C4220 – Biochemie – laboratorní cvičení (7 kr)
Úloha 1. Úvodní cvičení
Pravidla bezpečnosti práce v biochemické laboratoři
Organizace laboratorního cvičení z biochemie
Obsluha základních laboratorních přístrojů
Zásady správného vyhodnocování dat, tvorba grafů
Praktická část – pipetování, používání dávkovačů, fotometrie
Úloha 2. Kvalitativní a kvantitativní stanovení sacharidů
(A) Barevné reakce sacharidů
(B) Rozdělovací chromatografie sacharidů
(C) Stanovení redukujících sacharidů Somogyiho metodou
(D) Stanovení sacharidů pomocí enzymové elektrody
Úloha 3. Kvalitativní a kvantitativní stanovení aminokyselin
(A) Barevné reakce aminokyselin
(B) Rozdělovací chromatografie aminokyselin
(C) Stanovení koncentrace glycinu alkalimetrickou titrací
(D) Stanovení koncentrace glycinu reduktometrickou titrací
Úloha 4. Kvantitativní stanovení proteinů
(A) Spektrofotometrické stanovení proteinů v UV oblasti
(B) Stanovení hmotnostního zlomku tyrosinu a tryptofanu v proteinu
(C) Stanovení koncentrace proteinů metodou dle Folina
(D) Stanovení koncentrace proteinů bicinchoninovou metodou
Úloha 5. Izolace, analýza a stanovení deoxyribonukleové kyseliny (DNA)
(A) Izolace deoxyribonukleové kyseliny
(B) Identifikace DNA specifickou barevnou reakcí
(C) Stanovení čistoty DNA měřením absorbance v UV oblasti, denaturace DNA
(D) Stanovení koncentrace DNA měřením absorbance v UV oblasti
Úloha 6. Sacharasa – imobilizace, substrátová specifita, stanovení aktivity
(A) Příprava enzymového mini reaktoru (imobilizace sacharasy v alginátovém gelu)
(B) Substrátová specifita sacharasy
(C) Stanovení aktivity sacharasy
Úloha 7. pH optimum enzymové reakce
(A) Stanovení aktivity alfa-amylasy
(B) pH optimum alfa-amylasy
Úloha 8. Enzymová kinetika I
(A) Stanovení počáteční rychlosti enzymové reakce
(B) Aktivita enzymu, molekulární aktivita enzymu
Úloha 9. Enzymová kinetika II
(A) Závislost rychlosti enzymové reakce na koncentraci substrátu (Km a Vmax)
(B) Aktivita enzymu, molekulární aktivita enzymu
Úloha 10. Analytické využití enzymů
(A) Stanovení koncentrace močoviny pomocí ureasy
(B) Substrátová specifita alkoholdehydrogenasy
Úloha 11. Biologické řetězce přenosu elektronů
(A) Respirační řetězec aerobních organismů
(B) Fotosyntéza
C6560 – Biochemie – laboratorní cvičení (4 kr)
Úloha 1. Úvodní cvičení
Pravidla bezpečnosti práce v biochemické laboratoři
Organizace laboratorního cvičení z biochemie
Obsluha základních laboratorních přístrojů
Zásady správného vyhodnocování dat, tvorba grafů
Praktická část – pipetování, používání dávkovačů, fotometrie
Úloha 2. Kvalitativní a kvantitativní stanovení sacharidů
(A) Barevné reakce sacharidů
(B) Rozdělovací chromatografie sacharidů
Úloha 3. Kvalitativní a kvantitativní stanovení aminokyselin
(A) Barevné reakce aminokyselin
(B) Rozdělovací chromatografie aminokyselin
Úloha 4. Kvantitativní stanovení proteinů
(A) Spektrofotometrické stanovení proteinů v UV oblasti
(C) Stanovení koncentrace proteinů bicinchoninovou metodou
Úloha 5. Izolace, analýza a stanovení deoxyribonukleové kyseliny (DNA)
(A) Izolace deoxyribonukleové kyseliny
(C) Stanovení čistoty a koncentrace DNA měřením absorbance v UV oblasti
Úloha 6. Sacharasa – imobilizace, substrátová specifita, stanovení aktivity
(A) Příprava enzymového mini reaktoru (imobilizace sacharasy v alginátovém gelu)
(C) Stanovení aktivity sacharasy
Úloha 7. pH optimum enzymové reakce
(B) pH optimum alfa-amylasy
Úloha 8. Enzymová kinetika I
(A) Stanovení počáteční rychlosti enzymové reakce
(B) Aktivita enzymu, molekulární aktivita enzymu
Úloha 9. Enzymová kinetika II
(A) Závislost rychlosti enzymové reakce na koncentraci substrátu (Km a Vmax)
Úloha 10. Analytické využití enzymů
(A) Stanovení koncentrace močoviny pomocí ureasy
Úloha 11. Biologické řetězce přenosu elektronů
(A) Respirační řetězec aerobních organismů