Ekotoxikologické biotesty ­ cvičení 2010
Test s chvostoskokem Folsomia candida
1 Cíl úlohy a organizační pokyny
Cíl úlohy je naučit se postup rozšířeného půdního biotestu ­ testu efektů na přežívání a reprodukci
chvostoskoka Folsomia candida. Test vychází z ISO 11267 (1999). Studentům je vyučujícím
předveden postup založení testu. Studenti si samostatně založí test pro kontrolní variantu a pro půdu
kontaminovanou kadmiem. Po cca 28 dnech je studentům předveden postup vyhodnocení testu a
studenti samostatně vyhodnotí mortalitu a reprodukci chvostoskoků. Na konci cvičení studenti
odevzdají protokoly z úlohy, které obsahují stručný postup, odchylky od předepsaného postupu a
zejména výsledky ve formě tabulky a grafu a jejich komentář.
Kontaminovaná půda je připravena vyučujícím a při manipulaci s ní je potřeba dodržovat všechny
bezpečnostní zásady pro práci v laboratoři. Při realizaci úlohy jsou studenti povinni mít na sobě
laboratorní plášť a pryžové rukavice.
2 Materiál a pomůcky
synchronní kultura chvostoskoků
půda připravená vyučujícím (artificiální půda s pH 6  0,5 a ovlhčená na 50% WHC ve
variantě bez kadmia - kontrola a ve variantě s 800 mg/kg kadmia)
skleničky na testy (cca 150 ml), folie, gumičky
sušené kvasnice, exhaustor, štěteček, miska s mřížkou na vyhodnocování testu
inkoust
váhy s přesností na 0,1 g
inkubační místnost nebo termostat
běžné laboratorní sklo a pomůcky ­ kádinky, filtrační papír, papírové ubrousky, lžičky,
pasteurky, fixy, nůžky, střičky s vodou
pryžové rukavice, laboratorní pláště
3 Postup úlohy
Do skleněných nádobek na test navažte po 30 g půdy (2 opakování pro kontrolu a 2 opakování pro
půdu s kadmiem). Při manipulaci s kontaminovanou půdou používejte rukavice, rozsypanou půdu
opatrně smeťte do koše. Na povrch půdy dejte špetku kvasnic. Ze synchronizovaného chovu pomocí
exhaustoru odeberte 10 juvenilů ­ dávejte zejména pozor na správný počet ­ a vyklepte je do
testovací nádobky s půdou. Nádobky uzavřete fólií a gumičkou a poté zvažte. Nádoby umístěte do
inkubační místnosti či do termostatu, do teploty 20  2 °C. Každý týden nádoby zvažte a porovnejte
váhu s původní. V případě úbytku doplňte vodu. Každý týden taky dosypte špetičku kvasnic. Po 28
dnech vyhodnoťte mortalitu a reprodukci pomocí flotační metody. Do testovací nádobky nalijte vodu
z kohoutku a opatrně promíchejte do rovnoměrné suspenze pomocí štětečku. Pracujte v rukavicích.
Poté beze zbytku přelijte suspensi do počítací nádoby (zbytky půdy můžete vypláchnout několikerým
vymytím vodou). K suspenzi kápněte pár kapek inkoustu a opět opatrně zamíchejte štětečkem. Do
počítací misky vložte mřížku a poté spočítejte dospělce a juvenily na povrchu tmavě zbarvené
suspense. Druhá varianta je povrch hladiny vyfotit a spočítat chvostoskoky z fotografie.