Imunologie cvičení 9
Elekroforetické metody
  MVDr. Mgr. Monika Dušková, Ph.D.

Rozdělení proteinů na základě jejich pohyblivosti v elektrickém poli.
Bílkoviny se dělí podle povrchového náboje
Co potřebujeme:
zdroj stejnosměrného elektrického proudu
speciální elektroforetické vany
vhodný pufr
vhodný nosič: papír, acetatcelulózová membrána, agar,
                         agaróza nebo polyakrylamidový gel.
agar je nehomogenní směs polysacharidů získaných z mořských řas
agaróza je homogenní,  polymer složený z disacharidových jednotek – agarobiózy.
používá v koncentraci 0,5 – 2 %..
polyakrylamid je homogenní,  lze ho připravit v různé hustotě, zkoumané látky se potom dělí nejen
podle náboje, ale i podle velikosti molekul. Je toxický.
Elektroforéza

Výsledek elektroforézy sérových proteinů
mezi β1  a β2-globuliny - imunoglobulin IgA
zóna β2-globulinů  - C3 složka komplementu.
zóny čtyři podtřídy imunoglobulinu IgG.
na konci zóny γ-globulinů  - imunoglobulin IgM
Hypogamaglobulinémi
Monoklonální gamapatie

Elektroforéza plus imunologická reakce antigen – protilátka
Proteiny se rozdělí a potom se nechají reagovat s antisérem (protilátkami), vytvoří se IMK a ty
jsou patrné jako precipitační linie.
Imunoelektroforéza
Orientační obrázek
Hodnoty délky raketek pro vyhodnocení do protokolu:
Zkum 1: 2,8 cm
Zkum 2: 1,3 cm
Zkum 3: 0,8 cm
Vzorek: 1,5 cm