Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 1
příklad:
Jaký objem rozpouštědla přidáme k 9 ml roztoku látky, aby se její koncentrace snížila pětkrát?
řešení:
celkový objem zředěného roztoku: 9 x 5 = 45 ml
objem přidaného rozpouštědla: 45 - 9 = 36 ml
příklady:
1) Jaký objem rozpouštědla přidáme k 5 ml roztoku látky, aby se její koncentrace snížila třikrát?
2) Jaký objem rozpouštědla přidáme k 8 ml roztoku látky, aby se její koncentrace snížila šestkrát?
3) Jaký objem rozpouštědla přidáme ke 12 ml roztoku látky, aby se její koncentrace snížila čtyřikrát?
4) Jaký objem rozpouštědla přidáme k 7 ml roztoku látky, aby se její koncentrace snížila devětkrát?
5) Jaký objem rozpouštědla přidáme k 5 ml roztoku látky, aby se její koncentrace snížila osmkrát?
řešení:
1 2 3 4 5
10 ml 40 ml 36 ml 56 ml 35 ml
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 2
příklad:
Koncentrovaný roztok látky byl zředěn v poměru 1:10. Ve zředěném roztoku byla stanovena
koncentrace látky 2 mg/ml. Jaká byla koncentrace látky v původním nezředěném roztoku?
řešení:
ředění roztoku: 11 x
koncentrace látky v nezředěném roztoku: 2 . 11 = 22 mg/ml
příklady:
1) Koncentrovaný roztok látky byl zředěn v poměru 1:5. Ve zředěném roztoku byla stanovena
koncentrace látky 5 mg/ml. Jaká byla koncentrace látky v původním nezředěném roztoku?
2) Koncentrovaný roztok látky byl zředěn v poměru 1:8. Ve zředěném roztoku byla stanovena
koncentrace látky 6 mg/ml. Jaká byla koncentrace látky v původním nezředěném roztoku?
3) Koncentrovaný roztok látky byl zředěn v poměru 1:2. Ve zředěném roztoku byla stanovena
koncentrace látky 4 mg/ml. Jaká byla koncentrace látky v původním nezředěném roztoku?
4) Koncentrovaný roztok látky byl zředěn v poměru 1:7. Ve zředěném roztoku byla stanovena
koncentrace látky 8 mg/ml. Jaká byla koncentrace látky v původním nezředěném roztoku?
5) Koncentrovaný roztok látky byl zředěn v poměru 1:4. Ve zředěném roztoku byla stanovena
koncentrace látky 9 mg/ml. Jaká byla koncentrace látky v původním nezředěném roztoku?
řešení:
1 2 3 4 5
30 mg/ml 54 mg/ml 12 mg/ml 64 mg/ml 45 mg/ml
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 3
příklad:
K 0,4 ml roztoku obsahující 0,1 mmol/l koncentraci látky jsme přidali 0,6 ml vody. Jaká je výsledná
koncentrace látky ve zředěném roztoku?
řešení:
celkový objem zředěného roztoku = 0,4 + 0,6 = 1 ml
0,4 ml roztoku obsahovaly 0,1 mmol/l koncentraci látky
1,0 ml roztoku obsahuje x mmol/l koncentraci látky
x : 0,1 = 0,4 : 1
x = 0,04 mmol/l
příklady:
1) K 0,8 ml roztoku obsahující 0,1 mmol/l koncentraci stanovované látky jsme přidali 0,2 ml vody. Jaká
je výsledná koncentrace látky ve zředěném roztoku?
2) K 0,3 ml roztoku obsahující 0,1 mmol/l koncentraci látky jsme přidali 0,7 ml vody. Jaká je výsledná
koncentrace látky ve zředěném roztoku?
3) K 0,9 ml roztoku obsahující 0,1 mmol/l koncentraci látky jsme přidali 0,1 ml vody. Jaká je výsledná
koncentrace látky ve zředěném roztoku?
4) K 0,7 ml roztoku obsahující 0,1 mmol/l koncentraci látky jsme přidali 0,3 ml vody. Jaká je výsledná
koncentrace látky ve zředěném roztoku?
5) K 0,6 ml roztoku obsahující 0,1 mmol/l koncentraci látky jsme přidali 0,4 ml vody. Jaká je výsledná
koncentrace látky ve zředěném roztoku?
řešení:
1 2 3 4 5
0,08 mmol/l 0,03 mmol/l 0,09 mmol/l 0,07 mmol/l 0,06 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 4
příklad:
Kolik ml rozpouštědla je potřeba přidat k 5 ml 0,4 mmol/l roztoku, aby byla výsledná koncentrace 0,08
mmol/l?
řešení:
5 ml roztoku obsahovalo 0,4 mmol/l koncentraci látky
x ml roztoku obsahuje 0,08 mmol/l koncentraci látky
x : 5 = 0,4 : 0,08
x = (0,4 .5.) : 0,08 = 25 ml ..... celkový objem zředěného roztoku
nebo:
roztok je nutno zředit 5 x (0,4 : 0,08 = 5)
5 . 5 = 25 ml............................ celkový objem zředěného roztoku
25 – 5 = 20 ml ........................ objem přidaného rozpouštědla
příklady:
1) Kolik ml rozpouštědla je potřeba přidat ke 2 ml 0,25 mmol/l roztoku, aby byla výsledná koncentrace
0,1 mmol/l?
2) Kolik ml rozpouštědla je potřeba přidat ke 3 ml 0,5 mmol/l roztoku, aby byla výsledná koncentrace
0,15 mmol/l?
3) Kolik ml rozpouštědla je potřeba přidat k 7 ml 0,6 mmol/l roztoku, aby byla výsledná koncentrace
0,2 mmol/l?
4) Kolik ml rozpouštědla je potřeba přidat ke 3 ml 0,3 mmol/l roztoku, aby byla výsledná koncentrace
0,02 mmol/l?
5) Kolik ml rozpouštědla je potřeba přidat ke 4 ml 0,15 mmol/l roztoku, aby byla výsledná koncentrace
0,05 mmol/l?
řešení:
1 2 3 4 5
3 ml 7 ml 14 ml 42 ml 8 ml
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 5
příklad:
Jaký objem vody přidáme ke 5 litrům 25 % roztoku látky, aby byl zředěn na 10 % roztok? (hustota = 1
g/ml)
řešení:
5 l roztoku obsahovalo 25 % látky
x l roztoku obsahuje 10 % látky
x : 5 = 25 : 10
x = (25 . 5) : 10 = 12,5 l ..... celkový objem zředěného roztoku
nebo:
roztok je nutno zředit 2,5 x (25 : 10 = 2,5)
5 . 2,5 = 12,5 l..................... celkový objem zředěného roztoku
12,5 - 5 = 7,5 l .................... objem přidané vody
příklady:
1) Jaký objem vody přidáme k 10 litrům 25 % roztoku látky, aby byl zředěn na 20 % roztok? (hustota =
1 g/ml)
2) Jaký objem vody přidáme ke 2 litrům 45 % roztoku látky, aby byl zředěn na 15 % roztok? (hustota =
1 g/ml)
3) Jaký objem vody přidáme k 4 litrům 30 % roztoku látky, aby byl zředěn na 20 % roztok? (hustota = 1
g/ml)
4) Jaký objem vody přidáme ke 4 litrům 15 % roztoku látky, aby byl zředěn na 10 % roztok? (hustota =
1 g/ml)
5) Jaký objem vody přidáme k 6 litrům 25 % roztoku látky, aby byl zředěn na 15 % roztok? (hustota = 1
g/ml)
řešení:
1 2 3 4 5
2,5 l 4,0 l 2,0 l 2,0 l 4,0 l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 6
příklad:
Do zkumavky pipetujeme 0,5 ml 40 mmol/l roztoku A, 0,4 ml 10 mmol/l roztoku B a 1,1 ml vody. Jaká
je výsledná koncentrace látky A v reakční směsi? Jaká je výsledná koncentrace látky B v reakční směsi?
