1 Bi8120 A lik á b ěč á bi l i 14 3 2012Bi8120 A lik á b ěč á bi l i 14 3 2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie – 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie – 14.3.2012 BiomembrányBiomembrány doc. RNDr. Renata Veselská, Ph.D., M.Sc. Ústav experimentální biologie Přírodovědecká fakulta MU doc. RNDr. Renata Veselská, Ph.D., M.Sc. Ústav experimentální biologie Přírodovědecká fakulta MUPřírodovědecká fakulta MUPřírodovědecká fakulta MU Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 2 Program přednášky:Program přednášky: • struktura a vlastnosti biomembrán é ě • struktura a vlastnosti biomembrán é ě Program přednášky:Program přednášky: praktické aplikace - imunofenotypizace buněk • fúze membrán a vezikulární transport praktické aplikace - imunofenotypizace buněk • fúze membrán a vezikulární transportp praktické aplikace - medicínské aspekty praktické aplikace - liposomy a micely p praktické aplikace - medicínské aspekty praktické aplikace - liposomy a micely • buněčná fúze praktické aplikace - hybridomová technologie • buněčná fúze praktické aplikace - hybridomová technologie • transport látek přes membrány praktické aplikace - dialýza • transport látek přes membrány praktické aplikace - dialýza Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 praktické aplikace dialýzapraktické aplikace dialýza 3 STRUKTURA A VLASTNOSTI BIOMEMBRÁN STRUKTURA A VLASTNOSTI BIOMEMBRÁNBIOMEMBRÁNBIOMEMBRÁN Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 4 Lipidová dvojvrstvaLipidová dvojvrstvaLipidová dvojvrstvaLipidová dvojvrstva Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 5 Fl idit b áFl idit b á Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 Fluidita membrányFluidita membrány 6 Složení plazmatické membrány:Složení plazmatické membrány:p yp y Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 7 Stavba plazmatické membrány:Stavba plazmatické membrány:Stavba plazmatické membrány:Stavba plazmatické membrány: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 8 Funkce transmembránových proteinů:Funkce transmembránových proteinů: • přenašeče (Na+/K+ pumpa...) • spojovací proteiny (intergriny...) • přenašeče (Na+/K+ pumpa...) • spojovací proteiny (intergriny...) • receptory (EGFR, receptory pro FGF, PDGF, TNF...) • enzymy (adenylátcykláza...) • receptory (EGFR, receptory pro FGF, PDGF, TNF...) • enzymy (adenylátcykláza...) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 9 Lokalizace transmembránových proteinů:Lokalizace transmembránových proteinů: střevní epitelstřevní epitel Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 pp 10 CD markery (antigeny) • glykoproteiny na povrchug y p y p lidských buněk • v současnosti cca 250 • imunofenotypizace (zejména v hematologii) • nespecifické:• nespecifické: CD47, CD118 • specifické:p CD66b - granulocyty CD85, CD205 - dendritické buňky CD133 - kmenové, resp. progenitorové buňkyCD133 kmenové, resp. progenitorové buňky CD141 - vaskulární endotelové buňky CD168 - buňky karcinomu prsu CD207 - Langerhansovy buňky Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 CD207 - Langerhansovy buňky 11 Příklady detekce CD markerů: linie HL-60Příklady detekce CD markerů: linie HL-60 granulocyty:granulocyty: CD66b DAPI CD66b DAPI makrofágy: CD14 DAPI makrofágy: CD14 DAPIDAPIDAPI Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 12 Příklady detekce CD markerů: li i d i é t k ů Příklady detekce CD markerů: li i d i é t k ůlinie derivované z osteosarkomůlinie derivované z osteosarkomů Saos-2: CD133 / DAPISaos-2: CD133 / DAPI OSA-03: CD133OSA-03: CD133 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 // 13 CD133 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 14 Imunofenotypizace myeloidních buněk Imunofenotypizace myeloidních buněk Imunofenotypizace lymfoidních buněk Imunofenotypizace lymfoidních buněklymfoidních