Sylabus cvičení rostlinné explantáty

    jarní semestr 2008

   biologie obecná, biologie molekulární, BMD

   

   19.2.08  Úvod do praktika: podmínky axenické kultury a požadavky na vybavení             
   laboratoře, typy kultur, kultivační nádoby a různé způsoby kultivace,
                                    organizace a bezpečnost práce, protokoly, literatura.

   26.2.08  Nácvik práce ve sterilních podmínkách: sterilizace nástrojů, vody, nádob,
                          živných médií, pracovního prostoru, metody povrchové desinfekce semen,
                          sterilní výsev semen, spor kapradin apod. (Nicotiana, Daucus, Drosera).

   4.3.08   Příprava živného média: různé varianty agarem ztuženého média
                              (MURASHIGE – SKOOG 1962, GAMBORG a kol. 1968, atd.), namíchání
   média a   jeho rozlití do kultivačních nádob.

   11.3.08  Nácvik práce ve sterilních podmínkách: pasážování (přesazování do nového
                      média) sterilních kultur (Drosera, Dionaea, Streptocarpus, Nephrolepis).

   18.3.08  Mikropropagace - Regenerace de novo: Odvození primární kultury bylin, různé   zdroje
   explantátů - list, stonek, rhizom (Saintpaulia, Streptocarpus, Begonia,      Nephrolepis),
   reprodukce: množení nodálními segmenty (Rosa).

   25.3.08  Kalusové kultury: iniciace kalogeneze, založení primární kultury kambiálních        
   segmentů kořene (Daucus).Vliv různého poměru auxinových a cytokininových          růstových
   regulátorů na organogenezi na segmentech hypokotylu tabáku (Nicotiana        tabacum).

   1.4.08  Meristémové kultury: Izolace apikálních a axilárních meristémů bylin a dřevin         
   (Dianthus, Clematis, Rubus).

   8.4.08   A. Kultury nižších rostlin: kultivace hub – udržovací kultury a příprava očkovacího
              inokula jako příklad suspenzní kultury (Pleurotus, Lentinus). B. Indukce tuberizace
        na nodálních segmentech (Solanum tuberosum).

   15.4.08  A. Izolace zygotických embryí: založení kultury – desinfekce semen, izolace embryí a
   jejich inokulace do živného média (Picea, Zea, Capsella). B. Somatická embryogeneze: 1.
   indukce přímá – apikální meristémy hrachu (Pisum), poupata úborů cinerárie (= popelivky)
   (Senecio cruentus – hybrid), 2. nepřímá indukce – kalus  mrkve        (Daucus carota), kalus
   lnu (Linum).

   22.4.08  A. Kryoprezervace: izolace axilárních meristémů, enkapsulace meristémů do       
   alginátu, transfer alginátových perel na M-S médium (možná dehydratace            
   alginátových perel a jejich následné rychlé zmrazování v N[2]). B. Vyhodnocení          
   experimentů.

   6.5.08  A. Fytopatologie in vitro, certifikace čistoty kultur, test čistoty kultury Solanum   
   tuberosum a Nicotiana tabacum  B. Převod rostlin namnožených in vitro do         nesterilních
   podmínek a aklimatizace rostlin. Kontrola protokolů, zápočtový test.

   13.5.08  Exkurze do LTK MZLU a zápočet.