řešení:
celkový objem reakční směsi: 0,5 + 0,4 + 1,1 = 2 ml
ředění roztoku látky A: 0,5 ml na celkový objem 2 ml .... zředěn 4 x (2 : 0,5 = 4)
výsledná koncentrace látky A: 40 : 4 = 10 mmol/l
ředění roztoku látky B: 0,4 ml na celkový objem 2 ml .... zředěn 5 x (2 : 0,4 = 5)
výsledná koncentrace látky B: 10 : 5 = 2 mmol/l
příklady:
1) Do zkumavky pipetujeme 1 ml 40 mmol/l roztoku A, 0,5 ml 20 mmol/l roztoku B a 0,5 ml vody. Jaká
je výsledná koncentrace látky A v reakční směsi? Jaká je výsledná koncentrace látky B v reakční směsi?
2) Do zkumavky pipetujeme 1 ml 50 mmol/l roztoku A, 0,25 ml 16 mmol/l roztoku B a 0,75 ml vody.
Jaká je výsledná koncentrace látky A v reakční směsi? Jaká je výsledná koncentrace látky B v reakční
směsi?
3) Do zkumavky pipetujeme 0,5 ml 80 mmol/l roztoku A, 1 ml 10 mmol/l roztoku B a 0,5 ml vody. Jaká
je výsledná koncentrace látky A v reakční směsi? Jaká je výsledná koncentrace látky B v reakční směsi?
4) Do zkumavky pipetujeme 0,25 ml 40 mmol/l roztoku A, 0,5 ml 40 mmol/l roztoku B a 1,25 ml vody.
Jaká je výsledná koncentrace látky A v reakční směsi? Jaká je výsledná koncentrace látky B v reakční
směsi?
5) Do zkumavky pipetujeme 0,5 ml 20 mmol/l roztoku A, 0,4 ml 50 mmol/l roztoku B a 1,1 ml vody.
Jaká je výsledná koncentrace látky A v reakční směsi? Jaká je výsledná koncentrace látky B v reakční
směsi?
řešení:
1 2 3 4 5
A: 20 mmol/l B:
5 mmol/l
A: 25 mmol/l B:
2 mmol/l
A: 20 mmol/l B:
5 mmol/l
A: 5 mmol/l B:
10 mmol/l
A: 5 mmol/l B:
10 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 7
příklad:
5 ml standardního vzorku (koncentrace 4 mg/ml) bylo doplněno na objem 20 ml. Ze zředěného vzorku
bylo odebráno 0,4 ml a přidáno 1,6 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
řešení:
1. ředění vzorku: 4 x (20 : 5 = 4)
2. ředění vzorku: 5 x (celkový objem vzorku: 0,4 + 1,6 = 2 ml; 2 : 0,4 = 5)
celkové ředění vzorku: 20 x
koncetrace látky ve zředěném vzorku: 4 : 20 = 0,2 mg/ml
příklady:
1) 10 ml standardního vzorku (koncentrace 5 mg/ml) bylo doplněno na objem 25 ml. Ze zředěného
vzorku bylo odebráno 0,5 ml a přidáno 1,5 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
2) 2,5 ml standardního vzorku (koncentrace 10 mg/ml) bylo doplněno na objem 10 ml. Ze zředěného
vzorku bylo odebráno 0,8 ml a přidáno 1,2 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
3) 4 ml standardního vzorku (koncentrace 15 mg/ml) bylo doplněno na objem 20 ml. Ze zředěného
vzorku bylo odebráno 0,2 ml a přidáno 1,8 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
4) 5 ml standardního vzorku (koncentrace 20 mg/ml) bylo doplněno na objem 25 ml. Ze zředěného
vzorku bylo odebráno 0,4 ml a přidáno 1,6 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
5) 2,5 ml standardního vzorku (koncentrace 16 mg/ml) bylo doplněno na objem 20 ml. Ze zředěného
vzorku bylo odebráno 0,3 ml a přidáno 1,7 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
řešení:
1 2 3 4 5
0,5 mg/ml 1 mg/ml 0,3 mg/ml 0,8 mg/ml 0,3 mg/ml
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 8
příklad:
Ze standardního roztoku látky (koncentrace 1 mg/ml) bylo odebráno 0,75 ml a objem doplněn na 15
ml. K 1,5 ml zředěného vzorku byl přidán 1 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
řešení:
1. ředění roztoku: 20 x (15 : 0,75 = 20)
koncentrace roztoku po 1. ředění: 0,05 mg/ml
2. ředění roztoku: celkový objem roztoku: 1,5 + 1 = 2,5 ml
1,5 ml roztoku obsahovalo látku v koncentraci 0,05 mg/ml
2,5 ml roztoku obsahuje látku v koncentraci x mg/ml
x : 0,05 = 1,5 : 2,5
x = 0,075 : 2,5 = 0,03 mg/ml
příklady:
1) Ze standardního roztoku látky (koncentrace 2 mg/ml) bylo odebráno 0,25 ml a objem doplněn na 10
ml. K 1 ml zředěného vzorku bylo přidáno 1,5 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
2) Ze standardního roztoku látky (koncentrace 5 mg/ml) bylo odebráno 0,1 ml a objem doplněn na 10
ml. K 0,5 ml zředěného vzorku bylo přidáno 2 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
3) Ze standardního roztoku látky (koncentrace 1 mg/ml) bylo odebráno 0,5 ml a objem doplněn na 20
ml. Ke 2 ml zředěného vzorku bylo přidáno 0,5 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky
ve vzorku?
4) Ze standardního roztoku látky (koncentrace 2,5 mg/ml) bylo odebráno 0,8 ml a objem doplněn na
20 ml. K 1 ml zředěného vzorku bylo přidáno 1,5 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky
ve vzorku?
5) Ze standardního roztoku látky (koncentrace 5 mg/ml) bylo odebráno 0,2 ml a objem doplněn na 10
ml. K 0,5 ml zředěného vzorku bylo přidáno 2 ml vody. Jaká byla výsledná koncentrace látky ve vzorku?
