Datum:

   Jméno:                                                                

   

   Téma: Mikromnožení bylin (Iniciace kultury)



   Materiál:            listy      africké fialky (Saintpaulia ionantha Wendl.)

   tořivky (Streptocarpus hybridus)

   

   médium: F1=  M-S, 1 mg.l^-1 NAA, 1 mg.l^-1 BAP, 6,5g.l^-1 agar, 20g.l^-1 sacharóza

                           pH 5,5

   

   Postup práce:

   1.    Čerstvě odebrané listy opláchneme destilovanou vodou – omytí hrubších nečistot z povrchu
   listů.

   2.    Desinfekce v 70% etanolu po dobu 30 sekund - 1 min.

   3.    Desinfekce v 15% roztoku SAVO v SDV (v/v) po dobu 15 minut (třepačka).

   4.    3x po dobu 3 minut oplach SDV.

   5.    Přenos desinfikovaných listů do sterilní Petriho misky.

   6.    Sterilně v laminárním boxu vyřízneme segmenty čepele o průměru asi 1 cm.

   7.    Inokulace segmentů na povrch agarového média F1  svrchní epidermis na povrch media.

   8.     Zaznamenáme si počet segmentů v kultuře (v kultivační nádobě a počet nádob).

   

   Hodnocení

   V následujících týdnech kontrolujeme čistotu kultur a vyhodnotíme četnost segmentů, na kterých
   došlo k přímé organogenezi nebo iniciaci tvorby kalusu a organogenezi nepřímé. Vyhodnotíme
   rovněž množitelský koeficient.