Využití pokusných zvírat v experimentu
Vztah človeka ke zviratum:
Antropocentrické pojetí: hodnota zvířete je podřízena lidským cílům Biocentrické pojetí: všechny žijící bytosti mají svou vnitřní hodnotu Zoocentrické pojetí: opak antropocentrického pojetí
1959 - Rüssel, Burch - publikovali ve své knize „The principles of
(humane experimental technique" tzv. zásadu tří „R": představuje v současné době prosazovaný odpovědný a rozumný prístup k používaní zvírat v experimentu Replacement    Reduction      Refinement ■     Náhrada        Redukce počtu   Zjemnění
Počty laboratorních zvírat
Celosvetové: 48 milionu Evropa: 11,6 miliónů Československo: 0.3 miliónů
Zastoupené druhy:
1990-1991
myši a potkani
morčata a králíci
ptáci ryby, plazi
» nejvíce:
-farmacie, nové léky -testování vakcín - testy toxicity -onkologický výzkum -základní výzkum, výuka
Legislativa
■   Zákon 246/1992 Sb., na ochranu zvířat proti týrání
- Zvířetem se rozumí obratlovec kromě člověka, nikoliv však plody nebo féty
- Pokusným zvířetem zvíře, které je použito k pokusným účelům, je s ním
manipulováno a jsou vytvářeny podmínky a navozovány procesy, které v přirozených podmínkách neexistují
arizeni:
chovná - chovaná a množena zvířata pro pokusne ucely dodavatelská - dodává za úplatu zvířata určená k pokusným účelům uživatelská - zvířata používána k pokusným účelům
Vyhláška 311/1997 Sb., o chovu a využití pokusných zvířat -Typy objektů a prostor v zařízeních - systémy chovu: Otevřený — konvenční zvířata vstup i výstup zvířat, osob i materiálu je bez bariéry
Bariérový - SPF (specific pathogen free) zvířata
ochrana před průnikem nežádoucích vlivů z vnějšího prostředí
Izolátorový - gnotobiologická zvířata
prostor pro zvířata trvale a úplně oddělen od vnějšího prostředí a osob, které
se zvířetem manipulují
Genetika laboratorních zvířat
Z genetického hlediska rozlišujeme dvě základní skupiny
Geneticky definovaná - isogenní
Inbrední kmeny - produkt příbuzenské plemenitby mezi bratrem a sestrou po více než 20 generací. Homozygotnost uvnitř kmene více než 98%.
.■eticky nedefinovaná - neisogenní
Potomci skupiny zvířat geneticky heterogenních. Minimální příbuzenská plemenitba.
Vlastnosti a využití: větší, odolnější, více plodní, levnější, toxikologické a farmakologické studie - kde potřebujeme vzorek „divoké populace". Větší n.
Laboratorní myš
Manipulace:
Rozdíly mezi kmeny - nutno znát!
Uchopovat uprostřed ocasu, položit předními končetinami na drsnou podložku, chytit kůži na krku a hřbetní straně a ocásek
Odběr krve: z ocasu, orbitálního sinu, karotidy, srdeční punkce
Aplikace látek:
Perorálně - pinzetou na kořen jazyka, tekuté kapatkem, sondou do žaludku
Subkutánně - pod volnou kůži na hřbetě za krkem
Intramuskulárně - do stehenní svaloviny
Intravenózne - do postranní ocasní žíly
Intraperitonealne -jednoduché, pomalejší resorbce, vstřebávání velkou plochou peritonea
Alternativní metody
Nejvíce využívány při testování toxicity
Buněčné a tkáňové kultury - rostlinné, živočišné (lidské) př.
- Testy na fotosenzitivitu a fototoxicitu na fibroblastech
- Testy na citlivost rakovinných buněk vůči cytostatikům
-   Neutral  Red Assay- sledovaná toxická  látka  se přidává  spolu  s
kontrastní barvou, která obarví pouze živé buňky - princip vitálního barvení
- Kultury buněk lemujících zuby- testy na dráždivost zubní výplně
-Model lidské kůže - rekonstruovaná epidermis s stratum corneum -sledovaná toxická (leptající) látka musí proniknout přes stratum corneum a poškodit ouňky hlubších vrstev - sníží se jejich životnost.
Existují komerčně dostupné sety na tato stanovení- EPISKIN
Bakterie a kvasinky
Další možnosti alternativních metod
ócitacove modely
Neinvaziyní.zobrazování(CT,.MNR,
Kuřecí e/nbrya - testy terotogenity
Placenty (model pro mikrochirurgii, transport léků)
Výzkum populace (strava - aterosklerózá)
Využití bezobratlých
- nítěnky   toxicita LD 50. hodnotí se pohyb živočicha
Vajíčka drápatek na testy teratogenity
Alternativní metody s použitím zvírat
Modifikace klasického testu orální toxicity
Původně minimálně 30 potkanů, nyní pouze 6
Kožní dráždivost nikoli na živém zvířeti ale na terčících kůže z potkanů
Kombinované studie toxicity a vlivu látek na reprodukci
v.. r             r\t
Bez použiti zvírat:
i   Draize test dráždivosti oka: původně na králících, jejich oko je ale citlivější než lidské - větší plocha a méně slz.
Alternativní testy:
-  sledovaná látka se kape do proteinového roztoku získaného z fazolí
- místo králíků model kuřecích zárodků