řešení:
1 2 3 4 5
0,02 mg/ml 0,01 mg/ml 0,02 mg/ml 0,04 mg/ml 0,02 mg/ml
příklad:
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 9
Roztok obsahující 100 mmol/l látky máme zředit tak, aby výsledná koncentrace látky ve zředěném
roztoku byla 0,1 mmol/l. Jestliže při prvním ředění odebereme 2 ml a doplníme objem na 100 ml, kolik
mililitrů takto naředěného roztoku musíme při druhém ředění doplnit na objem 20 ml?
řešení:
celkové ředění roztoku: 1000 x (100 : 0,1 = 1000)
1. ředění: 50 x (100 : 2 = 50) =>
2. ředění: 20 x (1000 : 50 = 20)
20 (výsledný objem) : 20 = 1 ml
příklady:
1) Roztok obsahující 100 mmol/l látky máme zředit tak, aby výsledná koncentrace látky ve zředěném
roztoku byla 0,1 mmol/l. Jestliže při prvním ředění odebereme 1 ml a doplníme objem na 200 ml, kolik
mililitrů takto naředěného roztoku musíme při druhém ředění doplnit na objem 50 ml?
2) Roztok obsahující 100 mmol/l látky máme zředit tak, aby výsledná koncentrace látky ve zředěném
roztoku byla 0,1 mmol/l. Jestliže při prvním ředění odebereme 5 ml a doplníme objem na 100 ml, kolik
mililitrů takto naředěného roztoku musíme při druhém ředění doplnit na objem 25 ml?
3) Roztok obsahující 100 mmol/l látky máme zředit tak, aby výsledná koncentrace látky ve zředěném
roztoku byla 0,1 mmol/l. Jestliže při prvním ředění odebereme 5 ml a doplníme objem na 25 ml, kolik
mililitrů takto naředěného roztoku musíme při druhém ředění doplnit na objem 200 ml?
4) Roztok obsahující 100 mmol/l látky máme zředit tak, aby výsledná koncentrace látky ve zředěném
roztoku byla 0,1 mmol/l. Jestliže při prvním ředění odebereme 2 ml a doplníme objem na 200 ml, kolik
mililitrů takto naředěného roztoku musíme při druhém ředění doplnit na objem 25 ml?
5) Roztok obsahující 100 mmol/l látky máme zředit tak, aby výsledná koncentrace látky ve zředěném
roztoku byla 0,1 mmol/l. Jestliže při prvním ředění odebereme 10 ml a doplníme objem na 100 ml,
kolik mililitrů takto naředěného roztoku musíme při druhém ředění doplnit na objem 500 ml?
řešení:
1 2 3 4 5
10 ml 0,5 ml 1 ml 2,5 ml 5 ml
příklad:
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 10
Vypočtěte molární koncentraci 15 % roztoku NaOH. (předpoklad: hustota = 1 g/ml)
řešení:
1 % roztok (hustota = 1 g/ml) obsahuje 1 g látky ve 100 ml roztoku
15 % roztok (hustota = 1 g/ml) obsahuje 15 g látky ve 100 ml roztoku
M NaOH = 40
roztok NaOH obsahující 40 g/l má koncentraci 1 mol/l
4 g/100 ml má koncentraci 1 mol/l
roztok NaOH obsahující 15 g/l má koncentraci x mol/l
x : 1 = 15 : 4
x = 15 : 4 = 3,75 mol/l
příklady:
1) Vypočtěte molární koncentraci 10 % roztoku NaOH. (předpoklad: hustota = 1 g/ml)
2) Vypočtěte molární koncentraci 20 % roztoku NaOH. (předpoklad: hustota = 1 g/ml)
3) Vypočtěte molární koncentraci 5 % roztoku NaOH. (předpoklad: hustota = 1 g/ml)
4) Vypočtěte molární koncentraci 25 % roztoku NaOH. (předpoklad: hustota = 1 g/ml)
5) Vypočtěte molární koncentraci 4 % roztoku NaOH. (předpoklad: hustota = 1 g/ml)
atomové hmotnosti prvků
H 1
O 16
Na 23
řešení:
1 2 3 4 5
2,5 mol/l 5,0 mol/l 1,25 mol/l 6,25 mol/l 1,0 mol/l
příklad:
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 11
Koncentrace látky v roztoku je 50 mg/ml, molekulová hmotnost látky je 200. Vypočtěte molární
koncentraci látky.
řešení:
1 mol/l roztok obsahuje 200 g látky v 1 l roztoku (M = 150) = 200g/l = 200 mg/ml
x mol/l roztok obsahuje 50 mg/ml
x : 1 = 50 : 200 = 0,25 mol/l
příklady:
1) Koncentrace látky v roztoku je 75 mg/ml, molekulová hmotnost látky je 125. Vypočtěte molární
koncentraci látky.
2) Koncentrace látky v roztoku je 30 mg/ml, molekulová hmotnost látky je 250. Vypočtěte molární
koncentraci látky.
3) Koncentrace látky v roztoku je 60 mg/ml, molekulová hmotnost látky je 240. Vypočtěte molární
koncentraci látky.
4) Koncentrace látky v roztoku je 90 mg/ml, molekulová hmotnost látky je 450. Vypočtěte molární
koncentraci látky.
5) Koncentrace látky v roztoku je 20 mg/ml, molekulová hmotnost látky je 100. Vypočtěte molární
koncentraci látky.
řešení:
1 2 3 4 5
0,6 mol/l 0,12 mol/l 0,25 mol/l 0,2 mol/l 0,2 mol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 12
příklad:
Koncentrace látky v roztoku je 30 mmol/l, molekulová hmotnost látky je 150. Vypočtěte koncentraci
látky v mg/ml.
řešení:
1 mol/l roztok obsahuje 150 g látky v 1 l roztoku (M = 150)
30 mmol/l roztok obsahuje x g látky v 1 l roztoku
x : 150 = 30.10-3
: 1
x = 4500 : 1000 = 4,5 g/l = 4,5 mg/ml
příklady:
1) Koncentrace látky v roztoku je 20 mmol/l, molekulová hmotnost látky je 100. Vypočtěte koncentraci
látky v mg/ml.
2) Koncentrace látky v roztoku je 50 mmol/l, molekulová hmotnost látky je 200. Vypočtěte koncentraci
látky v mg/ml.
3) Koncentrace látky v roztoku je 80 mmol/l, molekulová hmotnost látky je 50. Vypočtěte koncentraci
látky v mg/ml.
4) Koncentrace látky v roztoku je 40 mmol/l, molekulová hmotnost látky je 150. Vypočtěte koncentraci
látky v mg/ml.
5) Koncentrace látky v roztoku je 60 mmol/l, molekulová hmotnost látky je 250. Vypočtěte koncentraci
látky v mg/ml.
