Planktónové sinice/cyanobaktérie - stanovenie abundancie

                                    RNDr. Bohuslav Uher, Ph.D.

                                        uherius@sci.muni.cz

                                             Metodika

•            Aerotopy (vznášanie)

•            Cyrus I

•            Cieľ: Počet buniek siníc v 1 ml pôvodnej vzroky

•            Implementácia Smernice Európskeho parlamentu a rady 2006/7/ES riadení kvality vody
učenej na kúpanie (odporúčanie I. stupeň: 20 000 buniek na 1 ml, II. stupeň: 100 000 buniek na 1 ml
a III. stupeň: viditeľný vodný kvet)

•            Problematika kolónií a zhlukov planktónových siníc





                                              Postup

•            Kvantifikácia siníc bez predúpravy

•            Dezintegrácia pomocou Lugolovho roztoku

•            Mechanická dezintegrácia pomocou KOH

•            Samotné počítanie (vychádzať z minimálne 100 jedincov) při zväčšení 200-400×

•            Zahusťovať či nezahusťovať?

•            NIE: predpoklad výskytu 1000 jedincov

•            ÁNO: výskyt menej než 100 jedincov na komôrke

                                         Spôsoby počítania

•           Sinice, pri ktorých sa priamo počítajú bunky: Microcystis, Woronichinia, Snowella,
Merismopedia, Anabaena



•           Sinice, pri ktorých sa meria dĺžka vláken: Planktothrix, Aphanizomenon, Pseudanabaena,
Limnothrix, nutný prepočet dĺžky vlákna (Lv) na počet buniek, kde 1 bunka = 5 μm, počet buniek =
Lv/5

                                        Výpočet abundancie

•            A[n] = Σ^n[i-1 ]n.P[k].V[z].(V[d ]+ V[KOH]) / P[p].V[p].V[k].V[d]

•              A[n ]- abundancia buniek všetkých prítomných siníc (bunky/ml)

•              n - počet buniek taxónu na prepočítanej časti komôrky

•              P[p ]- prepočítaná plocha komôrky v mm^2 resp. vyjadrená jako počet pásov (napr. 8
pásov), polí atď., napr. 1 pás = 2,5 mm^2 (P[p] a P[k ]rovnaké jednotky)

•              P[k ]- celková plocha komôrky v mm^2 = 100 mm^2 40 pásov

[•               ]V[d ]- objem vzorky použitý k dezintegrácii v ml[]

[•               ]V[KOH ]- objem pridaného dezitegračného činidla v ml (KOH, Lugolov roztok, HCl)[]

[•               ]V[p ]- objem vzorky použitý ku koncentrovaniu v ml, ak nezahustený = 1 ml[]

[•               ]V[z ]- objem zahustenej vzorky v ml, nezahustený 1 ml[]

[•               ]V[k ]- objem komôrky v ml = 1 ml[]