Cvičení z obecné mikrobiologie
Eukaryota, prokaryota, viry
• Patogeni
• Epidemie (mor,
chřipka,..)
• Nemocniční
mikroflóra
• Probiotika
• Přirozená mikroflóra
• Symbiotické
mikroorganizmy
• Technologie
Výroba piva
• Schéma výroby přírodních vín
• Schéma výroby šumivých vín
• Genové inženýrství – inzulin, ATB
• E. coli – přirozená mikroflóra x patogenní kmeny
• Quorum sensing, biofilm, sociální chování MO
• Technologie – pivo, víno, destiláty, SCP, pečivo, kyseliny,
odpadní vody, bioremediace
• Komposty, degradace materiálu, bioplynové stanice
• Koloběh prvků (de- a sulfurikace, fixace dusíku,…)
• Symbióza – člověk, rostliny, zvířata
(trávicí trakt, dodávání živin,…)
• Patogeni
(epidemie, ATB, léčba, prevence, infekční dávky, očkování,…)
• Atd.
CCM (Česká sbírka
mikroorganizmů)
• CCM je specializované vědecko-servisní pracoviště Ústavu
experimentální biologie PřF MU
• uchovává kultury MO pro potřeby základního a aplikovaného
výzkumu, průmyslové využití, biotechnologii a výuku. Mnoho
kultur dále slouží jako referenční vzorky pro klinické laboratoře
humánního a veterinárního zaměření
• více než 3 200 kmenů bakterií (asi 1 400 druhů)
• 800 kmenů vláknitých hub (přibližně 550 druhů)
• specializovaná sbírka vodních hyfomycetů - asi 500 kmenů (60
rodů se 130 druhy)
• od roku 2011 i sbírka stafylokokových bakteriofágů a jejich
hostitelských kmenů
• Katalog kultur X vlastní izoláty
• Označení kmenů – latinské jméno kurzívou!!!
Bezpečnost práce
• Příchod a odchod z laboratoře
• MYTÍ RUKOU, DEZINFEKCE PLOCHY!!!!
• Kahany pouze pokud jsou používány a jste v místnosti
• Nasahat na kultury do misky,
• Na stole 3 nádobky – dezinfekce, kelímek na špičky, kelímek
na sirky
• Lékárnička, hasicí přístroj, hasicí deka
• Laboratorní sklo a pomůcky (misky, kličky, sklo x umělá
hmota)
• KONTAMINACE (sebe i kultur) – snažit se jí předcházet!!!
Zásady bezpečné práce v mikrobiologické laboratoři
1. Vstup do laboratoře je povolen pouze osobám vykonávajícím cvičení.
2. V laboratoři vykonávejte pouze práci stanovenou obsahem cvičení.
3. V laboratoři je zakázáno jíst, pít a kouřit.
4. V laboratoři je nutné používat laboratorní plášť a přezůvky.
5. V laboratoři je zakázáno otevírat okna. Větrání je zajištěno pomocí přísavného
větracího zařízení.
6. Před příchodem do laboratorního cvičení se seznamte s jeho obsahem.
7. Před započetím a po ukončení práce je třeba desinfikovat pracovní plochu (Incidur).
8. Na pracovní plochu pokládejte co nejméně osobních věcí. Na pracovní ploše může
snadno dojít k jejich kontaminaci. Oblečení, batohy a tašky odkládejte v šatně.
9. Pracujte pečlivě a opatrně. Zabráníte tím kontaminaci materiálu a náhodnému
potřísnění pracovní plochy a sebe bakteriálními kulturami.
10. Nedotýkejte se zbytečně rukama obličeje, nenanášejte v laboratoři kosmetiku,
nemanipulujte s kontaktními čočkami.
11. Při barvení mikroorganismů používejte jednorázové ochranné rukavice a pracujte
v digestoři. Při fixaci preparátů používejte ochranné brýle. Ochranné rukavice není
nutné používat při manipulaci s mikroorganismy, pokud se však budete cítit
bezpečněji, použijte je. Výjimkou je příprava nativního preparátu pro mikroskopii,
v tomto případě určitě použijte rukavice.
12. Lihové kahany nechávejte hořet pouze po dobu, kdy je užíváte.
13. Použité sklo a zbytky bakteriálních kultur odkládejte na určená místa. V žádném
případě nevylévejte kultury do odpadu! Veškerý kontaminovaný materiál je před
likvidací a mytím nutno desinfikovat nebo sterilizovat (týká se i rozbitého skla),
případně vyhodit do koše na nebezpečný odpad (např. buničitá vata použitá
k likvidaci rozlité kultury).
14. Dojde-li k náhodnému potřísnění pokožky bakteriální kulturou či poranění pokožky,
oznamte tuto skutečnost ihned školiteli. Pokožku je nutno ošetřit vhodným
desinfekčním prostředkem (ajatin, Spitaderm), aby nedošlo k infekci.
15. Stejné zásady jako v bodě 14 platí i v případě znečištění pracovní plochy nebo
pracovního oděvu.
16. V případě jakékoli nejistoty se informujte o správném postupu u svého školitele.
17. Označte všechna média a kultury ve zkumavkách, baňkách a Petriho miskách
názvem
média a kultury, svým jménem a pracovní skupinou. Misky popisujte na dno!
K označení používejte fixy na sklo.
18. Všechny pracovní postupy, obzvláště pak použité bakteriální kultury, množství
pipetovaných roztoků a postupy při ředění si pečlivě zaznamenávejte.
19. Po ukončení práce odneste použité pomůcky na určené místo, ukliďte pracovní
plochu a vydesinfikujte ji desinfekčním roztokem (Incidur ve spreji).
20. Před odchodem ze cvičení si dobře umyjte ruce a vydesinfikujte desinfekčním
prostředkem (Spitaderm). V případě, že potřebujete krátkou přestávku v průběhu
cvičení, umyjte a vydesinfikujte si ruce před opuštěním laboratoře.
21. Práce v mikrobiologické laboratoři je zakázána těhotným ženám a matkám do
konce 9. měsíce po porodu. Posluchačka je povinna vedoucímu cvičení oznámit
graviditu.
22. Připojování přístrojů do elektrické sítě je nutno provádět pod dohledem asistenta.
Provádění jakýchkoliv změn na elektrickém zařízení není dovoleno. Opravovat
elektrické instalace smějí jen osoby tím zvláště pověřené, s příslušnou kvalifikací.
Závady v instalaci (voda, plyn, elektřina) ihned hlaste.
Protokoly:
tisknout doma, vyplňovat v průběhu cvičení
odevzdávat průběžně!!!
kmeny MO (jméno kurzívou a CCM číslo, př. E. coli
CCM50)
Závěr = stručné shrnutí, úvaha nad výsledky pokusu
Docházka – 1 povolená absence s omluvenkou
(vypracovat protokol – jen teorii)
Zápočet – docházka, protokoly, 2 testy (75% správných
odpovědí)
zápočtový preparát
Sebou vždy PLÁŠŤ, PŘEZŮVKY, FIX NA SKLO!!!
Sylabus
Kontakt
• Mgr. Andrea Vávrová 72440@mail.muni.cz
• Ing. Martin Krsek, CSc. krsek@mail.muni.cz
• Mgr. Jana Kopecká 223187@mail.muni.cz
• Mgr. Petra Straková 323786@mail.muni.cz
• Mgr. Lukáš Chrást chr@mail.muni.cz