Non-cell-autonomous action of STAT3 in maintenance of neural precursor cells in the mouse neocortex
Takeshi Yoshimatsu, Daichi Kawaguchi, Koji Oishi, Kiyoshi Takeda, Shizuo Akira, Norihisa Masuyama and Yukiko Gotoh*
Institute of Molecular and Cellular Biosciences, University of Tokyo
E
(ependym)
embryo
in vitro = neurosphere EGF / FGF2 {in vitro)
prekursoM^
(astrocyt)
*radiální glie -embryo a časně postnatálně
Signální dráha FGFs (Fibroblastové růstové faktory)
STAT3 - signální transduktor a aktivátor transkripce
- transkripční faktor
- aktivita regulována fosforylací tyrosinu 705 (JAK) a serinu 727 (MEKK, Erk, p38)
- významný pro regulaci proliferace a differenciace u většiny typů buněk
- nezbytný pro vývoj embrya
- upregulován u ~70% nádorů
- není známa onkogenní forma
Signální dráha Notch
a)
b)
DSL
UJD-
Ä
NICD
obecně regulace diferenciace regulace NSC overexprese u nádorů
Brennan 2003
a) klasická dráha signální transdukce Notch, po navázání ligandu (DSL rodina = Delta, Serrate, Lag-2; Jagged) dojde k odštěpení extracelulární části receptoru a následně
i intracelulární (NICD - Notch intacellular domain), ta translokuje do jádra a v dimeru s CSL (= CBF1 - Cp binding factor 1) aktivuje transkripci.
b) dráha snad aktivovaná dosud neznámým faktorem, kdy dochází k aktivaci proteinu Deltax, který pak inhibuje JNK a CBP/p300 aktivitu.
AKTIVACE
(LI F/LIFR/gpl 30->JAK2->)
(STAT3JI —\ ^---' If STAT3J
(STAT3)
PSTAT3)
STAT3 x NOTCH
Kondiciovani mutanti - Cre / LoxP system
Cre LoxP Mouse
Original gene function is disrupted. Original gene function is untouched.
a reporter gene is transcribed
instead.
siRNA technologie
Hypotéza: FGF2 udržuje neurální kmenové buňky
- která z aktivovaných signálních drah je za to odpovědná??? -je působení této dráhy přímé (autonomní)
nebo nepřímé (neautonomní)
Fig. 1.
Inhibition of FGF2-dependent NPC maintenance by an inhibitor of JAK2
Fig. 3.
Requirement of STAT3 for maintenance of FGF2-sensitive NPC
Fig. 5. Inhibition of neurogenesis by STAT3 in a non-cell-autonomous manner
Fig. 6
Regulation of DLL1 expression by STAT3
Fig. 7. Requirement of Delta-Notch signaling for NPC maintenance by STAT3
B
A
Control DIM RNAi RNAi
Anli^Dlll Anti-GAPDH
Control RNAi
Dill
RNAi
Control RNAi
Dill RNAi
DMSO
L685,45K
DMSO
L6S5,458
Control
STAT3-C
Control
STAT3-C