Téma: Mikroskopický preparát

Cíl praktického cvičení:



K čemu slouží preparát nativní, co lze pozorovat a jakou mikroskopickou technikou? Jakou má
nevýhodu?




Jakou mikroskopickou technikou většinou pozorujeme preparáty barvené? Pozorujeme živé buňky? Jaké
znáte příklady mikrobiologických barvených preparátů a k čemu slouží preparát barvený podle Grama?





K čemu slouží barvené preparáty obecně?



Načrtněte průřez membránami/buněčnou stěnou grampozitivní a gramnegativní buňky a vyznačte rozdíl:






Jakou buněčnou strukturu barvíme Gramovým barvením? Jaké barvivo z postupu Gramova barvení obarví
buňky gram-negativní? Jaká složka zafixuje krystalovou violeť v hydrofobní vrstvě buněčné stěny u
buněk gram-pozitivních?




Proč se nátěr buněk u většiny barvených preparátů fixuje?



Co je to „celkové zvětšení“ mikroskopu a při jakém celkovém zvětšení pozorujeme námi připravené
preparáty?


Které typy bakterií jsou Gramovým barvením nebarvitelné? Znáte nějaké konkrétní příklady?



Co ovlivňuje kvalitu preparátu připraveného Gramovým barvením, tzn.  jaké jsou nejčastější chyby
při jeho přípravě?



Pomůcky pro přípravu preparátu nativního a preparátu barveného podle Grama:

Organismy:

Pomůcky:



Napište princip přípravy preparátu nativního a způsob pozorování (zvětšení; imerze; typ
mikroskopické techniky):







Uveďte princip Gramova barvení a způsob pozorování tohoto preparátu (zvětšení; imerze; typ
mikroskopické techniky):








Jaký typ buněčné stěny mají Vámi barvené bakteriální kmeny?




Vyhodnocení:

Jak byl výsledek barvení dle Grama v preparátu s jedním kmenem a v preparátu směsi buněk G+ a G-?







Vyplňte následující tabulku dle správných výsledků Gramova
barvení:

                                         Bakteriální kmen

                                     Typ buněčné stěny (G+/G-)

                                      Tvar jednotlivých buněk

                      Charakteristické shluky (ano/ne), případně uveďte jaké

                                     Escherichia coli CCM 3954





                                        Pseudomonas putida

                                               nebo

                                      Pseudomonas fluorescens





                                    Serratia marcescens CCM 303





                                       Kocuria rosea CCM 839





                                    Micrococcus luteus CCM 168





                                     Bacillus cereus CCM 2010





                                   Staphylococcus aureus SA 812





                                     Saccharomyces cerevisiae






Závěr: