Bakteriostatické působení některých barviv


Některá organická barviva mají bakteriostatický účinek na grampozitivní

bakterie i v koncentracích, kdy  gramnegativní bakterie ještě rostou. Tohoto jevu se

využívá pro přípravu selektivních půd užívaných, např. při stanovení koliformních

bakterií. Obvykle se přidává krystalová nebo gencianová violeť, malachitová zeleň,

methylenová modř, trypaflavin aj.


Bakteriostatické působení roztoku krystalové violeti


Potřeby : 1% vodný roztok krystalové violeti (nezaměňovat s roztokem označeným

Gram I), kultury Bacillus subtilis, Enterobacter aerogenes, Escherichia coli a

Micrococcus luteus, 4 sterilní zkumavky, sterilní destilovaná voda, sterilní pipeta 10 ml,

4 sterilní pipety 1 ml, 4 sterilní Petriho misky, 4 zkumavky s 18 ml MPA (půda č.XY).


Provedení :

1. Nařeď roztok krystalové violeti postupně asepticky 10×, 100×, a 1000×.

2. Rozehřej 4 zkumavky s MPA ve vodní lázni. Do prvé přidej 1 ml neředěného

barviva, do druhé zkumavky 1 ml 10× ředěného, do třetí zkumavky 1 ml barviva

100× ředěného a do poslední přidej 1 ml barviva 1000× naředěného. Rozmíchej a

vylej do 4 sterilních Petriho misek.

3. Po ztuhnutí rozděl fixem dno misek na  čtvrtiny, a na každou z nich naočkuj všechny 4 shora
uvedené kmeny bakterií.

4. Dej inkubovat při 37^oC na 24 hodin. Odečti růst bakterií a výsledky zapiš do

tabulky, srovnej růst gramnegativních bakterií s růstem bakterií grampozitivních.