BIOINFORMATIKA V PRAXI – CVIČENÍ 8 PREDIKCE VLASTNOSTÍ PROTEINŮ Další vlastnosti proteinů PREDIKCE LOKALIZACE PROTEINU V BUŇCE Predikce lokalizace proteinu v buňce může být cenným nástrojem pro určení FUNKCE proteinu. Z výskytu proteinů v buňce (cytoplasmatické, membránové, extracelulární, v buněčné stěně...) můžeme například u patogenních mikroorganismů odhadnout, zda se jedná o protein důležitý pro virulenci. ÚKOL 1 Pomocí programu PSORT (http://www.psort.org/) určete lokalizaci následujícího proteinu v buňce: Protein z bakterie Micrococcus luteus MEINGLTWGLTIALIVGLLAFDYFAHVRKAHTPTIKEAAVWSGVYVGLALVFGLVFFAFGDTQHAVEYYTGYLLEKALSVDNLFVFLVIMASFRVPREY QQKVLLFGITFALISRTLFILLGAAVIAAWSDVFYLFGLFLLIIAGGQLKGEMSGDAEGAQDEADNVMVRLVKRFLPASDQFDGERLFTTVDGKRLMTP MLLVMIAIGATDILFAFDSIPAIFGVTQEAYIVFTATAFSLMGLRQLYFLIDGLLDRLVYLAYGLSALLAFIGVKLILHALHENNLPFINGGENVPVAE IPTNLSLVVVVVILAITVLVSLYSPKGQALRALQNAEKYSYRYSKLAEDADPAERERAAALMDRWTARAEALDQRWRDQLLEHKDAWSAIIRTAHETRF ADPRDDDARGVSEQIVRQDGPTV ÚKOL 2 Pomocí programu PSORT určete lokalizaci následujícího proteinu v buňce: Protein z Aspergillus fumigatus MKPQTAAFLLSLLGSTLAAPIQHADKGSDVKPTPTGRGAPGGFFTGFPSGVPSGLPSGFPGGPVPGGFGGDGPNGPIPSGPVPTGAAPSGFPSFGTGPA PSGAPQGEEGSSSFGGQGVQARSPQDFEDSGAAPSGAIPSGAIPTGAVPSGAPNGFGGFGQGGHGGPGGPGEEGSGPSPTGAVPSGAIPSGAAPSGAVG GFDGFGQASENSGNAQFQSSGTSPFGASHSGSASGHQGGRHGGDHRGQHGNGSGAIPSGAAPSGAAPSGAAGGFPGFGQGGEGSGPSPTGAVPSGAAGF GGQGHGQGQGSFPTGVAPSDVPSAQPTA ÚKOL 3 Určete lokalizaci proteinu z Aspergillus fumigatus v buňce rovněž pomocí TargetP (http://www.cbs.dtu.dk/services/TargetP/). Výsledky porovnejte. SEKUNDÁRNÍ DATABÁZE PROTEINŮ Sekundární databáze obsahují informace odvozené z primárních databází ve formě charakteristických vzorů sekvencí, tj. funkčních nebo strukturních motivů získaných srovnáním primárních dat (sekvencí). Sekundární databáze jsou vhodné pro vyhledávání „vzoru“ charakteristického pro určitou skupinu proteinů, tj. pro určení funkce proteinů. Sekundární databáze proteinů (PROSITE, Pfam, PRINTS, ProDom, SMART, TIGRFAMS) jsou v současné době sdruženy do integrované klasifikační databáze proteinů InterPro. ÚKOL 4 Jeden z předcházejících proteinů analyzujte pomocí databáze InterPro (http://www.ebi.ac.uk/interpro/). Jaké domény/motivy protein obsahuje a jaká je předpokládaná funkce proteinu? Popište. PREDIKCE SEKUNDÁRNÍ STRUKTURY PROTEINU ÚKOL 5 Určete, zda následující protein obsahuje transmembránové helixy. Využijte nástroj TMHMM (http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM-2.0/). MEINGLTWGLTIALIVGLLAFDYFAHVRKAHTPTIKEAAVWSGVYVGLALVFGLVFFAFGDTQHAVEYYTGYLLEKALSVDNLFVFLVIMASFRVPREY QQKVLLFGITFALISRTLFILLGAAVIAAWSDVFYLFGLFLLIIAGGQLKGEMSGDAEGAQDEADNVMVRLVKRFLPASDQFDGERLFTTVDGKRLMTP MLLVMIAIGATDILFAFDSIPAIFGVTQEAYIVFTATAFSLMGLRQLYFLIDGLLDRLVYLAYGLSALLAFIGVKLILHALHENNLPFINGGENVPVAE IPTNLSLVVVVVILAITVLVSLYSPKGQALRALQNAEKYSYRYSKLAEDADPAERERAAALMDRWTARAEALDQRWRDQLLEHKDAWSAIIRTAHETRF ADPRDDDARGVSEQIVRQDGPTV ÚKOL 6 Predikujte sekundární strukturu následujícího proteinu. Využijte libovolné dva programy, které najdete na http://www.expasy.org/. Výsledky porovnejte a komentujte. ADSQTSSNRAGEFSIPPNTDFRAIFFANAAEQQHIKLFIGDSQEPAAYHKLTTRDGPREATLNSGNGKIRFEVSVNGKPSATDARLAPINGKKSDGSPF TVNFGIVVSEDGHDSDYNDGIVVLQWPIG PREDIKCE terciární STRUKTURY PROTEINU The result is only a model and must be considered carefully, it isn’t an experimental 3D structure! (citace z dokumentace k programu Geno3d) This server is experimental. Some of the methods used are untested and/or unpublished. Use the server and its results at your own risk. For more information, contact the authors. (citace z dokumentace k programu HMMSTR/Rosetta) Evaluation of template structure and model quality is a crucial step in homology modelling. (citace z dokumentace k programu SWISS-MODEL). SAMOSTATNÝ PROJEKT Predikujte lokalizaci svého proteinu v buňce, dále analyzujte svůj protein pomocí databáze InterPro, určete jeho možnou funkci a predikujte jeho sekundární strukturu.