řešení:
1 2 3 4 5
2 mg/ml 10 mg/ml 4 mg/ml 6 mg/ml 15 mg/ml
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 13
příklad:
Proveďte vzájemný přepočet koncentrací močoviny (M = 60):
a) 10 mmol/l = ? mg/ml
b) 6 mg/ml = ? mmol/l
řešení:
a)
1 mol/l roztok obsahuje 60 g/l
1 mmol/l ..................... 60 mg/l
10 mmol/l ................. 600 mg/l = 0,6 mg/ml
b)
roztok obsahující 60 g/l má koncentraci 1 mol/l
60 mg/ml ...................... 1 mol/l
6 mg/ml .................. 0,1 mol/l = 100 mmol/l
příklady:
1) Proveďte vzájemný přepočet koncentrací močoviny (M = 60):
a) 5 mmol/l = ? mg/ml
b) 15 mg/ml = ? mmol/l
2) Proveďte vzájemný přepočet koncentrací močoviny (M = 60):
a) 20 mmol/l = ? mg/ml
b) 3 mg/ml = ? mmol/l
3) Proveďte vzájemný přepočet koncentrací močoviny (M = 60):
a) 50 mmol/l = ? mg/ml
b) 1,5 mg/ml = ? mmol/l
4) Proveďte vzájemný přepočet koncentrací močoviny (M = 60):
a) 25 mmol/l = ? mg/ml
b) 7,5 mg/ml = ? mmol/l
5) Proveďte vzájemný přepočet koncentrací močoviny (M = 60):
a) 40 mmol/l = ? mg/ml
b) 12 mg/ml = ? mmol/l
řešení:
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 14
1 2 3 4 5
0,3 mg/ml
250 mmol/l
1,2 mg/ml
50 mmol/l
3 mg/ml
25 mmol/l
1,5 mg/ml
125 mmol/l
2,4 mg/ml
200 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 15
příklad:
Ke 4 ml roztoku KCl jsme přidali 20 ml vody. V takto zředěném roztoku byla stanovena koncentrace KCl
7,4 mg/ml. Jaká byla molární koncentrace KCl v původním (nezředěném) roztoku?
řešení:
M KCl = 74
1 mol/l roztok KCl obsahuje 74 g KCl v 1 l roztoku
74 mg KCl v 1 ml roztoku => 7,4 mg KCl/ml = 0,1 mol/l roztok
ředění původního roztoku: 6 x (1 : 5) =>
koncentrace původního roztoku = 0,1 . 6 = 0,6 mol/l
příklady:
1) Ke 3 ml roztoku NaCl jsme přidali 30 ml vody. V takto zředěném roztoku byla stanovena koncentrace
NaCl 5,8 mg/ml. Jaká byla molární koncentrace NaCl v původním (nezředěném) roztoku?
2) Ke 4 ml roztoku KCl jsme přidali 44 ml vody. V takto zředěném roztoku byla stanovena koncentrace
KCl 7,4 mg/ml. Jaká byla molární koncentrace KCl v původním (nezředěném) roztoku?
3) Ke 2 ml roztoku NaCl jsme přidali 12 ml vody. V takto zředěném roztoku byla stanovena koncentrace
NaCl 5,8 mg/ml. Jaká byla molární koncentrace NaCl v původním (nezředěném) roztoku?
4) K 5 ml roztoku KCl jsme přidali 25 ml vody. V takto zředěném roztoku byla stanovena koncentrace
KCl 7,4 mg/ml. Jaká byla molární koncentrace KCl v původním (nezředěném) roztoku?
5) Ke 2 ml roztoku NaCl jsme přidali 22 ml vody. V takto zředěném roztoku byla stanovena koncentrace
NaCl 5,8 mg/ml. Jaká byla molární koncentrace NaCl v původním (nezředěném) roztoku?
atomové hmotnosti prvků
Na 23
K 39
Cl 35
řešení:
1 2 3 4 5
1,1 mol/l 1,2 mol/l 0,7 mol/l 0,6 mol/l 1,2 mol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 16
příklad:
Z 20 % roztoku (hustota = 1 g/ml) máme odebrat 0,5 mg látky. Jaký objem roztoku odpipetujeme?
řešení:
1 % roztok (hustota = 1 g/ml) obsahuje 1 g látky ve 100 ml roztoku
20 % roztok (hustota = 1 g/ml) obsahuje 20 g látky ve 100 ml roztoku
20 mg látky ve 100 μl roztoku
0,5 mg látky v x μl roztoku
x : 100 = 0,5 : 20
x = 50 : 20 = 2,5 μl
příklady:
1) Ze 40 % roztoku (hustota = 1 g/ml) máme odebrat 0,8 mg látky. Jaký objem roztoku odpipetujeme?
2) Z 10 % roztoku látky (hustota = 1 g/ml) máme odebrat 0,4 mg látky. Jaký objem roztoku
odpipetujeme?
3) Z 50 % roztoku (hustota = 1 g/ml) máme odebrat 0,2 mg látky. Jaký objem roztoku odpipetujeme?
4) Ze 30 % roztoku (hustota = 1 g/ml) máme odebrat 0,9 mg látky. Jaký objem roztoku odpipetujeme?
5) Ze 60 % roztoku (hustota = 1 g/ml) máme odebrat 0,6 mg látky. Jaký objem roztoku odpipetujeme?
řešení:
1 2 3 4 5
2,0 μl 4,0 μl 0,4 μl 3,0 μl 1,0 μl
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 17
příklad:
Na chromatogramu lze detekovat 20 μg látky. Jaký objem roztoku obsahujícího 2 % látky je potřeba
nanést? (hustota roztoku = 1 g/ml)
řešení:
1 % roztok (hustota = 1 g/ml) obsahuje 1 g látky ve 100 ml roztoku
2 % roztok (hustota = 1 g/ml) obsahuje 2 g látky ve 100 ml roztoku
2 mg látky ve 100 μl roztoku
20 μg = 0,02 mg látky v x μl roztoku
x : 100 = 0,02 : 2
x = (0,02.100) : 2 = 2 : 2 = 1 μl
příklady:
1) Na chromatogramu lze detekovat 10 μg látky. Jaký objem roztoku obsahujícího 5 % látky je potřeba
nanést? (hustota roztoku = 1 g/ml)
2) Na chromatogramu lze detekovat 4 μg látky. Jaký objem roztoku obsahujícího 1 % látky je potřeba
nanést? (hustota roztoku = 1 g/ml)
3) Na chromatogramu lze detekovat 25 μg látky. Jaký objem roztoku obsahujícího 10 % látky je potřeba
nanést? (hustota roztoku = 1 g/ml)
4) Na chromatogramu lze detekovat 15 μg látky. Jaký objem roztoku obsahujícího 7,5 % látky je potřeba
nanést? (hustota roztoku = 1 g/ml)
5) Na chromatogramu lze detekovat 50 μg látky. Jaký objem roztoku obsahujícího 2,5 % látky je potřeba
nanést? (hustota roztoku = 1 g/ml)
řešení:
1 2 3 4 5
0,2 μl 0,4 μl 0,25 μl 0,2 μl 2 μl
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 18
příklad:
Na chromatogram lze nanést maximálně 5 μl vzorku. Jaká musí být koncentrace látky v roztoku
(vyjádřete v mg/ml a v %), je-li její limit detekce 20 μg? (hustota roztoku = 1 g/ml)
řešení:
limit detekce = 20 μg, maximální objem = 5 μl => minimální koncentrace látky v roztoku =
20 μg látky /5 μl roztoku = 4 μg/μl = 4 mg/ml = 4 g/l = 0,4 %
(1 % roztok obsahuje 1 g látky/100 ml roztoku = 10 g látky /l roztoku)
příklady:
1) Na chromatogram lze nanést maximálně 5 μl vzorku. Jaká musí být koncentrace látky v roztoku
(vyjádřete v mg/ml a v %), je-li její limit detekce 10 μg? (hustota roztoku = 1 g/ml)
2) Na chromatogram lze nanést maximálně 2 μl vzorku. Jaká musí být koncentrace látky v roztoku
(vyjádřete v mg/ml a v %), je-li její limit detekce 5 μg? (hustota roztoku = 1 g/ml)
3) Na chromatogram lze nanést maximálně 10 μl vzorku. Jaká musí být koncentrace látky v roztoku
(vyjádřete v mg/ml a v %), je-li její limit detekce 15 μg? (hustota roztoku = 1 g/ml)
4) Na chromatogram lze nanést maximálně 2,5 μl vzorku. Jaká musí být koncentrace látky v roztoku
(vyjádřete v mg/ml a v %), je-li její limit detekce 10 μg? (hustota roztoku = 1 g/ml)
5) Na chromatogram lze nanést maximálně 30 μl vzorku. Jaká musí být koncentrace látky v roztoku
(vyjádřete v mg/ml a v %), je-li její limit detekce 15 μg? (hustota roztoku = 1 g/ml)
řešení:
1 2 3 4 5
2 mg/ml
0,2 %
2,5 mg/ml
0,25%
1,5 mg/ml
0,15 %
4 mg/ml
0,4 %
0,5 mg/ml
0,05 %
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 19
příklad:
Z roztoku látky o neznámé koncentraci bylo odebráno 5 ml vzorku a jeho objem byl doplněn na 50 ml.
