Celoživotní test s pakomáry Chironomus riparius, C. tentans a C. yohimatsui k posouzení toxicity sedimentu Charakteristika modelového druhu rod Chironomus - řád dvou kříd í {Diptera) = hmyz s proměnou dokonalou vajíčko-larva(4 instary)-kukla-imago dominantní konzumenti 1. řádu v rámci sladkovodních akvatických ekosystémů značná ambundance, kosmopolitní rozšíření larvy - všežravci - živí se řasami, rozsivkami, detritem Životní cyklus Celoživotní te; #218 provádí se v 600ml kádinkách sediment artificiální nebo přírodní voda - studniční, povrchová, provozní, uměle připravená sediment: voda 1:4 20 ±2°C, 500-1000 lux, 16L:8D 5t - dle OECD /219 A. nylonová síťka B. plastový kryt C. kádinka bez zobáčku D. otvory na výměnu vody E. sediment Celoživotní test - dle OECD #218/219 • kontaminace: sedimentu vody nad sedimentem • koncentrační řada: aspoň 5 koncentrací f<2 • kvalita vody - pH 6-9, rozpuštěný kyslík -aspoň 60% ASV, změřit tvrdost a amoniak • vzdušnění - Pasteurovou pipetou (jemně) Celoživotní test - dle OECD #218/219 1-4 dny staré larvy vysazujeme do sedimentu 20 jedinců/kádinka počet opakování: 3 - ECx; 4 - NOEC, LOEC krmení- tetrafinR, 0,25-0,5mg/larva/den délka trvání - 28d {C.riparius) referenční látky: lindan, trifluarin, pentachlorfenol, chlorid kademnatý, chlorid draselný Celoživotní test - dle OECD #218/219 Cílové parametry: • procento líhnutí dospělců: ER = ^ "a ER. procento líhnutí dospělců (emergence ratio) na. počet jedinců vysazených do kádinky ne. počet vylíhlých jedinců celkem (na konci pokusu) Přijatelnost testu: ER kontroly >0,7 • střední čas vývoje: čas od vysazení do líhnutí • střední rychlost vývoje: x: střední rychlost vývoje v kádince /': index intervalu mezi pozorováními m: počet všech intervalů mezi pozorováními ff. počet vylíhnutých jedinců během daného intervalu ne. počet vylíhlých jedinců celkem (na konci pokusu) x;. rychlost vývoje larev vylíhlých v intervalu / den;, den pozorování (od začátku) /,: délka intervalu mezi pozorováními (obvykle 1 den) ECx Regresní analýza NOEC, LOEC AN OVA Závislost citlivosti na pohlaví Chi-square Procento vylíhnutých jedinců Cochran-Armitage test, Fisher's exact test, Mantel-Haentzal test s Bonferroni-Holm úpravou p-hodnot, ANOVA (+arsin transformace) 1 xi------------------------- denf —IJ2