Environmentální analytická chemie Analytická chemie životního prostředí Laboratorní cvičení 2013 1.Stanovení polycyklických aromatických uhlovodíků ve vzorku ovzduší metodou GC-MS 1.A Odběr vzorku ovzduší na polyurethanový filtr pasivního vzorkovače 1.B Extrakce exponovaného filtru extrakcí na automatickém extraktoru 1.C Čištění a frakcionace extraktu kolonovou chromatografií pro stanovení PAHs pomocí GC-MS Úloha č.1.A: Demonstrace odběru vzorku ovzduší na polyurethanový filtr pasivního vzorkovače Pomůcky: • Pasivní vzorkovač • Předčištěný polyuretanový filtr ( 8h aceton, 8h dichlormethan), zabalený ve dvou vrstvách alobalu • Laboratorní rukavice • Alobal, PE sáček (zip lock) • Odběrový protokol Postup práce: • Uchopte středovou tyč pasivního vzorkovače za zavěšovací hák • Navlečte dvě bezpečnostní matky, které zakotvují horní část vzorkovače • Navlečte podložku a svrchní část vzorkovače ( nerezová polokoule o průměru 30 cm) • Následuje podložka matička a delší nerezová trubička • Nyní je možné umístit na středovou tyč předčištěný polyuretanový filtr s vloženým nerezovým středem • Pokračujte s navlékáním v pořadí podložka, kratší nerezová trubička, matička, podložka, menší nerezová polokoule, podložka a dvě bezpečnostní matičky • Jako poslední zahákněte do otvoru na středové tyči bezpečnostní háček • Standardní doba expozice takto sestaveného pasivního vzorkovače je 28 dní Úloha č. 1.B Extrakce exponovaného filtru automatickou extrakcí na automatickém extraktoru Pomůcky: • Automatický extraktor Buchi, baňka s varnými kamínky, extrakční patrona • Vialka na vzorek o objemu 22 ml, víčka • Automatická pipeta a Pasteurova pipeta • Skleněná trubička Chemikálie: • Extrakční rozpouštědlo – dichlormethan (DCM) • recovery standard D-PAHs (4,0 μg/ml) Postup práce: • do tří čtvrtin varné baňky nalijte extrakční rozpouštědlo (DCM) a přidejte 3-4 varné kamínky • vyjměte exponovaný polyurethanový (PUF) filtr z alobalu do extrakční patrony vložte skleněnou trubičku • pak vložte filtr a naspikujte 50 μl D-PAHs/vzorek v patroně a umístěte do těla automatického extraktoru • sestavte extraktor, otevřete proud chladící vody a zapněte extraktor programem pro extrakci dichlormethanem - č.1 : horká extrakce 40 minut, vyplachování 20 minut) • po skončení programu vyjměte patronu s filtrem a extrakt odpařte na objem cca 5 ml programem č. 2 • pomocí Pasteurovy pipety převeďte zahuštěný extrakt do předem označené vialky (baňku několikrát vypláchněte malými dávkami dichlormethanu) • objem roztoku odpařte pod mírným proudem dusíku na objem asi 1 ml • vialku dobře uzavřete a uložte do lednice do dalšího zpracování Úloha č. 1.C Čištění a frakcionace extraktu kolonovou chromatografií Pomůcky: • Skleněná kolonka • Vialka na jímání eluátu o objemu 20 ml • Vialka pro automatický dávkovač kapalinového chromatografu o objemu 2 ml • Pasteurova pipeta, vyčištěná vata Chemikálie: • Aktivovaný silikagel (12h při 150°C) • Dichlormethan, hexan • vnitřní standard terfenyl (4,0 μg/ml) Postup práce: • připravte kolonku k separaci: o na dno kolonky vložte smotek vaty o nad něj nasypte 10 cm vysoký sloupec aktivovaného silikagelu a tyčinkou mírně sklepejte o na vrchol sloupce naneste pasteurovou pipetou vzorek • proveďte zvlhčení kolony 15 ml hexanu a poté eluci 20 ml dichlormethanu (frakce obsahující PAHs) • eluát odpařte pod mírným proudem dusiku na 1 ml • roztok převeďte do předem označené vialky pro automatický dávkovač GC-MS • přidejte vnitřní standart terfenyl • vialku pečlivě uzavřete a uschovejte v lednici až do provedení analýzy