buněklymfoidních buněk Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 15 Imunofenotypizace buněkImunofenotypizace buněkImunofenotypizace buněk pomocí průtokové cytometrie Imunofenotypizace buněk pomocí průtokové cytometrie Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 16 FÚZE MEMBRÁNFÚZE MEMBRÁN A VEZIKULÁRNÍ TRANSPORTA VEZIKULÁRNÍ TRANSPORT Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 17 Průběh fúzePrůběh fúze Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 18 Intracelulární transport t i ů Intracelulární transport t i ůproteinů: • jadernými póry ř b á proteinů: • jadernými póry ř b á• přes membrány • prostřednictvím vezikulů • přes membrány • prostřednictvím vezikulůvezikulůvezikulů Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 19 Schéma vezikulárního transportu:Schéma vezikulárního transportu: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 20 Gaucherova nemocGaucherova nemocGaucherova nemoc • příčinou mutace v genu kódujícím glukocerebrosidázu (= enzym nutný pro Gaucherova nemoc • příčinou mutace v genu kódujícím glukocerebrosidázu (= enzym nutný proglukocerebrosidázu ( enzym nutný pro rozklad glykolipidů v lysozomech) • AR typ dědičnosti glukocerebrosidázu ( enzym nutný pro rozklad glykolipidů v lysozomech) • AR typ dědičnostiyp • zvětšení velikosti a počtu lysozomů s nedegradovaným materiálem yp • zvětšení velikosti a počtu lysozomů s nedegradovaným materiálem • základem terapie podávání chybějícího enzymu (např. preparát Cerezyme) • základem terapie podávání chybějícího enzymu (např. preparát Cerezyme) • kandidát pro genovou terapii (začlenění cDNA kódující daný enzym do kostní dřeně) • kandidát pro genovou terapii (začlenění cDNA kódující daný enzym do kostní dřeně) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 21 Typ I:Typ I:Typ I: • není zasažen nervový systém • zvětšení sleziny jater poruchy Typ I: • není zasažen nervový systém • zvětšení sleziny jater poruchy• zvětšení sleziny, jater, poruchy struktury kostí • neohrožuje život člověka • zvětšení sleziny, jater, poruchy struktury kostí • neohrožuje život člověkaj Typ II: • nervový systém je zasažen, poruchy jsou zřejmé d éh dět t í i ti í jí l i b j Typ II: • nervový systém je zasažen, poruchy jsou zřejmé d éh dět t í i ti í jí l i bod raného dětství, pacienti umírají velmi brzy Typ III: • nervový systém je zasažen (demence) poruchy od raného dětství, pacienti umírají velmi brzy Typ III: • nervový systém je zasažen (demence) poruchy• nervový systém je zasažen (demence), poruchy se začnou projevovat přibližně od 10. roku věku • nervový systém je zasažen (demence), poruchy se začnou projevovat přibližně od 10. roku věku Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 22 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 23 Gaucher cellsGaucher cellsGaucher cells • makrofágy k t jí i l ě tiž é tká i Gaucher cells • makrofágy k t jí i l ě tiž é tká i• vyskytují se izolovaně v postižené tkáni • pozitivní po obarvení činidlem PAS (Periodic Acid Schiff) • vyskytují se izolovaně v postižené tkáni • pozitivní po obarvení činidlem PAS (Periodic Acid Schiff)Acid Schiff) Pseudo-Gaucher cells ý k t ě í j ý h ký Acid Schiff) Pseudo-Gaucher cells ý k t ě í j ý h ký• výskyt u onemocnění spojených s vysokým turnoverem membrán (chronická granulomatózní leukémie, mnohočetný • výskyt u onemocnění spojených s vysokým turnoverem membrán (chronická granulomatózní leukémie, mnohočetnýg , ý myelom, Hodgkinova choroba, AIDS…) • ve tkáni se vyskytují ve shlucích g , ý myelom, Hodgkinova choroba, AIDS…) • ve tkáni se vyskytují ve shlucích Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 24 G h llG h llGaucher cellsGaucher cells Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 25 Příklad endocytózy: LDL (low-density lipoprotein)Příklad endocytózy: LDL (low-density