DNA marker 155‐970 coloured 
(katalogové číslo C109, C111) 
 
Popis 
Odhad velikostí DNA fragmentů generovaných v PCR (PCR fragmentů) je obvykle založen na srovnání elektroforetické 
pohyblivosti  těchto  fragmentů  s  fragmenty  DNA  o  známé  velikosti  (DNA  markerů).  PCR  fragmenty  jsou  obvykle  v 
rozmezí  200  ‐  900  párů  bazí.  Tuto  oblast  pokrývají  fragmenty  DNA,  které  jsou  součástí  DNA  markeru  155‐970 
coloured.  Tyto  fragmenty  vznikly  působením  restrikčního  enzymu  na  referenční    plasmid.  Tento  marker  navíc 
obsahuje  tři  barvičky  [bromofenolovou  modř,  xylen  cyanol  a  inertní  barvivo  (Purple)].  Zvýšená  hustota  tohoto 
markeru umožňuje jeho vkládání přímo do jamek gelu (bez nutnosti jeho smíchání s vkládacím pufrem). Tento marker 
je zvláště vhodný v kombinaci s PCR produkty generovaných pomocí Taq‐Purple DNA polymerázy (kat. č. T107‐T109). 
 
Technické údaje 
Koncentrace 
• 1 µg DNA/12 µl pufru (5 mM Tris‐HCl, 5 mM MgCl2,, 0,5 mM dithiothreitol, 50 mM NaCl a 50 mM EDTA). 
Kontrola kvality 
• přítomnost odpovídajících fragmentů je kontrolována elektroforézou v agarózovém gelu. Pouze fragmenty 
uvedené v obr. jsou pozorovány.  Poměr A260/A280 je v rozmezí 1, 8 ‐ 2,0. 
Balení 
• 1 zkumavka, obsahující 25 µg restrikčních fragmentů ve 300 µl pufru. Jedno balení umožní přípravu 30 analýz.   
Skladování 
• při teplotě ‐20 ± 5o
C. Materiál snáší opakované rozmrazování. 
 
Protokol  
Doporučený protokol pro určování velikosti PCR produktů 
10 µl DNA markeru 155‐970 col. se nanáší přímo do jamek v gelu připraveném z 1,2% PCR agarózy (Kat. č. P 045) 
Do vedlejších jamek nanášet vzorky připravené smícháním: 
• 10 µl produktu PCR, 
• 2 µl PCR vkládacího pufru. 
Provést elektroforézu a odhadnout velikost PCR produktu na základě srovnání jeho pohyblivosti s DNA markerem. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Obr. 1. Elektroforetická separace DNA markeru 155‐970 col. 
10  µl  DNA  markeru  bylo  separováno  v  1,2%  agarózovém  gelu,  který  obsahoval 
ethidium  bromid  (1  µg/ml)  a  1x  TBE  pufr.  Čísla  vyjadřují  počty  párů  bazí 
v odpovídajících DNA fragmentech. 
 
 
 
 
 
Kat. č.    Název výrobku a specifikace  Množství 
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 
C 109    DNA marker 155‐970 col.    25 µg/300 µl 
C 111    DNA marker 155‐970 col.    5x 25 µg/300 µl