C4182 Biochemie II 09-Biomembrány FRVŠ 1647/2012 2/8/2013 1 Petr Zbořil Obsah •Biomembrány, struktura, vlastnosti, funkce. „Polární lipidy“, glycerofosfolipidy, sfingolipidy, plasmalogeny. •Membránový transport, usnadněná difuze, aktivní transport, permeasy a iontové kanály. •Transport aminokyselin, cukrů a iontů. Symport, antiport. •Fúze membrán. •Významné transportní systémy. •Struktura a funkce K-Na-ATPasy, glukosový přenašeč, mitochondriální transport. • 2/8/2013 Petr Zbořil 2 Membránový transport •Membrána jako přepážka oKompartmentace oStruktura buněk – organely oVýznamný regulační princip – oddělení procesů •Komunikace oPřenos materiálu oPřenos informace a signálů – regulace oReceptory •Enzymové systémy v membráně oOrganizované oVektoriální procesy • 2/8/2013 Petr Zbořil 3 Klasifikace •Stránka materiálová oOtázka prostupnosti – polarita a velikost o •Stránka energetická oOtázka gradientů koncentrací a náboje o •Speciální hlediska • 2/8/2013 Petr Zbořil 4 Typy transportů •Volně oPlyny oMalé nenabité molekuly •Zprostředkovaně oVelké nenabité polární molekuly oIonty – H+ oNabité polární molekuly •NADH •Různé typy přenosu • 2/8/2013 Petr Zbořil 5 Materiální hlediska •Volný transport odifuse přes membránovou strukturu – Fick omalé nepolární molekuly (plyny) • Zprostředkovaný ousnadněná difuse oaktivní transport ospeciální transportní systém o - membránová bílkovina (komplex) •Typy zprostředkovaného transportu omobilní přenašeč - změna konformace otevírá vazná místa střídavě na jednu a druhou stranu okanál (iontový) – oboustranně buď uzavřen nebo otevřen – řízeno chemicky (vazba ligandů) nebo potenciálově, mechanicky i kombinovaně • • • 2/8/2013 Petr Zbořil 6 Typy transportu •SCHEMA PROSTÉ A USNADNĚNÉ DIFUSE – kanálek a mobilní přenašeč • • • 2/8/2013 Footer Text 7 Typy transportu •USNADNĚNÁ DIFUSE GLUKOSY ozprostředkovaná mobilním přenašečem – specificita • • • • • 2/8/2013 Footer Text 8 Typy transportu •Iontové kanálky oŘízené chemicky, potenciálově, tlakem, kombinací • • • • • • • • • •Potenciálem řízené iontové kanálky - otevírání a uzavírání 2/8/2013 Footer Text 9 Typy transportu •Iontové kanálky oŘízené chemicky, potenciálově, tlakem, kombinací • • • • • • • • • • •Chemicky řízené iontové kanálky ootevírání a uzavírání je dáno vazbou ligandu, zde acetylcholinem 2/8/2013 Footer Text 10 Kinetika transportu •Obdoba kinetiky enzymů u zprostředkovaného transportu • • • • • • • • • • 2/8/2013 Footer Text 11 Podstata usnadnění difuse • •Analogie s aktivační •energií u chemických reakcí •a jejím snížením působením •enzymů 2/8/2013 Footer Text 12 Modely transportních systémů •Umělé kanálky a mobilní přenašeče (ionofory), oPřenos iontů je zprostředkován sloučeninami schopnými jejich vazby a transportu v membráně – typ mobilního přenašeče • • • • • • • •2,4-dinitrofenol – přenos H+, působí jako rozpojovač (viz oxidační fosforylace) 2/8/2013 Footer Text 13 Modely transportních systémů •Valinomycin • • • • • • Komplex s K+ a volný • •Depsipeptid (smíšený ester-amid) valinomycin – přenos K+ •D- a L-valin, D-hydroxyvalerát a L-laktát 2/8/2013 Footer Text 14 Modely transportních systémů • • • • • • • • •VALINOMYCIN – K+ ovnitřní kavita molekuly valinomycinu odpovídá iontovému poloměru K+ oPodobnými vlastnostmi se vyznačují i tzv. „crown-etery“, kde velikost dutiny lze měnit počtem stavebních jednotek, cyklodextriny aj. • 