lipoprotein) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 26 Poruchy příjmu cholesterolu • příčinou porucha struktury LDL-receptoru Poruchy příjmu cholesterolu • příčinou porucha struktury LDL-receptorup p y p • buňky nepřijímají cholesterol • cholesterol se hromadí v krvi a napomáhá p p y p • buňky nepřijímají cholesterol • cholesterol se hromadí v krvi a napomáhácholesterol se hromadí v krvi a napomáhá vzniku aterosklerózy • většina pacientů umírá v raném věku na srdeční cholesterol se hromadí v krvi a napomáhá vzniku aterosklerózy • většina pacientů umírá v raném věku na srdečníp záchvat (důsledek ucpání tepen zásobujících srdce) p záchvat (důsledek ucpání tepen zásobujících srdce) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 27 Tvorba liposomů:Tvorba liposomů:Tvorba liposomů:Tvorba liposomů: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 28 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 29 Liposome-delivery systems:Liposome-delivery systems: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 30 Využití liposomů a micel pro cílenou aplikaci léčiv a dalších látek do organismu • transport přes BBB (blood-brain barrier) / tight junctions Yang H: Nanoparticle-Mediated Brain-Specific Yang H: Nanoparticle-Mediated Brain-SpecificNanoparticle-Mediated Brain-Specific Drug Delivery, Imaging, and Diagnosis. Pharmaceutical Research, 2010. Nanoparticle-Mediated Brain-Specific Drug Delivery, Imaging, and Diagnosis. Pharmaceutical Research, 2010. Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 Pharmaceutical Research, 2010.Pharmaceutical Research, 2010. 31 Yang H: Nanoparticle-Mediated Brain-Specific Drug Delivery, Imaging, and Diagnosis. Pharmaceutical Research, 2010. Yang H: Nanoparticle-Mediated Brain-Specific Drug Delivery, Imaging, and Diagnosis. Pharmaceutical Research, 2010.  liposomy liposomy Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 p y  micely p y  micely 32 Možnosti zacílení liposomů do nádorové tkáně (maligní melanom) Možnosti zacílení liposomů do nádorové tkáně (maligní melanom)( g )( g ) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 33 Target-specific multimodal liposomeTarget-specific multimodal liposomeg p p (for combined angiogenesis imaging and therapy) g p p (for combined angiogenesis imaging and therapy) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 34 FÚZE MEMBRÁNFÚZE MEMBRÁN Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 35 ř á fúř á fúPřirozená fúze: • fertilizace vznik syncitia Přirozená fúze: • fertilizace vznik syncitia• vznik syncitia Indukovaná fúze: • vznik syncitia Indukovaná fúze: • fúzogeny: elektrické pole á • fúzogeny: elektrické pole áchemikálie (polyethylenglykol) virusy chemikálie (polyethylenglykol) virusy 50 nm virusy (Sendai virus) virusy (Sendai virus) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 36 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 37 Princip mezidruhové fúzePrincip mezidruhové fúze Heterokaryon = hybridní buňka se 2 jádry S k h b id í b ňk fú ý jád Heterokaryon = hybridní buňka se 2 jádry S k h b id í b ňk fú ý jád Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 Synkaryon = hybridní buňka se zfúzovaným jádremSynkaryon = hybridní buňka se zfúzovaným jádrem 38 Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán:Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán: Frye a Eddidin 1970Frye a Eddidin 1970 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 Frye a Eddidin, 1970Frye a Eddidin, 1970 39 Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán:Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán:Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán:Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán: t = 0 mint = 0 min t = 40 mint = 40 min t = 40 mint = 40 min myší antigeny lidské antigeny myší antigeny lidské antigeny lidské antigenylidské antigeny myší