Výsledky cvičení: Stanovení osmotického a vodního potenciálu rostlin HRANIČNÍ PLAZMOLÝZA Allium cepa molární koncentrace (mol l-1) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 opakování % plazmolyzovaných buněk 1 0 0 0 5 10 10 80 100 100 2 0 0 3 5 10 10 80 90 100 3 0 3 5 10 13 15 70 95 100 4 0 0 2 10 10 15 80 95 100 5 0 0 0 5 5 10 90 95 100 6 0 0 0 5 5 5 70 95 100 7 0 0 0 4 6 19 68 98 100 8 0 0 0 0 20 48 48 72 90 9 2 2 2 3 4 5 80 95 100 Elodea canadensis molární koncentrace (mol l-1) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 opakování % plazmolyzovaných buněk 1 0 2 3 3 60 80 82 96 98 2 0 2 3 3 90 80 83 95 98 3 0 2 3 3 60 80 83 95 98 4 0 2 3 3 90 80 83 95 98 5 0 2 3 3 90 80 83 95 98 6 0 0 0 0 6 20 53 97 98 7 0 2 3 3 90 80 83 95 98 Pro každý rostlinný druh zvlášť vytvořte jeden XY graf (osa x - molární koncentrace inkubačního roztoku, osa y - naměřená V každém grafu z rovnice regrese spočítejte koncentraci osmotika, v níž by bylo plazmolyzovaných 50 % buněk. Takto získané hodnoty dosaďte do rovnice pro výpočet osmotického potenciálu; měření probíhalo při průměrné teplotě 21 ?C. Vypočtenou hodnotu osmotického potenciálu obou rostlinných druhů vyjádřete v MPa. REFRAKTOMETRIE molární koncentrace sacharózy (mol l-1) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 hmotnostní koncentrace sacharózy (%) Opakování 1: kalibrace (kontrola) 1.2 4.1 7.5 10.9 14.1 17.2 20.2 23.1 26.2 + Solanum tuberosu 1.3 4.2 6.9 9.8 12.5 14.6 17.2 18.9 20.8 Opakování 2: kalibrace (kontrola) 1.2 4.5 8 10.7 14.6 18.25 21 24.25 27.75 + Solanum tuberosu 1.3 6.5 8.25 10.5 13.75 16.75 19.25 21 24.5 Opakování 3: kalibrace (kontrola) 1.3 5 9 12 15.5 19 24.5 27 28 + Solanum tuberosu 1.4 5.5 8.5 12 15 18 21 23.5 26 Opakování 4: kalibrace (kontrola) 1.3 4 7.8 10.6 14.2 17.2 20.5 23 25.9 + Solanum tuberosu 1.5 4.3 6.9 9.6 12.7 14.2 17 19.1 21 Vytvořte jeden XY graf pro obě měření (osa x - molární koncentrace inkubačního roztoku, osa y - procentická koncentrace in Help: data přeskládejte (Kopírovat - Vložit jinak - hodnoty, transponovat) a graf vytvořte tak, jak ukazuje ilustrativní V grafu proložte a) naměřenými kalibračními hodnotami přímku neprocházející počátkem); b) vlastními měřeními polynom 2. st Takto získanou hodnotu dosaďte do rovnice pro výpočet osmotického potenciálu; měření probíhalo při teplotě 21 ?C. Vypočtenou hodnotu osmotického potenciálu vyjádřete v MPa. TLAKOVÁ METODA Nezalitá rostlinZalitá rostlina Nezalitá rostlina, list 10 min odřízlý 1. list 2. list 1. list 2. list 1. list 2. list vodní potenciál (MPa) Skupina A 0.6 0.5 0.4 0.3 0.6 0.6 Skupina B 0.65 0.65 0.35 0.4 0.7 0.7 Průměrné hodnoty NezalitáZalitá rNezalitá rostlina, list 10 min odřízlý 0.6 0.4 0.6 0.5 0.3 0.6 0.65 0.35 0.7 0.65 0.4 0.7 0.55 0.5 0.68 0.6 0.4 0.5 0.5 0.6 0.4 0.6 0.45 Průměrné hodnoty Převeďte získanou tlakovou hodnotu (v barech) na hodnotu vodního potenciálu (v MPa; pozor na znaménko!!!). Vypočtěte průměr z opakování pro listy muškátu s různým ovlivněním. Závěrečné shrnující úkoly: 1. Porovnejte Allium cepa, Elodea canadensis a Solanum tuberosum z hlediska hodnot jejich osmotického potenciálu. 2. Diskutujte, zda jste metodou hraniční plazmolýzy a metodou refraktometrickou měřili vodní potenciál rostlinných pletiv, 3. Do jaké výšky rostliny (pouze hypotetická situace) by samotný vámi zjištěný osmotický potenciál rostlinných pletiv byl Potřebujete znát vztahy mezi tlakovými jednotkami? Pak buď koukněte na web nebo klikněte přímo sem. Potřebujete znát vztah mezi tlakem a výškou vodního sloupce? Přečtěte si str. 4 a 9 ve skriptech! ##### Sheet 2 #####