Sylabus cvičení rostlinné explantáty                                          jarní semestr 2009

biologie obecná, biologie molekulární, BMD

17.2.09  Úvod do praktika: podmínky axenické kultury a požadavky na vybavení
laboratoře, typy kultur, kultivační nádoby a různé způsoby kultivace,                  organizace a
bezpečnost práce, protokoly, literatura.

24.2.09  Nácvik práce ve sterilních podmínkách: sterilizace nástrojů, vody, nádob,
živných médií, pracovního prostoru, metody povrchové desinfekce semen,                   sterilní
výsev semen, spor kapradin, apod. (Nicotiana, Daucus, Drosera).

3.3.09 Příprava živného média: různé varianty agarem ztuženého živného média         (MURASHIGE –
SKOOG 1962, GAMBORG a kol. 1968, atd.), namíchání média a          jeho rozlití do kultivačních
nádob.

10.3.09  Nácvik práce ve sterilních podmínkách: pasážování sterilních kultur (přesazování
explantátů do nového média) (Drosera, Dionaea, Streptocarpus, Nephrolepis, Dianthus).

17.3.09  Mikropropagace - Regenerace de novo: Odvození primární kultury bylin, různé         zdroje
explantátů - list, stonek, rhizom (Saintpaulia, Streptocarpus, Begonia,          Nephrolepis),
reprodukce: množení nodálními segmenty (Rosa).

24.3.09  Kalusové kultury: iniciace kalogeneze, založení primární kultury kambiálních
segmentů kořene (Daucus). Vliv různého poměru auxinových a cytokininových   růstových regulátorů na
organogenezi na segmentech hypokotylu tabáku (Nicotiana          tabacum).

31.3.09  A. Meristémové kultury: Izolace apikálních a axilárních meristémů bylin a dřevin
(Dianthus, Clematis, Rubus),

B. Indukce tuberizace na nodálních segmentech brambor (Solanum tuberosum).

7.4.09  A. Izolace zygotických embryí: založení kultury – desinfekce semen, izolace   embryí a
jejich inokulace do živného média (Picea, Zea, Capsella). B. Převod rostlin            namnožených
in vitro do nesterilních podmínek a aklimatizace rostlin.

14.4.09  Somatická embryogeneze: A. indukce přímá – apikální meristémy hrachu      (Pisum), poupata
úborů cinerárie (= popelivky) (Senecio cruentus – hybrid),

B. nepřímá indukce – kalus mrkve (Daucus carota), kalus lnu (Linum).

21.4.09  A. Kryoprezervace: izolace axilárních meristémů, enkapsulace meristémů do
alginátu, transfer alginátových perel na M-S médium (možná dehydratace            alginátových
perel a jejich následné rychlé zmrazování v N[2]).

B.Vyhodnocení experimentů.

28.4.09  A. Fytopatologie in vitro, certifikace čistoty kultur, test čistoty kultury Solanum
tuberosum a Nicotiana tabacum

5.5.09  A. Kultury nižších rostlin: kultivace hub – udržovací kultury a příprava očkovacího inokula
jako příklad suspenzní kultury (Pleurotus, Lentinus).

B. Kontrola protokolů, zápočtový test.

12.5. 09      Exkurze do LTK MZLU

19.5. 09      Zápočet.