Ze zředěného vzorku bylo odebráno 5 ml a v tomto objemu bylo stanoveno 20 μmolů látky. Jaká byla
koncentrace původního vzorku?
řešení:
koncentrace zředěného vzorku: 20 μmol v objemu 5 ml = 4 μmol/ml = 4 mmol/l
ředění původního vzorku: 10 x (50 : 5 = 10)
koncentrace původního vzorku: 4 . 10 = 40 mmol/l
příklady:
1) Z roztoku látky o neznámé koncentraci bylo odebráno 5 ml vzorku a jeho objem byl doplněn na 25
ml. Ze zředěného vzorku bylo odebráno 15 ml a v tomto objemu bylo stanoveno 30 μmolů látky. Jaká
byla koncentrace původního vzorku?
2) Z roztoku látky o neznámé koncentraci bylo odebráno 10 ml vzorku a jeho objem byl doplněn na 25
ml. Ze zředěného vzorku bylo odebráno 10 ml a v tomto objemu bylo stanoveno 40 μmolů látky. Jaká
byla koncentrace původního vzorku?
3) Z roztoku látky o neznámé koncentraci bylo odebráno 2,5 ml vzorku a jeho objem byl doplněn na 50
ml. Ze zředěného vzorku bylo odebráno 20 ml a v tomto objemu bylo stanoveno 10 μmolů látky. Jaká
byla koncentrace původního vzorku?
4) Z roztoku látky o neznámé koncentraci bylo odebráno 2,5 ml vzorku a jeho objem byl doplněn na 10
ml. Ze zředěného vzorku bylo odebráno 5 ml a v tomto objemu bylo stanoveno 25 μmolů látky. Jaká
byla koncentrace původního vzorku?
5) Z roztoku látky o neznámé koncentraci bylo odebráno 10 ml vzorku a jeho objem byl doplněn na 50
ml. Ze zředěného vzorku bylo odebráno 20 ml a v tomto objemu bylo stanoveno 30 μmolů látky. Jaká
byla koncentrace původního vzorku?
řešení:
1 2 3 4 5
10 mmol/l 10 mmol/l 10 mmol/l 20 mmol/l 7,5 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 20
příklad:
V 50 ml vody bylo rozpuštěno 0,4 mg látky, jejíž absorpční koeficient je 20 mg-1
.ml.cm-1
. Jaká je
absorbance tohoto roztoku? (délka optické dráhy = 1 cm)
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon)
koncentrace látky: 0,4 mg v objemu 50 ml = 0,4/50 = 0,008 mg/ml
A = 0,008 . 1 . 20 = 0,16
příklady:
1) Ve 20 ml vody bylo rozpuštěno 0,1 mg látky, jejíž absorpční koeficient je 50 mg-1
.ml.cm-1
. Jaká je
absorbance tohoto roztoku? (délka optické dráhy = 1 cm)
2) Ve 25 ml vody bylo rozpuštěno 0,5 mg látky, jejíž absorpční koeficient je 30 mg-1
.ml.cm-1
. Jaká je
absorbance tohoto roztoku? (délka optické dráhy = 1 cm)
3) Ve 30 ml vody bylo rozpuštěno 1,5 mg látky, jejíž absorpční koeficient je 10 mg-1
.ml.cm-1
. Jaká je
absorbance tohoto roztoku? (délka optické dráhy = 1 cm)
4) V 50 ml vody bylo rozpuštěno 0,8 mg látky, jejíž absorpční koeficient je 25 mg-1
.ml.cm-1
. Jaká je
absorbance tohoto roztoku? (délka optické dráhy = 1 cm)
5) V 15 ml vody bylo rozpuštěno 0,6 mg látky, jejíž absorpční koeficient je 8 mg-1
.ml.cm-1
. Jaká je
absorbance tohoto roztoku? (délka optické dráhy = 1 cm)
řešení:
1 2 3 4 5
0,25 0,6 0,5 0,4 0,32
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 21
příklad:
Vypočtěte absorpční koeficient látky, jestliže absorbance jejího roztoku (koncentrace roztoku 0,05
mg/ml) je 0,35. (délka optické dráhy = 1 cm)
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) ε = A/(c . l )
ε = 0,35/(0,05 . 1) = 7 mg-1
.ml.cm-1
příklady:
1) Vypočtěte absorpční koeficient látky, jestliže absorbance jejího roztoku (koncentrace roztoku 0,02
mg/ml) je 0,5. (délka optické dráhy = 1 cm)
2) Vypočtěte absorpční koeficient látky, jestliže absorbance jejího roztoku (koncentrace roztoku 0,01
mg/ml) je 0,45. (délka optické dráhy = 1 cm)
3) Vypočtěte absorpční koeficient látky, jestliže absorbance jejího roztoku (koncentrace roztoku 0,025
mg/ml) je 0,1. (délka optické dráhy = 1 cm)
4) Vypočtěte absorpční koeficient látky, jestliže absorbance jejího roztoku (koncentrace roztoku 0,03
mg/ml) je 0,6. (délka optické dráhy = 1 cm)
5) Vypočtěte absorpční koeficient látky, jestliže absorbance jejího roztoku (koncentrace roztoku 0,08
mg/ml) je 0,4. (délka optické dráhy = 1 cm)
řešení:
1 2 3 4 5
25 mg-1
.ml.cm-1
45 mg-1
.ml.cm-1
4 mg-1
.ml.cm-1
20 mg-1
.ml.cm-1
5 mg-1
.ml.cm-1
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 22
příklad:
Fotometrická kyveta s optickou dráhou 1 cm obsahovala 100 μg látky v objemu 2 ml. Absorbance
vzorku byla 0,4. Vypočtěte absorpční koeficient látky.
