Datum:

Téma:                   Mikropropagace Saintpaulia ionantha Wendl.

Pasážování kultury („subculture“)


Materiál: tkáňová kultura Saintpaulia ionantha Wendl.


médium: M-S základní soli, sacharóza 20 g.l^-1, agar 8g.l^-1,  pH 5,5


Postup práce:

1.    Kultivační nádoby s kulturami přeneseme z kultivační místnosti do boxu.

2.    Připravíme si kultivační nádoby s čerstvým médiem a ostatní pomůcky.

3.    Opatrně ožíháme okraj kultivační nádoby.

4.    Sterilní pinzetou vyjmeme explantáty na sterilní Petriho misku.

5.     Odřízneme nekrotizované bazální části explantátů, izolované apikální části vsadíme do
čerstvého média.

6.    Znovu opatrně ožíháme okraj kultivační nádoby a uzavřeme ji kovovým uzávěrem s ventilací.

7.    Zapíšeme datum a číslo kultury.

8.    Kultivujeme v kultivační místnosti na světle (studené bílé zářivky, fotoperioda 16/8,  PAR
30μmol.m^-2.sec^-1) při 22ºC po dobu 4 týdnů.

Hodnocení

V následujících týdnech kontrolujeme čistotu kultur.


Poznámka:

V případě, že chceme převádět kultury do nesterilních podmínek, je vhodné nechat je několik týdnů
zakořenit na médiu s nižší koncentrací minerálních látek (např. 1/3 MS).