KULTIVACE Je předstupněm izolace bakteriálního druhu, následné identifikace a stanovuje se pomocí ní citlivost na ATB •Sterilní odběr vzorků (klinika, prostředí, průmysl) •Kultivace na vhodném mediu dle jejího účelu (univerzální; selektivní; selektivně diagnostické půdy…) •A ve vhodné atmosféře (anaerobní, mikroaerofilní, kapnofilní…) •Neznámý kmen – více souběžných kultivací.. • Izolace heterotrofů z prostředí: Nutrient broth -růst bakterií potlačuje plísně Sabouradův agar: selektivně působí na bakterie (díky nižšímu pH a ATB) Univerzální vs selektivní medium… •Obohacená media •Př: krevní agar = základ + 5-10% krve • - sledování typu hemolýzy…. Klinické izoláty • •Stěr z kůže: bez hemolýzy… •Hemolýza úplná (β) a neúplná (alfa = viridace) Úplné projasnění krevního agaru v okolí růstu bakterií • • •Selekce grampozitivních bakterií: - využití agaru s kolistinem a kyselinou nalidixovou • •Na jednom mediu selekce grampozitivních bakterií stafylokoků a zároveň diagnostika Staphylococcus aureus – Fermentuje manitol a okyselením indikátor zežloutne • •Selekce gramnega tivních buněk • •Selekce gramnegativních buněk a diagnostika laktózu- fermentujících na Endově půdě • •Selekce gramnegativních buněk (grampozitivní inhibovány žlučovými solemi a eosinem). Na EMB půdě jsou laktózu fermentující druhy tmavé • • •Selekce gramnegativních buněk (grampozitivní inhibovány žlučovými solemi a krystalovou violetí). Laktózu fermentující druhy jsou červené. E.coli Shigella • E.coli Salmonella Salmonella produkuje sirovodík • Na XLD mediu je grampozitivní flora odstíněna deoxycholátem, opět se sleduje fermentace laktózy • Čistota kultury Křížový roztěr: ředěním kultury získáme izolované kolonie… Je přítomen jeden nebo více morfologických typů kolonií? • Různý vzhled kolonií…