Entomopatogenní hlístovky (EPN)
lživotní cyklus
třída:   Nematoda (Nematoda)
řád:     Háďata (Rhabditida)
čeleď: Steinernematidae (66 druhů)
           Heterorhabditidae (15 druhů)
•   symbiotické bakterie
•   kultivace
•   imunita hmyzu
•   využití
lživotní cyklus
•   symbiotické bakterie
•   kultivace
•   imunita hmyzu
•   využití

E:\Dizertačka\Fotky\fotky 260601\P6220072.JPG
dospělci
invazní L3 larvy




C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\Life cycle.jpg



•symbiotické bakterie hlístovky Heterorhabditis bacteriophora - Photorhabdus luminescens
• každý druh hlístovky má jinou symbiotickou bakterii
Symbiotické bakterie
C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\EPN - scan materiály Merelbeke\Epn4.jpg

Imunitní reakce - obrana hmyzího hostitele:
- komplex pasivních a aktivních složek imunitního systému
- zásadní otázkou je rozpoznání hlístovek a jejich symbiotických
  bakterií jako cizorodých látek
fyzikálně chemické obranné bariéry: (peritrofická membrána střeva, kutikula ...)
buněčné a humorální obranné mechanismy (pokud jsou spustěny):
             - buněčné:       prostá a melanická enkapsulace (ne fagocytóza,
                                      nodulace, koagulace)
                                      detoxifikace endotoxinů X. nematophila imunizovaným hmyzem
             - humorální: pouze melanizace (není účinná pokud se uvolní bakterie před
                                      vznikem kapsule)

EPN:
- v počátečním stádiu parasitismu EPN nenapadají imunitu hostitele,
  počkají, až hostitel opraví poškození vzniklé průchodem hlístovek
  a zničí kontaminující bakterie
- produkují proteiny ničící cecropiny a další antibakteriální proteiny,
  to umožní uvolnění a namnožení symbiotických bakterií
- entomotoxické produkty
Symbiotické bakterie:
- inhibují fenoloxidázovou kaskádu
- ničí hemocyty svými toxiny a liposacharidy
- uvolňují proteolytické enzymy, insekticidní toxiny
Reakce nematobakteriálního komplexu:

Kultivace hlístovek na náhradním hostiteli:
D:\Dokumenty\!Zpracovávám\Untitled-1.JPG D:\Dokumenty\!Zpracovávám\Untitled-2.JPG
D:\Dokumenty\!Zpracovávám\Untitled-3.JPG D:\Dokumenty\!Zpracovávám\Untitled-4.JPG




• selektivita - výhradně entomopatogenní
• nízké teplotní optimum - do 20°C
• snadná kultivace
• žadná chemie, žádná rezidua v půdě
• snadná aplikace
• možnost postřiku půdy i listů
• nutnost vlhkého počasí v době použití
Výhody použití hlístovek pro biologickou kontrolu:







C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\Fermentor.jpg






C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\Slugs.jpg



C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\scan EPN1.jpg
Biological control – christmas tree production…
Dánsko – 15% celkem biological control, z toho 30% pot plants, 70% vegetable, vše greenhoouses, jen
2% field (Sigshard, Innsbruck 2011)

C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\Tab pests.jpg



C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\EPN - scan materiály Merelbeke\Bioreaktor.jpg
Kultivace EPN v bioreaktorech bez hmyzího hostitele


150 EUR/ha
1.109/ha
50IJ/cm2

C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\EPN - scan materiály Merelbeke\Grubs1.jpg C:\Program
Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\EPN - scan materiály Merelbeke\Grubs2.jpg C:\Program
Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\EPN - scan materiály Merelbeke\Grubs3.jpg C:\Program
Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\EPN - scan materiály Merelbeke\Grubs4.jpg

C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\EPN - scan materiály Merelbeke\EPN1.JPG



C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\Aphodius.jpg C:\Program
Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\Hoplia.jpg C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\Amphimallon.jpg
C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\Serica.jpg
 Amphimallon solstitiale                            Aphodius
sp.                                     Hoplia philanthus                                 Anomala
            Phyllopetha horticola                                                  Serica
brunnea                                            Melolontha melolontha

C:\Program Files\Ahead\Paja\!Zpracovávám\EPN - scan materiály Merelbeke\Epn3.jpg