ČESKÁ TECHNICKÁ NORMA ČSN EN ISO 20079 Jakost vod - Stanovení toxických účinků složek vody a odpadní vody na okřehek (Lemna minor) -Zkouška inhibice růstu okřehku Centrum pro výzkum Mgr. Anita Érseková ( ť*1 J | toxických látek v prostředí Predmet normy Táto norma určuje metódu stanovenia inhibície rastu žaburienky menšej (Lemna minor) látkami a zmesami nachádzajúcimi sa vo vode, vo vyčistených mestských odpadových vodách a v priemyselných odpadových vodách. Podstata skúšky • Rastliny druhu Lemna minor sa pestujú ako monokultúry v rôznych koncentráciách testovanej vzorky po dobu 7 dní. • Cieľom testu je kvantifikovat účinky látok na vegetačný rast v tomto období. • Kvantifikácia je založená na hodnotení počtu stielok a na hodnotení biomasy (celková zarastená plocha stielkami, sušina, chlorofyl). • Po kvantifikácií nasleduje porovnanie rýchlosti rastu rastlín v testovanej látke a v kontrolných koncentráciách a vyjadrenie inhibície rastovej rýchlosti (%, EC(r)x). Rušivé vplyvy • môžu skresľovať alebo znižovať reprodukovateľnosť výsledkov (viď ISO 5667 -16) • nerozpustné, málo rozpustné látky, biologický alebo svetelný rozklad, látky akumulované na hladine vody, a i. • významná je aj stála teplota a osvetlenie Materiály valcovité nádoby, sklenené kryty, zariadenie s konš. teplotou a osvetlením, spektrofotometer, luminometer, pH-meter, ... Chemikálie voda na riedenie, kys.chlorovodíková, roztok hydroxidu sodného, glukóza, agarové médium, živné médium (príprava médií je bližšie popísaná v norme) referenčné látky: 3,5-dichlorfenol, chlorid draselný Postup skúšky Každý zvolený ukazovateľ pre meranie sa kvantifikuje na začiatku a aj na konci skúšky. • upraví sa pH živného média • pripraví sa koncentračná rada pre odhad hodnoty EC(r)x • pre odhad hodnoty EC(r)x sa použijú najmenej 3 replikáty z každej koncentrácie vzorky a 6 replikátov kontroly • každá nádoba musí obsahovať rovnaký počet a veľkosť stielok (celkom 10 až 16 stielok - 2 až 3 stielky na kolóniu), ktoré spĺňajú podmienky predkultivácie Pozorovanie a meranie • základným ukazovateľom je počet stielok; ďalšie sú: zarastená plocha stielkami, sušina, chlorofyl • zaznamenáva sa: 0stielka abnormálnej veľkosti 0dĺžka a poškodenie koreňa >umiestnenie alebo veľkosť špecifickej chlorózy alebo nekrózy 0hodnota pH média na konci skúšky, atď. Kritéria platnosti Za predpokladu, že boli dodržané všetky doporučené postupy a podmienky, v kontrole musí byť priemerný počet stielok, ktoré musia mať priemernú špecifickú rastovú rýchlosť -najmenej 0,275 za deň (r=lnxt2-lnxřl/t2-t1). To zodpovedá dobe zdvojenia približne 2,5 dní a 7násobnému zvýšeniu priemerného počtu stielok na konci skúšky.