DOMÁCÍ ÚKOL B3

Chemické výpočty, ředicí řady, plánování experimentu


Cíl úkolu 1: Cílem úkolu je samostatně naplánovat experimenty dle návodů k jednotlivým laboratorním
úlohám (str. 20, 25 a 30) a s užitím informací o vámi vylosované látce v souboru
Biotesty_cv_latky.xlsx.

To znamená vypočítat potřebné navážky testované látky (znáte molární koncentraci zásobního
roztoku), potřebné objemy jednotlivých koncentrací testované látky, media, naplánovat použití
rozpouštědla a postup ředění.

Úkol má posílit schopnost studentů samostatně plánovat experiment a správně provést všechny
přípravné kroky včetně základních chemických výpočtů.


Vypracovat do: Všechny vypracované výpočty buď v MS Excel (doporučeno) nebo MS Word do ČT 26.3.2015
na zuzana.tousova@seznam.cz; pokud preferujete práci s tužkou a papírem, pošlete mi prosím
nascanované obrázky vašich výpočtů a nákresů nebo přineste papíry osobně do kanceláře 332 (v
případě ruční práce piště prosím čitelně a přehledně, díky)


Skupiny:       úkol se odevzdává za dvojici


Přesné zadání úkolu:

1.       Pečlivě si prostudujte STUDIJNÍ MATERIÁL 3 s návody k laboratorním úlohám a přiloženou
tabulku s informacemi o vaší látce (Biotesty_cv_latky.xlsx)


2.       Všechny biotesty budete provádět v 5-ti bodových koncentračních řadách s ředicím faktorem
(DF) 2 nebo 5. Koncentrační rozsah určený k testování včetně všech 5 koncentračních bodů ke každé
látce a organismu je uveden v tabulce v řádcích 21, 22 a 23.


3.       Vaším úkolem je dle manuálu a tabulky k jednotlivým laboratorním úlohám vypočítat
následující:


·         Ze známé molární koncentrace zásobního roztoku vaší látky (řádek 19, zeleně v tabulce):


Vypočítejte:

A.      Potřebnou navážku látky na 1 mL tohoto zásobního roztoku

B.      Jaký celkový objem zásobního roztoku o dané koncentraci budete potřebovat na pokrytí potřeb
všech experimentů s předepsanými koncentračními rozsahy? Počítejte s nejakou rezervou


Odpovězte:

C.      Jaké zvolíte rozpouštědlo a proč?


·         Příprava médií

D.     Vypočítejte celkové objemy médií potřebné pro jednotlivé testy


·         Příprava ředicích řad

E.      Naplánujte si, jak budete látku ředit v jednotlivých testech  - vypočítejte přípravu
případných meziředění zásobního roztoku, objem přídavku zásobního roztoku, objem přenášený z vyšší
koncentrace do nižší při postupném ředění v médiu, přídavek rozpouštědla (pokud je nutný)


Vždy je potřeba připravit o něco VĚTŠÍ OBJEM PRO REZERVU!!!


·         Kontroly

F.       Definujte, jaké kontrolní varianty jsou pro jednotlivé testy potřeba, vypočítejte přídavek
rozpouštědla do rozpouštědlové kontroly (pokud je nutný)

G.      Definujte, jaké blanky (slepé varianty) jsou v jednotlivých testech potřeba (pokud jsou
nutné)


Vytvořte vždy přehledný plán experimentu pro každý biotest - řasy, dafnie a bakterie = celkem 3
(ideálně každý na 1 listu v excelu). Každý tento plán by měl obsahovat body D-E-F-G.

Body A,B,C  týkající se přípravy zásobního roztoku by měly být shodné pro všechny 3 biotesty –
stačí uvést pouze jednou. Uveďte cokoli dalšího důležitého vás napadne – správných možností je
opravdu mnoho.


Při vašich úvahách se vždy snažte experimenty plánovat tak, abyste co nejméně plýtvali materiálem a
chemikáliemi a vytvářeli co nejméně odpadu. Je důležité uvažovat:

·         jaký minimální objem jsme schopni napipetovat = 2 uL

·         jaké minimální množství jsme schopni navážit  = 5 mg

·         kolik zásobního roztoku budeme celkem potřebovat

·         jaký maximální obsah rozpouštědla můžeme vnést do experimentálního systému, aby
nedocházelo k významným negativním účinkům = max 0.5% (v/v)

·         nezapomeňte zvážit rozpustnost látky ve vodě – v případě špatné rozpustnosti ve vodě,
použijte jako rozpouštědlo methanol (o adekvátní čistotě)

·         některé testy mají složitý postup a dochází k sérii naředění vzorku – pro výpočet
správného postupu ředění je dobré v těchto případech postupovat pozpátku