Sylabus přednášky rostlinné explantáty                jarní semestr 2009

                            biologie obecná, biologie molekulární, BMB

17.2.09       Úvod do problematiky: definice pojmů, způsoby kultivace – média ztužená a tekutá,
systém Rita®, historický přehled, literatura, organizace.

24.2.09       Podmínky axenické kultury, sterilizace a desinfekce rostlinného materiálu, výživa,
fyzikální podmínky. Složení živných médií: anorganické látky - makroelementy, mikroelementy,
organické látky, zdroj uhlíku, růstové regulátory, aktivní uhlí, ztužování, nosiče.

3.3.09         Fytohormony a růstové regulátory I.: auxiny a gibereliny

10.3.09       Fytohormony a růstové regulátory II.: cytokininy, kyselina abscisová, etylén, další
látky regulační povahy (brasinosteroidy, kyselina jasmonová, polyaminy, oligopeptidy, strigolakton)

17.3.09       Mikropropagace: Typy regenerace: restituce, reprodukce, regenerace de novo, klonování
rostlin, stadia mikropropagace, meristémové kultury, ozdravování, termoterapie meristémů bylin a
dřevin, cyklofýza, topofýza, masová propagace, převod do nesterilních podmínek, aklimatizace.

24.3.09       Kalusové kultury: iniciace kalogeneze, kalogenní pletiva, využití kalusových kultur
(suspenzní kultury, sekundární metabolity). Sekundární metabolity a biotechnologie: elicitace,
suspenzní kultury, bioreaktory, imobilizace, biotransformace.

31.3.09       Tuberizace: regulace tvorby hlízek, NOD faktory

7.4.09         Kultury izolovaných zygotických embryí: vývojová stadia zygotických embryí a jejich
nároky na pěstování in vitro, metody kultivace, možnosti využití metody (překonání dormance,
zkrácení šlechtitelského cyklu, dopěstování hybridních embryí v případech abnormálního vývoje
endospermu /“rescue technique“/, zdroj meristematického materiálu pro množení).

14.4.09       A. Oplození in vitro: bariéry inkompatibility a možnosti jejich překonávání in vitro,
vzdálená hybridizace, kvalita pylu a její hodnocení. B. Somatická embryogeneze: indukce: přímá
(Pisum ), nepřímá (Daucus), vliv ontogeneze, původ a stavba somatických embryí, umělá semena,
konverze somatických embryí.

21.4.09       A. Kryoprezervace: kryoprotektiva, pomalé a rychlé zmrazování, vitrifikace,
enkapsulace/dehydratace axilárních meristémů (Solanum), rozmrazování, testy viability, využití
kryoprezervace - genové banky.

28.4.09       Transgenoze: Geneticky modifikované organismy (GMO), legislativa, využití
transgenních rostlin, struktura chimerických genů, detekce transgenoze - markery a selekční geny,
přímé a nepřímé metody transformace – elektroporace, disková metoda, vakuová infiltrace.

5.5.09        Manipulace se stupni ploidie: Indukce haploidních rostlin: a) Androgeneze přímá a
nepřímá: prašníkové a mikrosporové kultury, pylová embryogeneze, dihaploidizace, vliv koncentrace
Fe v médiu (Nicotiana), b) Gynogeneze.

12.5.09       Exkurze do Laboratoře explantátů MZLU

19.5.09       Fytopatologie in vitro: certifikace čistoty kultur

Doporučená literatura

1.    DROBNÍK, J. et ŠTĚPÁNKOVÁ, H. /eds./ (1997): Harmonizace pravidel práce v biologii a chemii.
I. Bezpečnost biotechnologií. Series in Natural History, 6, PERES, Praha. (Skriptum UK).

2.    FOSSARD, de R.A. (1976): Tissue Culture for Propagators.- Univ. New England Printery.

3.    GAMBORG,  O. L. et PHILLIPS, G. C. (1995): Plant Cell, Tissue and Organ Culture. Fundamental
Methods, Springer Berlin. Heidelberg.

4.    KAMENICKÁ, A. et RYPÁK, M. (1989): Explantáty v rozmnožování drevín.- Veda, SAV, Bratislava.

5.    KOVÁČ, J. (1992): Explantátové kultury rostlin, Ústí n. Labem (Skriptum UJEP).

6.    NOVÁK, F.J.(1990): Explantátové kultury a jejich využití ve šlechtění rostlin.- Academia,
Praha.

7.    ONDŘEJ, M. (1985): Cytogenetika a molekulární genetika rostlin. - Academia, Praha.

8.    ONDŘEJ, M. (1992): Genové inženýrství kulturních rostlin.- Academia, Praha.

9.    PIERIK, R.L.M. (1987): In vitro Culture of Higher Plants. - Martinus Nijhoff Publishers,
Dordrecht, Boston, Lancaster.

10.    PETRŮ, E., ŘETOVSKÝ, R. (1956): Rostlinné explantáty, ČSAV Praha.

11.    PROCHÁZKA, S., ŠEBÁNEK, J. et al. (1997): Regulátory rostlinného růstu. Academia Praha.

12.    PROCHÁZKA, S., MACHÁČKOVÁ, I., KREKULE, J., ŠEBÁNEK, J. et al. (1998): Fyziologie rostlin. –
Academia Praha.

13.    RAGHAVAN, V. (1976): Experimental Embryogenesis in Vascular Plants.- Academic Press London,
New York, San Francisco.

14.    REINERT, J. et BAJAJ, Y.P.S./eds./, Applied and Fundamental Aspects of Plant Cell, Tissue
and Organ Culture. - Springer Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, 1977.

15.     REINERT, J. et YEOMANN, M.M.(1982): Plant Cell and Tissue Culture. A Laboratory Manual. -
Springer Verlag Berlin etc.

16.    ŘETOVSKÝ, R. (1953): Růstové stimulátory.- ČSAV Praha.

17.    SASSON, A. (1988): Biotechnologies and Development.- UNESCO, Paris.

18.    SEMAN, I.(1990): Biotechnologické metódy v šľachtení poľných plodín.-Príroda Bratislava.

19.    ŠEBÁNEK, J. et SLADKÝ, Z. (1988): Biotechnologie rostlinných explantátů.- Brno (Skriptum
VŠZ). (nyní MZLU)

20.    VOTRUBA, M. et al. (1987): Explantátové techniky (pro biotechnology a šlechtitele).- Praha
(Skriptum VŠZ Praha).

21.     THORPE, T.A. (1995): In vitro Embryogenesis in Plants.- Kluwer Academic Publishers,
Dordrecht, Boston, London.