výsledek HPLC: přepočítání na mikrogramy na ml na vzorek (vydělit extinkčním koeficientem) plocha peaků 51195 26764 42105 14872 21863 59040 v mikrogramech na g čerstvé váhy Médium Ozářenost vzorek neoxanthin violaxanthin lutein chl b chl a beta karoten neoxanthin violaxanthin lutein chl b chl a beta karoten neoxanthin violaxanthin lutein chl b chl a beta karoten 1 Malá 1 10272.06224 9097.36001 28818.99978 25556.03684 95521.4625 13966.78939 1 Malá 2 16706.56919 20555.1182 46948.85455 43422.81858 153967.146 16902.7631 1 Malá 3 15872.96364 15528.30921 44901.74675 43424.54846 157384.2586 17236.14412 1F Malá 4 6388.748685 6196.749088 11013.971 12349.13609 46727.6906 3848.036935 1F Malá 5 7207.468911 6670.881933 19393.8012 19811.18141 70856.3669 8058.164547 1F Malá 6 10518.16009 8810.163286 20213.67283 19194.6816 71624.23636 8637.381235 1 normální 7 28925.52852 26911.94996 78427.32246 76980.94485 252666.1605 39155.18182 1 normální 8 27955.92114 22404.90874 78031.42054 67710.82709 248533.0268 45268.36346 1 normální 9 35765.29071 35278.07262 95566.66837 88175.01872 313064.1637 54900.81049 1F normální 10 10666.23636 11371.36402 31487.54545 25839.17325 82383.11848 9280.528428 1F normální 11 10409.67787 11321.03589 28504.611 24666.2 84082.07397 9139.9091 Úkoly: "1. spočítejte obsah jednotlivých pigmentů měřených spektrofotometricky a na HPLC a vyjádřete v jednotkách mikrogramy na g čerstvé váhy, spočítejte poměr chl a ku chl b (chl a/chl b)" 2. udělejte průměry a spočítejte směrodatné odchylky (funkce SMODCH v excelu). Tabulku s průměry dejte do protokolu. "3. graficky (nejlépe sloupcovým grafem, včetně chybových úseček znázorňujících směrodatné odchylky) znázorněte rozdíly mezi stanovením pigmentů spektrofotometricky a pomocí HPLC" 4. v závěru zhodnoťte výsledek experimentu: vliv fytohormonů a srovnání dvou metod stanovení pigmentů Vysvětlivka k metodě HPLC: Extinkční koeficienty (zažlutěné buňky nad jednotlivými pigmenty) pro přepočítání ploch peaků na obsah jednotlivých pigmentů v mikrogramech byly získány z regresních rovnic standardních křivek (byly použity nejméně 2 koncentrace jednotlivých pigmentů a po analýze na HPLC byly vztaženy hodnoty koncentrace k plochám peaků) Poznámka k výpočtům: nezapomeňte do výpočtů zahrnout objem extraktu