Flurescein 446.4nm V (ml) c (mol.l-1) A Vzorek: A 0.25 0.00001 0.199 0.316 0.313 0.0000125 0.244 0.316 0.375 0.000015 0.307 0.317 0.438 0.0000175 0.360 0.318 0.5 0.00002 0.421 0.317 0.563 0.0000225 0.487 0.316 0.625 0.000025 0.557 Průměr 0.317 0.688 0.0000275 0.597 0.75 0.00003 0.657 y = 23581x - 0.0456 23581 0.0456 x = 0.0000154 mol.l-1 teoret. 0.3 ml c = 0.0009990 mol.l-1 cvz = 0.0000120 mol.l-1 ##### Sheet/List 2 ##### 10_Fluorimetrie "Fluorescein je červené organické barvivo, které v roztocích velmi silně zeleně fosforeskuje, jeho excitační / emisní maximum je 495 / 520 nm." 1) Příprava roztoku fluoresceinu Zásobní roztok o koncentraci c = 10-3 mol .l-1 Naváženo 33.2 mg fluoresceinu do 100 ml od.b. " Fluorescein rozpuštěn ve 20 ml od.b. v MeOH, doplněn po rysku MeOH." Do 25 ml od.b. připraveny roztoky o koncentraci c = 1 .10-5 - 3 .10-5 M v dest.vodě. 2) Kal. roztoky fluoresceinu měřicí 446 nm TABULKA (protokol) Pořadí Vfluresceinu c A A A F (excitační 405 nm) F(excitační 500 nm) v 25 ml od.baňce ml mol . l-1 Rel Rel (při 500 nm) 1 "0,00001" 0.280 0.281 0.280 0.236 0.236 0.237 0.279 0.279 0.280 2 "0,0000125" 0.248 0.248 0.252 0.306 0.303 0.307 0.321 0.321 0.321 3 "0,000015" 0.312 0.312 0.313 0.369 0.369 0.370 0.358 0.360 0.358 4 "0,0000175" 0.368 0.369 0.364 0.447 0.447 0.447 0.395 0.397 0.391 5 "0,00002" 0.421 0.422 0.421 0.503 0.503 0.502 0.420 0.421 0.421 6 "0,0000225" 0.486 0.489 0.487 0.559 0.560 0.560 0.456 0.456 0.457 7 "0,000025" 0.553 0.553 0.552 0.625 0.621 0.625 0.497 0.497 0.498 8 "0,0000275" 0.596 0.595 0.595 0.698 0.698 0.700 0.523 0.523 0.525 9 "0,00003" 0.657 0.657 0.658 0.756 0.757 0.755 0.565 0.568 0.564 3) Neznámý vzorek Pořadí Vfluresceinu c A F405 F500 v od.baňce (při 405 nm) (při 500 nm) ml mol . l-1 Rel Rel 1 0.439 0.521 0.446 2 0.439 0.521 0.446 3 0.438 0.522 0.458 4 0.440 0.521 0.447 5 0.436 0.520 0.442 6 0.441 0.523 0.445