1. cvičení    5. – 7. 3.


  Téma: Očkování mikroorganismů, popis makroskopických znaků a jejich mikroskopický průkaz pomocí
                                   preparátu barveného dle Grama


Pomůcky pro 10 studentů – do každé dvouhodinovky cvičení:

-         10ti misek s MPA a 10ti šikmých agarů MPA

-         10ti misek s kulturami: Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis, Bacillus sphaericus
(kultury bacilů nemusí mít spory), Micrococcus luteus, Kocuria rosea, Staphylococcus aureus,
Streptomyces griseus, Escherichia coli, Serratia marcescens, Saccharomyces cerevisiae

-         pomůcky pro Gramovo barvení a očkování MO


2. cvičení    19.3. – 21.3.


  Téma: Nepřímé stanovení počtu životaschopných buněk bakterií plotnovou metodou, přímé stanovení
      celkového počtu buněk pomocí Bürkerovy komůrky a sledování působení zvýšené teploty na
                    životaschopnost kvasinkových buněk metodou vitálního testu


Pomůcky pro 10 studentů – do každé dvouhodinovky cvičení:

 a) plotnová metoda se bude připravovat jako v klasických cvičeních – ve dvojici 5 erlenek
s kulturou mikrokoka a sterilní zkumavky pro ředící řadu

 b) vitální test – dvojice si rozdělí časové intervaly a vznikne tak jediný společný graf
závislosti úbytku živých buněk na prodlužujícím se působení teploty 60 °C, využití Bürkerových
komůrek, droždí a barvičky methylenové modři



3. cvičení  9.4 – 11.4.


Téma: Průkaz a izolace vybraných skupin půdních mikroorganismů, průkaz přítomnosti a umístění spor
     v buňkách bakterií rodu Bacillus v nativním preparátu pozorovaném pod fázovým kontrastem


Pomůcky pro 10 studentů – do každé dvouhodinovky cvičení:

 a) 5 misek s Ashbyho agarem, pět zkumavek a prázdných erlenek pro průkaz clostridií (pro tuto část
se bude pracovat opět ve dvojici), pět umělohmotných misek pro průkaz celulolytických bakterií

 b) pro pozorování spor (nikoli jejich barvení) misky s kmeny rodu Bacillus, dvoudenní kultury se
sporami a to: Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis, Bacillus sphaericus, Bacillus mycoides,
Paenibacillus polymyxa

- podložní a krycí sklíčka pro přípravu nativního preparátu (bude se chystat ve dvojici jeden)







4. cvičení    23.4. – 25.4.


 Téma: Stanovení koncentrace antibiotik a sledování inhibičního účinku krystalové violeti na růst
                                        zaočkované kultury


Pomůcky pro 10 studentů – do každé dvouhodinovky cvičení:

 a) kalibrační řada pro stanovení koncentrace oxacilinu

 b) bakteriostatické působení roztoku krystalové violeti (v obecných cvičeních použijeme vícero
barviček, zde pouze krystalku)


Některá organická barviva mají bakteriostatický účinek na grampozitivní bakterie i v koncentracích,
kdy gramnegativní bakterie ještě rostou. Tohoto jevu se využívá pro přípravu selektivních půd
užívaných, např. při stanovení koliformních bakterií. Obvykle se přidává krystalová nebo gencianová
violeť, malachitová zeleň, methylenová modř, trypaflavin aj.


 - 1% vodného roztoku krystalové violeti (nezaměňovat s roztokem označeným Gram I), bujonové
kultury Bacillus subtilis, Enterobacter aerogenes, Escherichia coli a Micrococcus luteus,

 - pro dvojici dále 4 sterilní zkumavky, sterilní destilovaná voda, sterilní pipeta 10 ml,

Sterilní umělohmotné špičky pro mikropipety 1000 μl, 4 sterilní Petriho misky, 4 zkumavky s 18 ml
MPA



5. cvičení 7.5. – 9.5.


                Téma: Úvod do identifikace bakterií biochemickými testy; ENTEROTEST


Pomůcky pro 10 studentů – do každé dvouhodinovky cvičení:

 a) ukázkové demonstrační zkumavky s TSI a OF testem, sklíčka pro provedení katalázového testu a
testu na produkci peroxidázy (společné s ostatními cvičeními)

 b) enterotest se bude provádět pouze s dvěma kmeny glukozu fermentujícíh G- bakterií pro celou
skupinu




6. cvičení 14.5. – 16.5.


                   Téma: zápočtový preparát z kultur použitých v prvním cvičení