antigenymyší antigeny Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 40 Hybridomová technologieHybridomová technologiey g = využití indukované buněčné fúze pro výrobu monoklonálních protilátek y g = využití indukované buněčné fúze pro výrobu monoklonálních protilátek Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 41 Přirozená rolePřirozená roleo e á o e protilátek v obraně proti infekcím nebo toxinům o e á o e protilátek v obraně proti infekcím nebo toxinůmnebo toxinůmnebo toxinům Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 42 Struktura a specifita protilátekStruktura a specifita protilátekStruktura a specifita protilátekStruktura a specifita protilátek Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 43 Polyklonální protilátky: • produkovány velkým počtem klonů plazmocytů Polyklonální protilátky: • produkovány velkým počtem klonů plazmocytů• produkovány velkým počtem klonů plazmocytů (aktivovaných B-lymfocytů) • směs stovek až tisíců odlišných molekul • produkovány velkým počtem klonů plazmocytů (aktivovaných B-lymfocytů) • směs stovek až tisíců odlišných molekulý imunoglobulinů • vazba na různé epitopy téhož antigenu ý imunoglobulinů • vazba na různé epitopy téhož antigenu Monoklonální protilátky: • produkovány jedním klonem plazmocytů Monoklonální protilátky: • produkovány jedním klonem plazmocytů• produkovány jedním klonem plazmocytů (aktivovaných B-lymfocytů) • jediný typ imunoglobulinu • produkovány jedním klonem plazmocytů (aktivovaných B-lymfocytů) • jediný typ imunoglobulinujed ý typ u og obu u • vazba na jediný epitop příslušného antigenu jed ý typ u og obu u • vazba na jediný epitop příslušného antigenu Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 44 Příprava polyklonálních protilátekPříprava polyklonálních protilátek • imunizace pokusného• imunizace pokusnéhop zvířete • izolace směsi protilátek z krve imunizovaného p zvířete • izolace směsi protilátek z krve imunizovaného zvířetezvířete Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 45 Princip hybridomové technologie (příprava monoklonálních protilátek) Princip hybridomové technologie (příprava monoklonálních protilátek)(příprava monoklonálních protilátek)(příprava monoklonálních protilátek) myelomovámyelomová aktivovanýaktivovanýmyelomová buňka myelomová buňka aktivovaný B-lymfocyt aktivovaný B-lymfocyt HYBRIDOMHYBRIDOM Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 46 Výsledek hybridomové technologie: Výsledek hybridomové technologie: monoklonální protilátky jsou produkovány buňkami téhož buněčného klonu, monoklonální protilátky jsou produkovány buňkami téhož buněčného klonu,, vážou se na stejnou antigenní determinantu a mají identické složení l k l , vážou se na stejnou antigenní determinantu a mají identické složení l k lmolekulymolekuly Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 47 Využití monoklonálních protilátek v buněčné biologii a v medicíně Využití monoklonálních protilátek v buněčné biologii a v medicíněgg • morfologické a funkční studie v základním výzkumu (exprese proteinu, lokalizace, ) • morfologické a funkční studie v základním výzkumu (exprese proteinu, lokalizace, )transport...) • imunofenotypizace buněk a tkání (CD antigeny, intracelulární markery ) - patologie hematologie transport...) • imunofenotypizace buněk a tkání (CD antigeny, intracelulární markery ) - patologie hematologieintracelulární markery...) - patologie, hematologie, onkologie Metodické přístupy: intracelulární markery...) - patologie, hematologie, onkologie Metodické přístupy:p py • imunodetekce pro mikroskopii (imunocytochemie, imunofluorescence, imunogold-labelling) W t bl tti á l d á i d t k p py • imunodetekce pro mikroskopii (imunocytochemie, imunofluorescence, imunogold-labelling) W t bl tti á l d á i d t k• Western-blotting a následná imunodetekce • imunoafinitní sloupcová chromatografie • imunoprecipitace • Western-blotting a následná imunodetekce • imunoafinitní sloupcová chromatografie • imunoprecipitace Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 • imunoprecipitace• imunoprecipitace 48 TRANSPORT LÁTEK PŘES MEMBRÁNY TRANSPORT LÁTEK PŘES MEMBRÁNYPŘES MEMBRÁNYPŘES MEMBRÁNY Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 49 Mechanismy membránového přenosu difúze Mechanismy membránového přenosu difúze• difúze • osmóza • difúze • osmóza • iontové kanály • přenašečový transport • iontové kanály • přenašečový transportpřenašečový transport • transportní váčky, resp endocytóza / exocytóza přenašečový transport • transportní váčky, resp endocytóza / exocytózaresp. endocytóza / exocytózaresp. endocytóza / exocytóza Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 50 OSMOTICKÉ JEVYOSMOTICKÉ JEVYOSMOTICKÉ JEVYOSMOTICKÉ JEVY DifúDifúDifúze • permeabilní membrána á í š ě á á š ě Difúze • permeabilní membrána á í š ě á á š ě(prochází rozpuštěná látka i rozpouštědlo)(prochází rozpuštěná látka i rozpouštědlo) Osmóza • semipermeabilní membrána Osmóza • semipermeabilní membrána (prochází pouze rozpouštědlo)(prochází pouze rozpouštědlo) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 51 Hypotonické prostředí • prostředí s nižším osmotickým tlakem Hypotonické prostředí • prostředí s nižším osmotickým tlakem• prostředí s nižším osmotickým tlakem • voda proniká do buněk • plazmoptýza (erytrocyty: hemolýza) • prostředí s nižším osmotickým tlakem • voda proniká do buněk • plazmoptýza (erytrocyty: hemolýza)plazmoptýza (erytrocyty: hemolýza) Hypertonické prostředí plazmoptýza (erytrocyty: hemolýza) Hypertonické prostředí • prostředí s vyšším osmotickým tlakem • voda uniká z buněk do prostředí l lý ( tli é b ňk ) • prostředí s vyšším osmotickým tlakem • voda uniká z buněk do prostředí l lý ( tli é b ňk )• plazmolýza (rostlinné buňky) • plazmorýza (živočišné buňky) • plazmolýza (rostlinné buňky) • plazmorýza (živočišné buňky) Izotonické prostředí • prostředí o stejném osmotickém tlaku Izotonické prostředí • prostředí o stejném osmotickém tlaku Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 p jp j 52 Porovnání osmotických jevů u živočišné a rostlinné buňky: Porovnání osmotických jevů u živočišné a rostlinné buňky:u živočišné a rostlinné buňky:u živočišné a rostlinné buňky: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 53 Reakce živočišné buňky na změny osmotického tlaku: Reakce živočišné buňky na změny osmotického tlaku:osmotického tlaku:osmotického tlaku: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 54 PRAKTICKÉ APLIKACE: DIALÝZA U PACIENTŮ PRAKTICKÉ APLIKACE: DIALÝZA U PACIENTŮDIALÝZA U PACIENTŮ S NEFUNKČNÍMI LEDVINAMI DIALÝZA U PACIENTŮ S NEFUNKČNÍMI LEDVINAMI Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 55 Dialýza = parciální difúze (přes membránu prochází voda a nízkomolekulární látky) Dialýza = parciální difúze (přes membránu prochází voda a nízkomolekulární látky)(p p y)(p p y) hemodialýza (umělá ledvina) hemodialýza (umělá ledvina) peritoneální di lý peritoneální di lýdialýzadialýza Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 56 Princip hemodialýzyPrincip hemodialýzy Dialyzační roztok: voda, NaCl, KCl, CaCl2, MgCl2 acetát sodný Dialyzační roztok: voda, NaCl, KCl, CaCl2, MgCl2 acetát sodnýMgCl2, acetát sodnýMgCl2, acetát sodný Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 57 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 58 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 59 Peritoneální dialýzaPeritoneální dialýza Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 60 Princip peritoneální dialýzyPrincip peritoneální dialýzy Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 61 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012 62 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 04 / 14.3.2012