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) ε = A/(c . l )
koncentrace látky: 100 μg v objemu 2 ml = 100 : 2 = 50 μg/ml = 50 mg/l = 50.10-3
g/l
ε = 0,4 : (50.10-3
. 1) = 0,008.103
g-1
.l.cm-1
= 8 g-1
.l.cm-1
= 8 mg-1
.ml.cm-1
příklady:
1) Fotometrická kyveta s optickou dráhou 1 cm obsahovala 200 μg látky v objemu 2,5 ml. Absorbance
vzorku byla 0,8. Vypočtěte absorpční koeficient látky.
2) Fotometrická kyveta s optickou dráhou 1 cm obsahovala 75 μg látky v objemu 1,5 ml. Absorbance
vzorku byla 0,6. Vypočtěte absorpční koeficient látky.
3) Fotometrická kyveta s optickou dráhou 1 cm obsahovala 40 μg látky v objemu 2 ml. Absorbance
vzorku byla 0,70. Vypočtěte absorpční koeficient látky.
4) Fotometrická kyveta s optickou dráhou 1 cm obsahovala 150 μg látky v objemu 2,5 ml. Absorbance
vzorku byla 0,3. Vypočtěte absorpční koeficient látky.
5) Fotometrická kyveta s optickou dráhou 1 cm obsahovala 30 μg látky v objemu 1,5 ml. Absorbance
vzorku byla 0,4. Vypočtěte absorpční koeficient látky.
řešení:
1 2 3 4 5
10 mg-1
.ml.cm-1
12 mg-1
.ml.cm-1
35 mg-1
.ml.cm-1
5 mg-1
.ml.cm-1
20 mg-1
.ml.cm-1
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 23
příklad:
Absorpční koeficient látky je 5.103
l.mol-1
.cm-1
. Kolikrát byl zředěn její 5 mmol/l roztok, jestliže má
zředěný vzorek absorbanci 0,5? (délka optické dráhy = 1 cm)
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) c = A/(l . ε)
koncentrace zředěného roztoku: 0,5/(1 . 5.103
) = 0,1.10-3
mol/l = 0,1 mmol/l
ředění původního roztoku: 50 x (5 : 0,1 = 50)
příklady:
1) Absorpční koeficient látky je 2.103
l.mol-1
.cm-1
. Kolikrát byl zředěn její 10 mmol/l roztok, jestliže má
zředěný vzorek absorbanci 0,5? (délka optické dráhy = 1 cm)
2) Absorpční koeficient látky je 6.103
l.mol-1
.cm-1
. Kolikrát byl zředěn její 20 mmol/l roztok, jestliže má
zředěný vzorek absorbanci 0,3? (délka optické dráhy = 1 cm)
3) Absorpční koeficient látky je 4.103
l.mol-1
.cm-1
. Kolikrát byl zředěn její 2 mmol/l roztok, jestliže má
zředěný vzorek absorbanci 0,8? (délka optické dráhy = 1 cm)
4) Absorpční koeficient látky je 4.103
l.mol-1
.cm-1
. Kolikrát byl zředěn její 15 mmol/l roztok, jestliže má
zředěný vzorek absorbanci 0,5? (délka optické dráhy = 1 cm)
5) Absorpční koeficient látky je 7.103
l.mol-1
.cm-1
. Kolikrát byl zředěn její 10 mmol/l roztok, jestliže má
zředěný vzorek absorbanci 0,35 ? (délka optické dráhy = 1 cm)
řešení:
1 2 3 4 5
40 x 400 x 10 x 120 x 200 x
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 24
příklad:
10 ml vzorku zředíme na výsledný objem 50 ml. Odebereme 5 ml zředěného vzorku a doplníme na
objem 25 ml. Při standardním postupu stanovení poskytoval takto zředěný vzorek absorbanci 0,6,
zatímco absorbance 0,1 mmol/l vzorku stanovované látky byla 0,2. Určete koncentraci původního
neředěného vzorku.
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
0,1 mmol/l roztok poskytuje absorbanci 0,2 => absorbanci 0,6 poskytuje 0,3 mmol/l roztok (zředěný
vzorek)
ředění vzorku:
1. ředění: vzorek byl zředěn 5 x (50 : 10 = 5)
2 ředění: vzorek byl zředěn 5 x (25 : 5 = 5)
celkové ředění: 25 x (5 . 5 = 25)
koncentrace neředěného vzorku: 0,3 . 25 = 7,5 mmol/l
příklady:
1) 5 ml vzorku zředíme na výsledný objem 50 ml. Odebereme 5 ml zředěného vzorku a doplníme na
objem 25 ml. Při standardním postupu stanovení poskytoval takto zředěný vzorek absorbanci 0,2,
zatímco absorbance 0,1 mmol/l vzorku stanovované látky byla 0,4. Určete koncentraci původního
neředěného vzorku.
2) 4 ml vzorku zředíme na výsledný objem 20 ml. Odebereme 5 ml zředěného vzorku a doplníme na
objem 50 ml. Při standardním postupu stanovení poskytoval takto zředěný vzorek absorbanci 0,5,
zatímco absorbance 0,1 mmol/l vzorku stanovované látky byla 0,4. Určete koncentraci původního
neředěného vzorku.
3) 5 ml vzorku zředíme na výsledný objem 100 ml. Odebereme 10 ml zředěného vzorku a doplníme na
objem 25 ml. Při standardním postupu stanovení poskytoval takto zředěný vzorek absorbanci 0,6,
zatímco absorbance 0,1 mmol/l vzorku stanovované látky byla 0,4. Určete koncentraci původního
neředěného vzorku.
4) 5 ml vzorku zředíme na výsledný objem 20 ml. Odebereme 5 ml zředěného vzorku a doplníme na
objem 50 ml. Při standardním postupu stanovení poskytoval takto zředěný vzorek absorbanci 0,4,
zatímco absorbance 0,1 mmol/l vzorku stanovované látky byla 0,2. Určete koncentraci původního
neředěného vzorku.
5) 2,5 ml vzorku zředíme na výsledný objem 10 ml. Odebereme 5 ml zředěného vzorku a doplníme na
objem 100 ml. Při standardním postupu stanovení poskytoval takto zředěný vzorek absorbanci 0,2,
zatímco absorbance 0,1 mmol/l vzorku stanovované látky byla 0,4. Určete koncentraci původního
neředěného vzorku.
řešení:
1 2 3 4 5
2,5 mmol/l 6,25 mmol/l 7,5 mmol/l 8,0 mmol/l 4,0 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 25
příklad:
Vypočtěte, kolik látky (v %) prošlo dialyzační membránou, jestliže do dialyzační trubice bylo vneseno
0,8 mg látky a absorbance dialyzátu (objem 100 ml) po ukončení dialýzy byla 0,08. Absorpční koeficient
látky je 20 mg-1
.ml.cm-1
, délka optické dráhy 1 cm.
