POSTUP KLONOVANIA ENDOLYZINU
C
GGTAC
====
====
====
====
CCATGG
GGTACC
GGATCC
CCTAGC
PCR pomocou primerov
!l:s�
GATCC
G
+
s RE miestami
G
CCTAG
+ NcoI, BamHI; 37 oC/16 hod
+T4 ligáza
i
CCATGG
GGTACC
GGATCC
CCTAGG
22 °C, 60 min
lysFl
+fosfatáza
37 °C, 60 min
TRANSFORMÁCIA E. COLI
EXPRESIA GÉNOV V E. COLI BL21(DE3)