Planktónové sinice/cyanobaktérie - stanovenie abundancie RNDr. Bohuslav Uher, Ph.D. uherius@sci.muni.cz Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, Ústav botaniky a zoologie Metodika •Aerotopy (vznášanie) •Cyrus I •Cieľ: Počet buniek siníc v 1 ml pôvodnej vzroky •Implementácia Smernice Európskeho parlamentu a rady 2006/7/ES riadení kvality vody učenej na kúpanie (odporúčanie I. stupeň: 20 000 buniek na 1 ml, II. stupeň: 100 000 buniek na 1 ml a III. stupeň: viditeľný vodný kvet) •Problematika kolónií a zhlukov planktónových siníc • • Postup •Kvantifikácia siníc bez predúpravy •Dezintegrácia pomocou Lugolovho roztoku •Mechanická dezintegrácia pomocou KOH •Samotné počítanie (vychádzať z minimálne 100 jedincov) při zväčšení 200-400× •Zahusťovať či nezahusťovať? •NIE: predpoklad výskytu 1000 jedincov •ÁNO: výskyt menej než 100 jedincov na komôrke Spôsoby počítania •Sinice, pri ktorých sa priamo počítajú bunky: Microcystis, Woronichinia, Snowella, Merismopedia, Anabaena • •Sinice, pri ktorých sa meria dĺžka vláken: Planktothrix, Aphanizomenon, Pseudanabaena, Limnothrix, nutný prepočet dĺžky vlákna (Lv) na počet buniek, kde 1 bunka = 5 μm, počet buniek = Lv/5 Výpočet abundancie •An = Σni-1 n.Pk.Vz.(Vd + VKOH) / Pp.Vp.Vk.Vd •An - abundancia buniek všetkých prítomných siníc (bunky/ml) •n - počet buniek taxónu na prepočítanej časti komôrky •Pp - prepočítaná plocha komôrky v mm2 resp. vyjadrená jako počet pásov (napr. 8 pásov), polí atď., napr. 1 pás = 2,5 mm2 (Pp a Pk rovnaké jednotky) •Pk - celková plocha komôrky v mm2 = 100 mm2 40 pásov •Vd - objem vzorky použitý k dezintegrácii v ml •VKOH - objem pridaného dezitegračného činidla v ml (KOH, Lugolov roztok, HCl) •Vp - objem vzorky použitý ku koncentrovaniu v ml, ak nezahustený = 1 ml •Vz - objem zahustenej vzorky v ml, nezahustený 1 ml •Vk - objem komôrky v ml = 1 ml vodnykvet Sinicový vodný kvet v mikroskope Anabaena sp. Microcystis sp. Aphanizomenon sp. Gomphosphaeria sp.