Výsledky cvičení: Stanovení osmotického a vodního potenciálu rostlin-2017 Graf-Hraniční plazmolýza- průměr za všechny skupiny HRANIČNÍ PLAZMOLÝZA Allium cepa=cibule kuchyňská molární koncentrace (mol l-1) Allium cepa Egeria densa molární koncentrace (mol l-1) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 Teplota v učebně: 0 0 0 opakování % plazmolyzovaných buněk 0.1 0 4 1 0 0 0 0 0 4 96 100 100 ST12 26.9 teplota °C 0.2 1 10 2 0 1 1 0 2 1 95 81 100 ŠZ 27 °C teplota 0.3 0 30 3 20 40 50 60 CT8 26 teplota °C 0.4 7 69 4 0 0 4 0 0 0 69 100 CT10 26 teplota °C 0.5 16 80 5 0 0 0 0 0 7 83 95 98 ČT12 26 teplota °C 0.6 77 86 6 0 0 2 14 100 100 PÁ 24.5 "teplota °C, pátek od 8hod" 0.7 88 92 7 0 0 0 0 4 10 48 100 100 PÁ 25.1 pátek 10 0.8 99 100 8 0 0 0 0 18 49 90 96 100 PÁ 25.2 pátek12 9 0 0 0 1 15 61 88 97 PÁ 10 85 100 PÁ Průměr 0 0 1 0 7 16 77 88 99 Egeria densa=douška hustolistá molární koncentrace (mol l-1) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 opakování % plazmolyzovaných buněk 1 0 0 0 0 54 88 91 95 100 ST12 2 0 1 0 12 98 100 100 100 100 ŠZ 27 °C teplota 3 0 45 55 60 80 89 CT8 26 teplota °C 4 0 0 18 38 90 89 92 97 100 CT10 26 teplota °C 5 0 0 5 48 88 97 100 89 ČT12 26 teplota °C 6 0 0 2 57 73 86 100 PÁ 7 0 21 37 52 58 74 82 96 100 PÁ 8 0 10 14 15 35 55 67 78 100 PÁ 9 0 0 13 33 82 85 78 91 100 PÁ 10 PÁ Průměr 0 4 10 30 69 80 86 92 100 Pozn. - Metoda hraniční plazmolýzy: zpracováváte všechna naměřená data ze všech skupin "Vytvořte XY graf (osa x - molární koncentrace inkubačního roztoku, osa y - naměřená data, tj. procenta plazmolyzovaných buněk.)" "V každém grafu typu ""dávka-odpověď"" (sigmoidní závislost, nikoli lineární!!!) odečtěte koncentraci osmotika, v níž by bylo plazmolyzovaných 50 % buněk." Takto získané hodnoty molární koncentrace sacharozy dosaďte do rovnice pro výpočet osmotického potenciálu; měření probíhalo při teplotě XX ºC. Vypočtenou hodnotu osmotického potenciálu obou rostlinných druhů vyjádřete v MPa. REFRAKTOMETRIE GRAF - Refraktometrie-ST12hod molární koncentrace sacharózy (mol l-1) Skupiny koncentrace kontrolní inkubační se ST 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0 1.5 1.8 hmotnostní koncentrace sacharózy (%) 0.1 5.4 7.9 Opakování 1: kalibrace (kontrola) 1.5 5.4 8.9 11.4 16.5 19.3 22.9 25.5 32 ST12h 0.2 8.9 8.9 + Solanum tuberosum 1.8 7.9 8.9 11.5 14.2 17.1 19.7 22.9 25.4 ST12h 0.3 11.4 11.5 Opakování 2: kalibrace (kontrola) "ČT12h, Pá 8hod-chybná data, použít data jiné skupiny" 0.4 16.5 14.2 + Solanum tuberosum "ČT12h, Pá 8hod-chybná data, použít data jiné skupiny" 0.5 19.3 17.1 0.6 22.9 19.7 REFRAKTOMETRIE 0.7 25.5 22.9 molární koncentrace sacharózy (mol l-1) 0.8 32 25.4 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 hmotnostní koncentrace sacharózy (%) Opakování 1: kalibrace (kontrola) 1.2 4 9.6 10.5 12.5 16.5 21.2 23.7 25.9 CT8hod + Solanum tuberosum 1.5 4.6 7.8 10.6 14.1 17 19.6 22.6 24.7 CT8hod Opakování 2: kalibrace (kontrola) 1 5 7.9 11.9 15.1 18 21.5 24.5 27.3 CT10hod + Solanum tuberosum 1.75 5.5 8.3 11.5 14.75 17.5 20.3 22.5 24.3 CT10hod REFRAKTOMETRIE molární koncentrace sacharózy (mol l-1) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 hmotnostní koncentrace