Rostlinná Biochemie • Rostliny patří mezi autotrofní organismy • Základním procesem u rostlin je fotosyntéza - využití energie slunečního záření k syntéze cukrů a aminokyselin - probíhá převážně v listech - cévní systém rozvádí produkty v rámci rostliny • Rostliny mají velmi rozsáhlý povrch - velmi tenké listy - maximální absorpce světla a difuze CO2 do listů - kořenový systém - efektivní získávání živin a vody z půdy • Rostliny musí čelit celé řadě extrémních podmínek - sucho, záplavy, teplo, chlad, mráz, vysoká intenzita světla - na rozdíl o živočichů nemohou utéct/změnit stanoviště • Rostliny si vyvinuly celou řadu obraných mechanismů a látek - ochrana před nepříznivými podmínkami (abiotické faktory) - ochrana před „snězením“ patogeny, herbivorními organismy (biotické faktory) Rostliny - Úvod 2 3 Rostliny - Význam • Zemědělství je základem lidské výživy (všežravec, vegetarián, vegan) • Narůstající světová populace - extrémní nároky na zemědělskou produkci - nutnost použití hnojiv, herbicidů, ochranných postřiků - rostlinná biochemie  nástroj pro křížení nových plodin  nástroj pro zvýšení produkce  nástroj pro syntézu nových přípravků pro ochranu rostlin  nástroj pro nové přístupy v ochraně rostlin • Rostliny jsou nenahraditelný zdroj - výchozí průmyslový materiál (tuky, škrob, cukry, dřevo) - základ pro výrobu a vývoj léčiv - v budoucnu jediný obnovitelný zdroj materiálu pro průmysl 4 Rostliny - Medicína • Použití rostlin pro medicínské účely Mezopotámie ~ 2600 BD Egypt ~ 1800 BD Čína ~1100 BD Indie ~ 1000 BD Řecko ~ 500 BD • Rostliny jsou nenahraditelný zdroj léčiv - 80% lidí v rozvojových zemích (4 miliardy) používá rostliny pro svou léčbu - Analgetika: Aspirin (salicin) - vrba (Evropa, 1899 Bayer) Morfine, Kodein – mák setý (Irán, Irák, 1827 Merck) - Kardiotonika: Digitalin – Náprstník červený (Evropa) - Malárie: Chinin - chinovník (Amazonie) Artemisinin – Pelyněk roční (Čína) - Antihypertensiva: Reserpin - Zmijovice hadová (Indie, Raudixin, Serpasil) - Chemoterapeutika: Paclitaxel - Tis západoamerický (Taxol) - Anestetika: Tubocurarin – Chondrodendron (Amazonie) aspirin salicin morfin chinin digitalin 5 Rostlinná buňka 6 Rostlinná buňka ORGANELA OBJEM % FUNKCE Vakuola 79 Udržování buněčného turgoru, skladování a ukládání odpadu Chloroplasty 16 Fotosyntéza, syntéza škrobu a lipidů Cytozol 3 Základní metabolický prostor, syntéza sacharózy Mitochondrie 0.5 Buněčná respirace Jádro 0.3 Obsahuje genom, replikace, transkripce Peroxizomy Místo pro reakce se vznikem toxických meziproduktů Endoplazmatické retikulum Zásoba Ca2+ iontů, účast na exportu proteinů z buňky a do vakuoly Olejová tělíska Skladování triacylglycerolů Golgiho aparát Zpracování a skládání proteinů určených pro transport ven z buňky nebo do vakuoly 7 Buněčná stěna • Buněčná stěna rostlin obsahuje 90% cukrů a 10% proteinů • Mikrofibrily celulózy – cca. 36 celulózových vláken spojených vodíkovými vazbami Primární buněčná stěna Plazmatická membrána Pektin Hemicelulóza Mikrofibrily celulózy mikrofibrila celulózy vlákno celulózy 8 Buněčná stěna • Hlavním sacharidem je celulóza (b1 4 D-glukóza, 2 – 25 tis. jednotek) - nejvíce zastoupená organická látka na zemi, cca. ½ vázaného org. uhlíku • Hemicelulóza – obsahuje i jiné cukry - D-manóza, D-galaktóza, D-fukóza, D-xylóza, D-arabinóza 9 Buněčná stěna • Pektin - směs polymerů z kyselin cukrů spojených a1 4 glykosidickou vazbou - část karboxylových skupin je esterifikována metylovou skupinou - volné karboxylové skupiny jednotlivých řetězců propojeny ionty Ca2+ a Mg2+ Poly-a-1,4-D-galakturonová kyselina 10 Buněčná stěna • Strukturální proteiny buněčné stěny jsou glykoproteiny - cukerná složka tvoří 50-90% • Pro růst rostlinné buňky je důležitý protein expanzin - přítomen v rostoucích částech, ruší vodíkové vazby mezi celulózovými mikrofibrilami a dalšími polysacharidy • Sekundární buněčná stěna - syntetizována k primární buněčné stěně po zastavení růstu - tvořena hlavně celulózou - inkorporace ligninu způsobuje lignifikaci sekundární buněčné stěny - v mrtvých buňkách plní podpůrnou funkci 11 Plasmodezmata • Mikroskopické kanály propojující sousední buňky - mezibuněčný transport molekul do cca. 900 Da (meziprodukty, metabolity), ale i proteinů a RNA - buňka může mít 1-10 tis. plasmodezmat - vzniklý společný vnitrobuněčný prostor je nazýván Symplast - prostor mezi buňkami nazýváme Apoplast - viry (TMV) exprimují tzv. „virus přenášející proteiny“ schopné přenášet NK přes plasmodezmata PlasmodezmataSymplast Apoplast Plazmatická membrána Proteinové částice 12 Struktura listu 13 Plasmodezmata • Důležitá role plasmodezmat v procesu vývoje a patogeneze - transport signálních molekul do a z floému - v procesu patogeneze rychlé uzavření depozicí kalózy (achilova pata obrany) Brunkard et al. 2016 14 Vakuoly • vakuola je ohraničena membránou zvanou tonoplast • maturované buňky mají zpravidla centrální vakuolu zabírající téměř celý buněčný prostor • mladé buňky mají větší počet malých vakuol zabírajících malou část prostoru buňky • důležitou funkcí je udržování buněčného turgoru - akumulace osmoticky aktivních anorganických a organických solí • vakuoly plní několik důležitých funkcí - lytické vakuoly - hydrolytické enzymy pro odbourání makromolekul - odpadní vakuoly - ukládání odpadu, xenobiotik (herbicidy) - zásobní vakuoly pro ukládání fosfátu, dusičnanu nebo malátu • zásobní vakuoly je možno využít v genetickém inženýrství pro produkci proteinů (protilátek) 15 Peroxisomy • malé sférické organely • ohraničeny pouze jednou membránou • určeny pro reakce se vznikem toxických meziproduktů - enzymy katalyzující oxidace - kataláza • v rostlinách jsou dva druhy - peroxisomy v listech (fotorespirace) - glyoxysomy v semenech (obsahující triacyglyceroly) – enzymy pro beta-oxidaci mastných kyselin • vznik nejasný - vychlípení membrány endoplasmatického retikula - dělení již existujících peroxisomů (nemají však genomovou DNA) 16 Golgiho aparát • skládá se až z 20 zakulacených disků, tzv. Golgiho cisteren (diktyosom) • obsahuje cis-, střední a trans-část • častá modifikace proteinů glykosylací • dva modely pro transport - přenos váčků - progresní model • lytická vakuola – clathrinem potažené váčky