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon)
koncentrace látky v dialyzátu: c = A/(ε .l)
c = 0,08/20 = 0,004 mg/ml
objem dialyzátu: 100 ml
hmotnost látky v dialyzátu: 0,004 . 100 = 0,4 mg
0,8 mg = 100 %
0,4 mg = 50 %
příklady:
1) Vypočtěte, kolik látky (v %) prošlo dialyzační membránou, jestliže do dialyzační trubice byly vneseny
2 mg látky a absorbance dialyzátu (objem 200 ml) po ukončení dialýzy byla 0,15. Absorpční koeficient
látky je 30 mg-1
.ml.cm-1
, délka optické dráhy 1 cm.
2) Vypočtěte, kolik látky (v %) prošlo dialyzační membránou, jestliže do dialyzační trubice byly vneseny
2 mg látky a absorbance dialyzátu (objem 150 ml) po ukončení dialýzy byla 0,1. Absorpční koeficient
látky je 10 mg-1
.ml.cm-1
, délka optické dráhy 1 cm.
3) Vypočtěte, kolik látky (v %) prošlo dialyzační membránou, jestliže do dialyzační trubice bylo vneseno
0,4 mg látky a absorbance dialyzátu (objem 100 ml) po ukončení dialýzy byla 0,05. Absorpční koeficient
látky je 50 mg-1
.ml.cm-1
, délka optické dráhy 1 cm.
4) Vypočtěte, kolik látky (v %) prošlo dialyzační membránou, jestliže do dialyzační trubice bylo vneseno
0,2 mg látky a absorbance dialyzátu (objem 200 ml) po ukončení dialýzy byla 0,04. Absorpční koeficient
látky je 50 mg-1
.ml.cm-1
, délka optické dráhy 1 cm.
5) Vypočtěte, kolik látky (v %) prošlo dialyzační membránou, jestliže do dialyzační trubice bylo vneseno
5 mg látky a absorbance dialyzátu (objem 150 ml) po ukončení dialýzy byla 0,6. Absorpční koeficient
látky je 30 mg-1
.ml.cm-1
, délka optické dráhy 1 cm.
řešení:
1 2 3 4 5
50 % 75 % 25 % 80 % 60 %
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 26
příklad:
1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení absorbanci
0,2. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za stejných
podmínek absorbanci 0,8?
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
1 mmol/l roztok poskytuje absorbanci 0,2 => absorbanci 0,8 poskytuje 4 mmol/l roztok
4 mmol/l roztok obsahuje 4 mmol látky v objemu 1 litr
4 μmol látky v objemu 1 ml
8 μmol látky v objemu 2 ml
příklady:
1) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,5. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,3?
2) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,3. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,45?
3) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,4. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,25?
4) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,25. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,75?
5) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,3. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,75?
řešení:
1 2 3 4 5
1,2 μmol 3 μmol 1,25 μmol 6 μmol 5 μmol
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 27
příklad:
V kyvetě o délce 1 cm a objemu 2 ml proběhla reakce za vzniku absorbujícího produktu, absorbance se
zvýšila o hodnotu 0,3. Jaké látkové množství produktu (absorpční koeficient = 3.104
l.mol-1
.cm-1
)
vzniklo?
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) c = A/(l . ε)
ΔA = Δc . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) Δc = ΔA/(l . ε)
koncentrace produktu v kyvetě:
0,3/(3.104
. 1) = 0,1 . 10-4
= 10-5
mol/1
látkové množství produktu v kyvetě:
1 l roztoku obsahuje 10-5
mol
1 ml roztoku obsahuje 10-8
mol
2 ml roztoku obsahují 2. 10-8
mol (= 0,2.10-7
mol)
příklady:
1) V kyvetě o délce 1 cm a objemu 2,5 ml proběhla reakce za vzniku absorbujícího produktu,
absorbance se zvýšila o hodnotu 0,5. Jaké látkové množství produktu (absorpční koeficient = 104
l.mol-
1
.cm-1
) vzniklo?
2) V kyvetě o délce 1 cm a objemu 1,5 ml proběhla reakce za vzniku absorbujího produktu, absorbance
se zvýšila o hodnotu 0,4. Jaké látkové množství produktu (absorpční koeficient = 2.104
l.mol-1
.cm-1
)
vzniklo?
3) V kyvetě o délce 1 cm a objemu 1,5 ml proběhla reakce za vzniku absorbujícího produktu,
absorbance se zvýšila o hodnotu 0,4. Jaké látkové množství produktu (absorpční koeficient = 104
l.mol-
1
.cm-1
) vzniklo?
4) V kyvetě o délce 1 cm a objemu 2 ml proběhla reakce za vzniku absorbujícího produktu, absorbance
se zvýšila o hodnotu 0,15. Jaké látkové množství produktu (absorpční koeficient = 3.104
l.mol-1
.cm-1
)
vzniklo?
5) V kyvetě o délce 1 cm a objemu 2,5 ml proběhla reakce za vzniku absorbujícího produktu,
absorbance se zvýšila o hodnotu 0,2. Jaké látkové množství produktu (absorpční koeficient = 2.104
l.mol-1
.cm-1
) vzniklo?
řešení:
1 2 3 4 5
12,5.10-8
mol 3.10-8
mol 6.10-8
mol 1.10-8
mol 2,5.10-8
mol
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 28
příklad:
Ze 2 g vzorku byla vyextrahována látka do 10 ml vody. Ke 2 ml tohoto extraktu byly přidány 2 ml činidla
a 6 ml vody za vzniku zbarvení - absorbance vzorku byla 0,4. Kolik miligramů látky bylo obsaženo v 1
gramu původního vzorku, jestliže absorbance standardního roztoku obsahujícího 1 mg látky na 10 ml
reakční směsi je 0,1?
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
absorbance standardního vzorku (1 mg látky/10 ml reakční směsi) = 0,1 =>
vzorek poskytující absorbanci 0,4 obsahuje 4 mg látky/10 ml reakční směsi
10 ml reakční směsi = 2 ml extraktu + 2 ml činidla + 2 ml vody
=> 2 ml extraktu obsahovaly 4 mg látky
10 ml extraktu obsahovalo 20 mg látky
4 mg látky byly vyextrahovány (do 10 ml vody) ze 2 g vzorku => koncentrace látky ve vzorku = 20 mg/2
g = 10 mg/g, 1 gram původního vzorku obsahoval 10 mg látky
příklady:
1) Z 5 g vzorku byla vyextrahována látka do 10 ml vody. Ke 2 ml tohoto extraktu byly přidány 2 ml
činidla a 6 ml vody za vzniku zbarvení - absorbance vzorku byla 0,1. Kolik miligramů látky bylo obsaženo
v 1 gramu původního vzorku, jestliže absorbance standardního roztoku obsahujícího 1 mg látky na 10
ml reakční směsi je 0,2?
2) Z 10 g vzorku byla vyextrahována látka do 10 ml vody. Ke 2 ml tohoto extraktu byly přidány 3 ml
činidla a 5 ml vody za vzniku zbarvení - absorbance vzorku byla 0,2. Kolik miligramů látky bylo obsaženo
v 1 gramu původního vzorku, jestliže absorbance standardního roztoku obsahujícího 1 mg látky na 10
ml reakční směsi je 0,4?