2/8/2013 Footer Text 15 Modely transportních systémů •Gramicidin – peptid – kanál přes membránu • •Struktura gramicidinu •Netvoří α-helix (obsahuje D- i L-aminokyseliny) •Helix o 6,3 AK zbytcích •připomíná β-skládaný list •označovaný jako β-helix •2 řetězce pro překlenutí membrány • uvedená spirála není helix •Podobné kanálky v membráně •tvoří bílkovina mellitin •obsažená ve včelím jedu. 2/8/2013 Footer Text 16 Energetika transportu •Pasivní transport - proti gradientu - energie vlastního potenciálu látky – difuse (Fick) •Aktivní transport - po gradientu - energie dodávána zvenčí -primární - spřaženou chemickou reakcí (ATPasa, oxidoredukce) -sekundární - spřaženým exergonickým transportem jiné látky • •Chemický potenciál • m = RT.ln c + m0 Dm = RT . ln (c2/c1) pro přenos 1 molu • •Elektrický potenciál – ionty • DY = (RT/nF) . ln (c2/c1) - pro daný ion • •Elektrochemický potenciál – srov. pms • DG = RT . ln (c2/c1) + nF.DY - pro všechny ionty • 2/8/2013 Footer Text 17 Energetika transportu •AKTIVNÍ TRANSPORT - PRIMÁRNÍ A SEKUNDÁRNÍ • • • • • • • • • •Na+,K+-ATPáza a přenašeč glukozy symportem s Na+ • 2/8/2013 Footer Text 18 Energetika transportu • • • • • • • • • • • •Příklad energetických poměrů na membráně při transportu Na+ a K+ poháněného ATP. Výpočte lze zjistit vztah mezi velikostí membránového potenciálu a potřebnou energií pro transport. • 2/8/2013 Footer Text 19 Způsoby transportu •Uniport ojen u pasivního nebo primárního •Kotransport osoučasný transport - vždy u sekundárního, může být i u primárního osymport a antiport •Neelektrogenní a elektrogenní transport • • 2/8/2013 Footer Text 20 Typy přenosu • • • • • • • • • • • •Přehled a srovnání různých typů a způsobů 2/8/2013 Footer Text 21 Souhrnný přehled 2/8/2013 Petr Zbořil 22 Fúze membrán •FÚZE MEMBRÁN oSplynutí bimolekulárních fosfolipidových vrstev – překážka – odpor hydratace, náboje apod. oFúzogenní faktory – Ca2+, bílkoviny (klatrin) – kaskády reakcí – nakonec fúze – viz synapse oumělé – polyetylenglykol (odnímání vody) omodel – fúze ok tuku na hladině • • • • 2/8/2013 Petr Zbořil 23 Fúze membrán • • • • • • • • • •Schema exo- a endocytozy • • • • • 2/8/2013 Petr Zbořil 24 Fúze membrán • •Transport •membránových •veziklů • • • 2/8/2013 Petr Zbořil 25 Významné transportní systémy •Na-K ATPasa oNaK pumpa oGeneruje membránový opotenciál oPostupné kroky oKonformační změny 2/8/2013 Footer Text 26 Významné transportní systémy • • • • • • • • • •Využití gradientu iontů pro sekundární transport oNaK pumpa a symport Na-Glc 2/8/2013 Footer Text 27 Významné transportní systémy • • • • • • • • • • •Energetika symportu Na-Glc 2/8/2013 Footer Text 28 Významné transportní systémy • • • • • • • • • • •Usnadněná difuse Glc, vliv insulinu 2/8/2013 Footer Text 29 Významné transportní systémy • • • • • • • • • • •Transport HCl do žaludku 2/8/2013 Footer Text 30 Mitochondriální transport • • • • • • • • •Výměna ATP-ADP oVelké množství dalších – di- a trikarboxyláty, AK, citrát – jinde • 2/8/2013 Petr Zbořil 31 Mitochondriální transport • • • • • • • • •Přenos citrátu oZdroj AcCoA 2/8/2013 Petr Zbořil 32 Oxidoredukční člunky •Problém oxidace cytosolického NADH oGlycerolfosfátový člunek oZtráta (FADH2 místo NADH) – rychlost oLétací svaly hmyzu 2/8/2013 Footer Text 33 Oxidoredukční člunky •Malát-Aspartátový člunek • • • • • • • • • 2/8/2013 Footer Text 34 2/8/2013 Footer Text 35