sacharózy (%) Opakování 1: kalibrace (kontrola) 1.2 4.7 7.8 10.9 13.5 17.1 20.4 23.5 26.4 Pá12 + Solanum tuberosum 1.5 5.2 8.1 11.3 14.3 17.1 19.8 22.2 24.4 Pá12 Opakování 2: kalibrace (kontrola) 1.2 4 5.6 7 14 17 20.2 22.8 25.3 Pá10 + Solanum tuberosum 1.2 4.5 6.8 10 13.4 17 20 22.2 24.1 Pá10 Pozn. Refraktometrie - zpracováváte pouze data vaší skupiny!!!! "Vytvořte jeden XY graf pro obě měření (osa x - molární koncentrace inkubačního roztoku, osa y - procentická koncentrace inkubačního roztoku bez ( 1. řada) nebo s pletivem lilku bramboru (2. řada dat)." "Help: data přeskládejte (Kopírovat - Vložit jinak - hodnoty, transponovat) a graf vytvořte tak, jak ukazuje ilustrativní obrázek na následujícím listu (""ukázka grafu"")" "V grafu proložte a) naměřenými kalibračními hodnotami přímku neprocházející počátkem); b) vlastními měřeními polynom 2. stupně, nebo přímku. Z grafu odečtěte izotonickou koncentraci osmotika (průsečík přímky a křivky)." Takto získanou hodnotu dosaďte do rovnice pro výpočet osmotického potenciálu; měření probíhalo při teplotě 21 ºC. Vypočtenou hodnotu osmotického potenciálu vyjádřete v MPa. TLAKOVÁ METODA - STŘEDA 12 hodin "TLAKOVÁ METODA - ČTVRTEK 8-10hodin, 10-12 hodin, 12-14 hodin" "TLAKOVÁ METODA - Páteční skupiny 8-10, 10-12, 12-14 hod" Čerstvě odřízlé listy 10 min vadnoucí listy Čerstvě odřízlé listy 10 min vadnoucí listy Čerstvě odřízlé listy 10 min vadnoucí listy 1. list 2. list 1. list 2. list 1. list 2. list 1. list 2. list 1. list 2. list 1. list 2. list už v Mpa v bar v bar Skupina A - zalévaná 0.3 0.5 Skupina A - zalévaná "2,5bar" 6.2 bar 8.5 bar Skupina A - zalévaná 5 4 8 Skupina B 0.25 Skupina B 4bar 5.1 bar 6.1 bar Skupina B 5.9 2.5 8.9 Skupina C Skupina C 5bar 7bar Skupina C 5 4 Průměrné hodnoty Průměrné hodnoty Průměrné hodnoty Skupina A - nezalévaná 0.6 0.7 Skupina A - nezalévaná "4,5bar" 8bar 8.6 bar 9bar Skupina A - nezalévaná 8 7 Skupina B 0.5 Skupina B "7,2bar" 7.9bar Skupina B 9.3 7.5 9.5 Skupina C 0.6 Skupina C 7bar Skupina C 8 8 10 Průměrné hodnoty Průměrné hodnoty Průměrné hodnoty Převeďte získanou tlakovou hodnotu (v barech) na hodnotu vodního potenciálu (v MPa; pozor na znaménko!!!). Vypočtěte průměr z opakování pro listy muškátu s různým ovlivněním. Závěrečné shrnující úkoly: "1. Porovnejte Allium cepa, Egeria densa a Solanum tuberosum z hlediska hodnot jejich osmotického potenciálu." "2. Diskutujte, zda jste metodou hraniční plazmolýzy a metodou refraktometrickou měřili vodní potenciál rostlinných pletiv, nebo pouze osmotický potenciál - tedy jednu z komponent vodního potenciálu." "3. Do jaké výšky rostliny (pouze hypotetická situace) by samotný vámi zjištěný osmotický potenciál rostlinných pletiv byl schopen zabezpečit transport vody; jinými slovy, jakou výšku vodního sloupce by byl schopen vytlačit tlak rovný záporné hodnotě vámi stanoveného osmotického potenciálu? (Uveďte na příkladu jedné, vámi vybrané hodnoty osmotického potenciálu. Pozor na jednotky!)" Potřebujete znát vztahy mezi tlakovými jednotkami? Pak buď koukněte na web nebo klikněte přímo sem. Potřebujete znát vztah mezi tlakem a výškou vodního sloupce? Přečtěte si str. 6 ve skriptech! (nutná autentizace do IS) "1 bar = 0,1 Mpa"