Antibakteriální aktivita hmyzí hemolymfy


1.      Stručný úvod – antibakteriální agens hmyzu + (bioluminiscenční) bakterie.


2.      Zónová difúze v agarózovém gelu – nalití předem připravených 1,25% agarózových gelů
obsahujících kulturu bakterií Escherichia coli (gram negativní) a Micrococcus luteus (gram
pozitivní), vysekání jamek po zatuhnutí gelu a napipetování vzorků + příprava a pipetování
kalibračních roztoků lysozymu. Inkubace ve vlhké komůrce při laboratorní teplotě. Fotodokumentace
vzorků následující den.


3.      Bioluminiscenční stanovení antimikrobiální aktivity hemolymfy bource morušového (Bombyx
mori) pomocí bioluminiscenčních bakterií E. coli K12, stanovení koncentrační závislosti (0,5 – 40 %
hemolymfa) baktericidních účinků hemolymfy pomocí luminometru Hidex Chameleon, vyhodnocení
bioluminiscenčního měření. Diskuse o inducibilitě antimikrobiálních peptidů hemolymfy, ukázka
starších měření.


4.      Na starších výsledkcích ukázka povrzení bioluminiscenčního měření (viability jednotlivých
bakterií) metodou platingu na agarové misky .


5.      Diskuse stanovení antimikrobiálních účinků hemolymfy pomocí turbidimetrických metod a
jejich srovnání se zónovou difúzí.