OECD guideline 205: Avian Dietary Toxicity test
(Akutní perorální test toxicity na ptácích)
OECD guideline 206: Avian Reproduction test
(Test reprodukční toxicity na ptácích)
Ondřej Audy
Blanka Maňáková
Akutní perorální test toxicity na ptácích (OECD 205)
• Princip perorálního testu spočívá v umístění 10 ptáků do
klece s fotoperiodou 12-16h světla a v jejich krmení
potravou obsahující testovanou látku v různých
koncentracích.
• Expozice ptáků probíhá po dobu 5 dnů. Další 3 dny jsou
ptáci krmení základní krmnou směsí bez přítomnosti
testované látky. V průběhu testu se v časových
intervalech 24, 48, 72, 96 a 120 hodin kontroluje stav a
chování ptáků a odstraňují se uhynulí jedinci.
Výběr testované látky a jedinců
Látka
– Rozpustnost ve vodě, tlak nasycených par, struktura, Kow,
chemická stabilita ve vodě, potravě a na světle
– Nelze používat pro těkavé látky
Exp. zvířata
– Aklimatizace nejméně 7 dní, náhodné rozdělení do skupin,
potrava ad libitum
– 72h před testem monitoring zdravotního stavu
– Mortalita > 5% - odmítnutí skupiny
• Jedinci zvoleného druhu by měli pocházet z jedné populace
známého původu bez výskytu ptačích chorob a být stejného stáří
(max. den rozdíl)
• Homogenní smísení látky s potravou – netoxická pomocná látka
Doporučené druhy
Kachna divoká
(Anas platyrhynchos)
Křepelka japonská
(Coturnix coturnix japonica)
Křepelka virginská
(Colinus virginianus)
Doporučené druhy
Holub skalní
(Columba livia)
Bažant obecný
(Phasianus colchicus)
Orebice rudá
(Alectoris rufa)
Design testu
• Metoda
– 5 dní potrava s testovanou látkou (nejméně 5 koncentrací)
– Od 6. dne basální potrava (nejméně tři dny)
– Mortalita, známky toxicity
• Validita
– Úmrtnost v kontrole < 10%
– koncentrace látky v potravě byla dostatečná (> 80%)
– Při nejnižší testované koncentraci žádné toxické účinky
• Chov
– Specifické podmínky dle druhu, čistá voda ad libitum, 12-16h
fotoperioda, 5-10 jedinců na skupinu, dobré větrání
– teplota, rel. vzdušná vlhkost (%), stáří, prostor (cm2/jedinec)
Vyhodnocení
• Report
– Uvádí se hodnota LC50
– Pokud je i při použití nejvyšší doporučené dávky
(5000 ppm) mortalita menší než 50%, pak se LC50
uvádí jako > 5000 ppm
– Popis stravy včetně doplňků a pomocných látek
– Popis chovu včetně materiálů
Test reprodukční toxicity na ptácích (OECD 206)
Cíl testu
Stanovení reprodukční toxicity látky
LC50
Princip
Tento test spočívá ve stanovení reprodukční toxicity
látek podávaných rodičovským jedincům a sledování
vlivu expozice na nově vylíhnutá mláďata. Test sleduje
účinky látek na reprodukci, fertilitu a teratogenitu.
Doporučené druhy
Kachna divoká
(Anas platyrhynchos)
Křepelka japonská
(Coturnix coturnix japonica)
Křepelka virginská
(Colinus virginianus)
Design testu
• Ptáci jsou chováni v klecích v párech nebo ve skupinách
o jednom samci a dvou samicích.
• Krmeni jsou potravou obsahující testovanou látku
v různých koncentracích po dobu minimálně 20 týdnů.
• Během expozice je dodržována standardní fotoperioda
(7-8 hodin).
• Po skončení expozice je prodloužením fotoperiody
(16-18 hodin) navozena snáška vajec. Vejce se sbírají
10 týdnů, jsou uměle inkubována a líhnutá kuřata jsou
chována po dobu 14 dní.
Výběr testované látky a jedinců
Látka
– Přidávají se do krmiva dospělců
– rozpustná a chemicky stabilní ve vodě a v krmivu,
stabilní na světle, struktura, Kow
– Nelze použít pro těkavé a nestabilní látky
– vhodný nosič
Exp. zvířata
– Chovy při teplotě 22 5 C, relativní vlhkost 50 – 75%
– Před testem nutná dvoutýdenní adaptace
– na každou koncentraci a kontrolu aspoň 12 párů
Sledované odpovědi testovacího organismu
• mortalita dospělců
• příznaky intoxikace
• hmotnost těla dospělců a mláďat
• konzumace potravy dospělci a mláďaty
• produkce vajec
• oplozenost vajec
• tloušťku skořápky
• počet vejcí s prasklinami
• líhnivost kuřat
• přežívání mláďat
• patologické vyšetření dospělců
Podmínky validity testu
• Mortalita v kontrolách na konci testu menší než 10%
• Průměrná tloušťka skořápky:
kachna: 0,34mm
křepelky: 0,19mm
• průměrný počet 14-ti denních potomků na samičku v
kontrolách:
kachna: 14
křepelka virg.: 12
křepelka jap.: 24
• koncentrace testované látky nesmí klesnout pod 80%
udávané hodnoty
Děkujeme za pozornost