Téma: Plotnová metoda – Nepřímé stanovení počtu buněk

Cíl praktického cvičení:




V čem se liší stanovení počtu buněk plotnovou metodou od stanovení přímého?



V čem spočívá nepřesnost stanovení počtu buněk stanovením hodnoty zákalu? (spektrofotometrickým
měřením)


Podle čeho určíme vhodný typ media pro provedení plotnové metody?



Co je to CFU/ml? Zahrnuje tento údaj i buňky mrtvé?


K čemu při plotnové metodě slouží řada zkumavek se sterilním ředícím roztokem? Podle čeho se
stanovuje počet zkumavek této řady?




Liší se provedení plotnové metody u kultury čisté a smíšené?



Stanovujeme-li CFU/ml v pravidelných intervalech u rostoucí kultury, co touto opakovanou plotnovou
metodou získáme?



Pomůcky:

Bakteriální kmen:

Pomůcky:





Princip plotnové metody:

a) kontrola sterility ředícího roztoku:




b) odvození počtu zkumavek ředící řady:




c) ředění vzorku:





d) pipetování určitého objemu (??) kterých ředění (??) na Petriho misky se sterilním mediem.
K čemu slouží hokejka?





Při jaké teplotě budeme misky plotnové metody kultivovat?



Vyhodnocení – dne: __________________

a) sterilita ředícího roztoku


b)

Vhodné ředění???


Misky

                Miska 1

                       Miska 2

Počet kolonií



Průměr:



Závěr – posouzení kontaminace ředícího roztoku, misek, správnost roztěru vzorků, počitatelnost...