Metody transformace II.



´
Bombardování mikroprojektily (biolistická metoda)
´Klein 1987
´Výhody: účinné a snadno proveditelné, přenesení DNA do většího množství buněk najednou,
aplikovatelné na různý materiál (buňky, pyl, meristém, embrya a somatická embrya), pak snazší
regenerace, aplikovatelné na velké množství rostlin (dvoj- i jednoděložné)
´Nevýhody: integrace velkého množství kopií DNA do chromozómu, drahé vybavení, poškození
buněk/pletiv díky nektrolovatelné rychlosti částic

Elektroporace
´
´Výhody: efektivní transformace, zisk velkého množství transformovaných buněk, produkce
transformantů s nízkým množstvím kopií transgenu, elektroporované buňky mají stejný fyziologický
stav jako před el., nízké množství mrtvých buněk, nízké náklady, nevyžaduje specialistu
´Nevýhody: vyžaduje protoplasty, problémy s regenerací rostlin z protoplastů, zvyšování genetické
variability v rost. regenerovaných z protoplastů

Mikroinjekce DNA do protoplastů, jádra
Microinjection process
´Výhody: optimalizování množství DNA, přesné přesunutí DNA (lze dokonce přímo do jádra), vhodné i
na malé objekty (mikrospory, kalus, proembrya…)
´Nevýhody: jedna mikroinjekce=1 DNA do jedné buňky, nutné zkušenosti a zručnost při mikroinjekci,
složité vybavení, požadavek regeneračního procesu pro mikroinjektované buňky
Výsledek obrázku pro liposome mediated gene transfer

Lipozómy uzavírající DNA
´Výhody: jednoduchost, dlouhodobá stabilita, ochrana DNA před degradací
´
´Nevýhody: problémy s regenerací z protoplastů
clip_image034_thumb3 Výsledek obrázku pro liposome mediated gene transfer

Transformace pomocí polyethylen glykolu (PEG – mediated)
Výsledek obrázku pro peg mediated transformation Výsledek obrázku pro peg mediated transformation


Methods to Transfer Foreign Genes to Plants
media/image6.png
Screening regimen for transgenic plants by PCR
https://www.intechopen.com/books/transgenic-plants-advances-and-limitations/methods-to-transfer-for
eign-genes-to-plants