Preparát Morfologie • Buňky • Charakteristických shluků buněk • Extracelulárních útvarů (spory, konidie, sporangia, pouzdra..) • Bakteriální kolonie Morfologie buňky • PREPARÁT - co chceme vidět? – podle toho preparát a typ mikroskopie tvar buňky – fázový kontrast, barvený fixovaný prep. pohyb buňky – fázový kontrast, fluorescence barvené struktury – pomáhají identifikaci (PHB, síra) typ buněčné stěny – Gramovo a acidorezistentní b. U jednoho bakteriálního rodu různý vzhled char. tvaru buňky! • Př: tyčky bacilů •Haemophilus Posuzujeme-li vzhled buňky určitého bakteriálního druhu, je třeba si uvědomit: 1) Prochází tento druh růstovými cykly? - v každém z nich má pak buňka jinou morfologii! Př: Chlamydia Bdellovibrio, Streptomyces, Caulobacter, myxobakterie…. Mění se nejen vzhled buňky, ale buňka v cyklech prochází typickou změnou vnitřních struktur. Morfologie buňky vprostřed buněčného cyklu 2) Vytváří posuzovaný druh endospory? - v preparátu pak mohou měnit tvar buněk! 3) Stárnutím mění buňky tvar 4) Závislost tvaru buňky na vnějším prostředí - živiny, tlak, osmolarita… 5) pleomorfní buňky – př. rody Mycobacterium, Corynebacterium, Haemophillus, Mycoplasma Morfologie bakt. kolonií • potřeba zvážit typ media, ne kterém kolonie hodnotíme! kultivace - zda vůbec kultivovatelné?? - sledování typu kolonií Př: sledování morfologie kolonií – univerzální media, jiný vhled na selektivním – zda vůbec růst či ne? barevná reakce?) S-, R- a M-formy sledování pohybu terasovité kolonie (Př: Proteus) Kontaminace na misce! Morfologie charakteristických shluků buněk • typické shluky napomáhají identifikaci Jasné pole – barvené preparáty Gramovo barvení Slouží pro rozlišení G+, G- a pro určení tvaru buněk samotných (koky, kokotyčky, tyčky, spirily, pleomorfní buňky, vlákna) a také jejich uspořádání do charakteristických útvarů (balíčky, řetízky bacilů i koků, tetrády, sarciny) Grampozitivní – tmavě fialové až modročerné zbarvení - komplex barviva a jódu není vyplaven Gramnegativní – červené nebo růžové zbarvení – komplex barviva a jódu je odbarven etanolem nebo acetonem a buňky jsou dobarveny safraninem Jaké bakteriální rody Gramovým barvením neobarvíme? Jedná se o rody bez buněčné stěny (mykoplazmata), spirálovité bakterie, dále o silně acidorezistentní rody (např. mykobakteria): • Borrelia burgdorferi (fig 1, 2) • Borrelia recurrentis (fig 1) • Bartonella henselae (fig 1, 2) • Chlamydia trachomatis (fig 1, images of elementary bodies, images of reticulate bodies) • Chlamydophila pneumoniae (images of elementary bodies, images of reticulate bodies) • Chlamydophila psittaci (images of elementary bodies, images of reticulate bodies) • Coxiella burnetii (fig 1, 2) • Ehrlichia chaffeensis (fig 1, 2) • Anaplasma phagocytophilum (formerly; Ehrlichia phagocytophilum or E. equi; Fig. 1) • Legionella sp. (fig 2) • Leptospira sp.(fig 1, 2) • Mycobacterium bovis (fig 1) • Mycobacterium tuberculosis (fig 1, 2 thanks to Anders Olav Lande, 3) • Mycobacterium avium, Mycobacterium intracellulare (fig 1 thanks to Anders Olav Lande) • Mycobacterium kansasii (fig 1) • Mycobacterium leprae (fig 1, for a close up thanks to Anders Olav Lande) • Mycobacterium marinum (fig 1) • Rickettsia rickettsii (Fig. 1,: scroll down to bottom of the page. 2) • Orientia tsutsugamushi (formerly; Rickettsia tsutsugamushi; Fig. 1) • Treponema pallidum(fig 1, 2, 3) Micrococcus luteus CCM 169 Micrococcus luteus CCM 169 Staphylococcus Streptococcus Bacillus cereus CCM 2010 Bacillus megaterium CCM 2007 Preparát: Jednotlivé buňky (velké) Dvojice Řetízky Bacillus thuringiensis CCM 19 – Escherichia coli ( G- krátké tyčky) 2-3 x 0,4-0,6 um Bacillus cereus CCM 2010 ( G+ tyčky)