Využití pokusných zvířat v experimentu nVztah člověka ke zvířatům: nAntropocentrické pojetí: hodnota zvířete je podřízena lidským cílům nBiocentrické pojetí: všechny žijící bytosti mají svou vnitřní hodnotu nZoocentrické pojetí: opak antropocentrického pojetí n n1959 – Russel, Burch n publikovali ve své knize „The principles of humane experimental technique“ tzv. nzásadu tří „R“: představuje v současné době prosazovaný odpovědný a rozumný přístup k používání zvířat v experimentu n n n Replacement Reduction Refinement n Náhrada Redukce počtu Zjemnění n n n n Ochrana zvířat na úrovni právní • Právními předpisy na úrovni národní i nadnárodní jsou stanoveny povinné podmínky pro zabezpečení pohody zvířat. Oblasti ochrany zvířat v právních předpisech • Přímá ochrana zvířat ochrana zvířat proti týrání - vymezena právními předpisy, které definují, zakazují a postihují vlastní týrání zvířat • Nepřímá ochrana zvířat • ochrana zvířat při zacházení s nimi - vymezena právními předpisy, které upravují zacházení se zvířaty nebo stanoví způsob a podmínky chovu a plemenitby zvířat a péče o ně ochrana zvířat jako druhu - vymezena právními předpisy na ochranu volně žijících populací zvířat Legislativa nZákon 246/1992 Sb., na ochranu zvířat proti týrání n n- Zvířetem se rozumí obratlovec kromě člověka, nikoliv však plody nebo féty n- Pokusné zvíře – každé zvíře, které má být použito k pokusům n- Laboratorní zvíře – zvíře, které bylo odchováno v chovném zařízení speciálně pro pokusné účely n- Pokus – použití zvířete k pokusným nebo jiným vědeckým účelům, které u zvířete vyvolá nebo může vyvolat bolest, úzkost nebo utrpení, nebo může vést k trvalému poškození nebo ztížení přirozeného způsobu života. Včetně případů, kdy je bolet omezena znecitlivěním a jinými metodami. n nStará definice: Pokusným zvířetem zvíře, které je použito k pokusným účelům, je s ním manipulováno a jsou vytvářeny podmínky a navozovány procesy, které v přirozených podmínkách neexistují n nVymezení pojmu týrání a důvody k usmrcení zvířete n http://vfu-www.vfu.cz/oz/Oz/246-1992.htm n Zařízení: chovná – chována a množena zvířata pro pokusné účely dodavatelská – dodává za úplatu zvířata určená k pokusným účelům uživatelská – zvířata používána k pokusným účelům Typy objektů a prostor v zařízeních – systémy chovu: Otevřený –– konvenční zvířata vstup i výstup zvířat, osob i materiálu je bez bariéry Bariérový – SPF (specific pathogen free) zvířata ochrana před průnikem nežádoucích vlivů z vnějšího prostředí Izolátorový – gnotobiologická zvířata prostor pro zvířata trvale a úplně oddělen od vnějšího prostředí a osob, které se zvířetem manipulují Genetika laboratorních zvířat nZ genetického hlediska rozlišujeme dvě základní skupiny: nGeneticky definovaná – isogenní nInbrední kmeny – produkt příbuzenské plemenitby mezi bratrem a sestrou po více než 20 generací. Homozygotnost uvnitř kmene více než 98%. n nGeneticky nedefinovaná – neisogenní nPotomci skupiny zvířat geneticky heterogenních. Minimální příbuzenská plemenitba. nVlastnosti a využití: větší, odolnější, více plodní, levnější, toxikologické a farmakologické studie – kde potřebujeme vzorek „divoké populace“. Větší n. n n n Informace k ochraně zvířat lze nalézt na stránkách Ministerstva zemědělství: http://eagri.cz/public/web/mze/ministerstvo-zemedelstvi/ , rozcestník eAGRI http://eagri.cz/public/web/mze/ochrana-zvirat/ Základní údaje o ÚKOZ ( Ústřední komise pro ochranu zvířat) Obdorný poradní orgán ministerstva zemědělství k plnění úkolů uvedených v § 20 odst. 1 zákona č. 246/1992 Sb., na ochranu zvířat proti týrání, ve znění pozdějších předpisů, Předsedu a členy jmenuje ministr zemědělství z odborníků navržených příslušnými státními orgány, Společností pro vědu o laboratorních zvířatech a právnickými osobami zabývajícími se ochranou nebo chovem zvířat ÚKOZ se člení na: výbor pro ochranu hospodářských zvířat (VOHZ) výbor pro ochranu zvířat v zájmových chovech (VOZZCH) výbor pro ochranu volně žijících zvířat (VOVŽZ) výbor pro ochranu pokusných zvířat (VOPZ). Proces povolování pokusu na zvířatech nVědecký pracovník - co musí zajistit: n n1/ absolvovat příslušné školení n2/ akreditaci uživatelského zazřízení n3/ schválený projekt pokusu n nJak to udělat, kde sehnat formuláře a kam je poslat? n nAd 1/ přihlásit se, zaplatit, absolvovat, složit zkoušku (VFU) nAd 2/ žádost o akreditaci (na stránkách MZ) podá na MZ nAd 3/ formulář pro projekt pokusu (na stránkách MZ) podá odborné komisi n Uživatelské zařízení (akreditované) Vedoucí pokusu – návrh projektu pokusu Odborná komise uživatelského zařízení Příslušný státní orgán Orgán ochrany přírody (volně žijící zvířata) http://eagri.cz/public/web/mze/ochrana-zvirat/formulare-a-podani/akreditace-osvedceni-k-praci-s-pok usnymi/projekt-pokusu.html Alternativní metody nNejvíce využívány při testování toxicity n nBuněčné a tkáňové kultury – rostlinné, živočišné (lidské) př. n- Testy na fotosenzitivitu a fototoxicitu na fibroblastech n- Testy na citlivost rakovinných buněk vůči cytostatikům n- Neutral Red Assay- sledovaná toxická látka se přidává spolu s kontrastní barvou, která obarví pouze živé buňky – princip vitálního barvení n- Kultury buněk lemujících zuby- testy na dráždivost zubní výplně n-Model lidské kůže – rekonstruovaná epidermis s stratum corneum – sledovaná toxická (leptající) látka musí proniknout přes stratum corneum a poškodit buňky hlubších vrstev - sníží se jejich životnost. n Existují komerčně dostupné sety na tato stanovení – EPISKIN n nBakterie a kvasinky n Další možnosti alternativních metod nPočítačové modely nNeinvazivní zobrazování (CT, NMR) nKuřecí embrya – testy terotogenity nPlacenty (model pro mikrochirurgii, transport léků) nVýzkum populace (strava – ateroskleróza) nVyužití bezobratlých nVajíčka drápatek na testy teratogenity Příklady alternativních metod nModifikace klasického testu orální toxicity nKožní dráždivost nikoli na živém zvířeti ale na terčících kůže z potkanů nKombinované studie toxicity a vlivu látek na reprodukci n nBez použití zvířat: nDraize test dráždivosti oka: původně na králících, jejich oko je ale citlivější než lidské – větší plocha a méně slz. nAlternativní testy: n- sledovaná látka se kape do proteinového roztoku získaného z fazolí n- místo králíků model kuřecích zárodků n n