405, 575, 800 nm.  Koagulační metodiky: optická detekce koagula při 660 nm, Chromogenní substráty: monochromatické měření při 405 nm, Imunoturbidimetrie: monochromatické měření při 575 nebo 800 nm Použitá reagencie  Diagnostická souprava: Siemens, Dade® Thromborel S Reagent: Thromborel S obsahuje lyofilizovaný tromboplastin z lidské placenty, CaCl2 a jako protibakteriální přísadu Gentamicin 0.1 g/l.  Katalogové číslo: OUHP- 49, obsah baleni 10 x 10 ml  Příprava reagencie: Thromborel® S se rozpustí v 10 ml destilované vody- Aqua pro injectione, Braun (uvedeno na etiketě). Nechat stát 1 hod přiTlab,, potom uchovávat v ledničce. Doporučení: použít až další den po rozpuštění a skladování při 2-8oC.  NeotevřenýThromborel®S reagent je stabilní při +2 až +8oC do data uvedeného na etiketě.  Stabilita po rozpuštění  při +37 oC 8 hod (otevřená lahvička)  při +15 až +25 oC 24 hod (otevřená lahvička – v přístroji)  při +2 až +8 oC 5 dní (uzavřená lahvička)  Známka znehodnocení: změřená kontrola (např. Control Plasma N) neodpovídá deklarované hodnotě. Kdy se kalibruje?  Při změně šarže reagencie  Při nevyhovující interní kontrole kvality  Při závažném zásahu do analyzátoru Příprava kalibrátoru Standard Human Plazma (SHP) (Siemens Healthcare Diagnostic) Rozpustit v 1ml aqua for injectione a nechat 30 minut odstát Vložit do analyzátoru v racku v pozici č. 1 a změřit minimálně 2krát jako vzorek Zadání SHP jako vzorku Zadání SHP jako vzorku Zadání metody - PT Postup po změření SHP  Vypočítat průměr z měření SHP  Vypočítat hodnotu normálu Normal = průměr SHP/PR  PR je hodnota z příbalového letáku SHP Hodnotu normálu a ISI zadáme do analyzátoru Co je ISI?  Každý výrobce určí ke svému tromboplastinu hodnotu ISI (Mezinárodní index citlivosti) a tato hodnota informuje o tom, jak je určitá šarže tromboplastinu srovnatelná s mezinárodně standardizovaným vzorkem.  ISI má obvykle hodnotu mezi 1,0 a 2,0. Mezinárodní normalizační poměr INR INR se vypočte jako poměr protrombinového času pacienta a času normálního vzorku, který je umocněný na hodnotu ISI podle použitého analytického systému. Zadat šarži do analyzátoru Ověření kalibrace IKK  Změřit interní kontrolu kvality: Control Plazma N, Control Plazma P (Siemens Healthcare diagnostic)  Naměřené hodnoty nesmí mít odchylku větší než +-2SD  Ověření minimálně 5-ti pacientských vzorků, které byly změřeny před kalibrací  Pokud je vše v pořádku, je nová reagencie propuštěna do rutinního provozu Údržba analyzátoru  Denní údržba  Očistění pipetoru 70%ním alkoholem  Odstranění použité kyvety  Kanystr s destilovanou vodou naplnit čerstvou destilovanou vodou.  Vylít odpadní kanystr – pro desinfekci do něj nalít běžný desinfekční prostředek.  Provést promytí pipetoru:  CA Clean I v pozici Rinse vyměnit za CA Clean II – promytí příkazem Rinse Probe. CA Clean II vyměnit opět za CA Clean I – promytí příkazem Rinse Probe.  Kontrola přepadového ventilu  Vypnout přístroj vypínačem na levé straně. Pokud má být přístroj zapnut 24 hodin, měl by být 1x denně vypnut a opět zapnut.  Doplnit reagenčních kyvet  Vysypat odpad kyvet Údržba analyzátoru  Týdenní údržba  Očistit přístroj vodou a neutrálním detergentem  Vyčistit a desinfikovat kanystr na destilovanou vodu – 70% alkoholem. Důkladně propláchnout.  Vyčistit odpadní kanystr.  Doplnění promývací vody – používá se deionizovaná H2O