3) Z 25 g vzorku byla vyextrahována látka do 10 ml vody. Ke 2 ml tohoto extraktu byly přidány 4 ml
činidla a 4 ml vody za vzniku zbarvení - absorbance vzorku byla 0,3. Kolik miligramů látky bylo obsaženo
v 1 gramu původního vzorku, jestliže absorbance standardního roztoku obsahujícího 1 mg látky na 10
ml reakční směsi je 0,15?
4) Z 15 g vzorku byla vyextrahována látka do 10 ml vody. Ke 2 ml tohoto extraktu byly přidány 4 ml
činidla a 4 ml vody za vzniku zbarvení - absorbance vzorku byla 0,6. Kolik miligramů látky bylo obsaženo
v 1 gramu původního vzorku, jestliže absorbance standardního roztoku obsahujícího 1 mg látky na 10
ml reakční směsi je 0,2?
5) Z 20 g vzorku byla vyextrahována látka do 10 ml vody. Ke 2 ml tohoto extraktu byly přidány 3 ml
činidla a 5 ml vody za vzniku zbarvení - absorbance vzorku byla 0,45. Kolik miligramů látky bylo
obsaženo v 1 gramu původního vzorku, jestliže absorbance standardního roztoku obsahujícího 1 mg
látky na 10 ml reakční směsi je 0,15?
řešení:
1 2 3 4 5
0,5 mg/g 0,25 mg/g 0,4 mg/g 1 mg/g 0,75 mg/g
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 29
příklad:
Absorbance standardního vzorku (koncentrace 2 mg/ml) je 0,5. 2 ml neznámého vzorku byly doplněny
na objem 25 ml, absorbance zředěného vzorku byla 0,25. Jaká je koncentrace původního neředěného
vzorku? Jakou hmotnost látky obsahují 3 ml tohoto vzorku?
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
absorbance standardního vzorku (2 mg/ml) = 0,5 =>
vzorek poskytující absorbanci 0,25 má koncentraci 1 mg/ml
ředění vzorku: 12,5 x (25 : 2 ) = 12,5
koncentrace neředěného vzorku: 12,5 . 1 = 12,5 mg/ml
hmotnost látky v 1 ml = 12,5 mg
hmotnost látky ve 3 ml = 12,5 .3 = 37,5 mg
příklady:
1) Absorbance standardního vzorku (koncentrace 2,5 mg/ml) je 0,1. 2 ml neznámého vzorku byly
doplněny na objem 10 ml, absorbance zředěného vzorku byla 0,4. Jaká je koncentrace původního
neředěného vzorku? Jakou hmotnost látky obsahuje 1,5 ml tohoto vzorku?
2) Absorbance standardního vzorku (koncentrace 10 mg/ml) je 0,8. 5 ml neznámého vzorku bylo
doplněno na objem 20 ml, absorbance zředěného vzorku byla 0,3. Jaká je koncentrace původního
neředěného vzorku? Jakou hmotnost látky obsahuje 5 ml tohoto vzorku?
3) Absorbance standardního vzorku (koncentrace 4 mg/ml) je 0,5. 2,5 ml neznámého vzorku bylo
doplněno na objem 50 ml, absorbance zředěného vzorku byla 0,15. Jaká je koncentrace původního
neředěného vzorku? Jakou hmotnost látky obsahuje 0,5 ml tohoto vzorku?
4) Absorbance standardního vzorku (koncentrace 3 mg/ml) je 0,6. 10 ml neznámého vzorku bylo
doplněno na objem 20 ml, absorbance zředěného vzorku byla 0,35. Jaká je koncentrace původního
neředěného vzorku? Jakou hmotnost látky obsahuje 8 ml tohoto vzorku?
5) Absorbance standardního vzorku (koncentrace 5 mg/ml) je 0,4. 5 ml neznámého vzorku bylo
doplněno na objem 20 ml, absorbance zředěného vzorku byla 0,5. Jaká je koncentrace původního
neředěného vzorku? Jakou hmotnost látky obsahují 2 ml tohoto vzorku?
řešení:
1 2 3 4 5
50 mg/ml
75 mg
15 mg/ml
75 mg
24 mg/ml
12 mg
3,5 mg/ml
28 mg
25 mg/ml
50 mg
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 30
příklad:
Suspenze buněk obsahující 1 mg suché hmotnosti buněk/ml poskytuje zákal (absorbanci) 0,8. Sklizená
suspenze měla po dvacetinásobném zředění absorbanci 0,4. Jaký objem suspenze buněk je potřeba
pipetovat, aby vzorek obsahoval 2 mg suché hmotnosti buněk?
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
zákal 0,8 poskytuje suspenze obsahující 1 mg suché hmotnosti buněk/ml =>
zákal 0,4 poskytuje suspenze obsahující 0,5 mg suché hmotnosti buněk/ml
neředěná suspenze obsahuje 20 . 0,5 = 10 mg suché hmotnosti buněk/ml =>
2 mg suché hmotnosti buněk jsou obsaženy v 0,2 ml suspenze
řešení:
1) Suspenze buněk obsahující 1 mg suché hmotnosti buněk/ml poskytuje zákal (absorbanci) 0,5.
Sklizená suspenze měla po desetinásobném zředění absorbanci 0,8. Jaký objem suspenze buněk je
potřeba pipetovat, aby vzorek obsahoval 4 mg suché hmotnosti buněk?
2) Suspenze buněk obsahující 1 mg suché hmotnosti buněk/ml poskytuje zákal (absorbanci) 0,6.
Sklizená suspenze měla po třicetinásobném zředění absorbanci 0,5. Jaký objem suspenze buněk je
potřeba pipetovat, aby vzorek obsahoval 5 mg suché hmotnosti buněk?
3) Suspenze buněk obsahující 1 mg suché hmotnosti buněk/ml poskytuje zákal (absorbanci) 0,75.
Sklizená suspenze měla po dvacetinásobném zředění absorbanci 0,6. Jaký objem suspenze buněk je
potřeba pipetovat, aby vzorek obsahoval 2 mg suché hmotnosti buněk?
4) Suspenze buněk obsahující 1 mg suché hmotnosti buněk/ml poskytuje zákal (absorbanci) 0,7.
Sklizená suspenze měla po desetinásobném zředění absorbanci 0,35. Jaký objem suspenze buněk je
potřeba pipetovat, aby vzorek obsahoval 1 mg suché hmotnosti buněk?
5) Suspenze buněk obsahující 1 mg suché hmotnosti buněk/ml poskytuje zákal (absorbanci) 0,5.
Sklizená suspenze měla po padesátinásobném zředění absorbanci 0,25. Jaký objem suspenze buněk je
potřeba pipetovat, aby vzorek obsahoval 2,5 mg suché hmotnosti buněk?
řešení:
1 2 3 4 5
0,25 ml 0,2 ml 0,125 ml 0,2 ml 0,1 ml
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 31
příklad:
Ke standardizaci fotometrického stanovení bylo do zkumavky pipetováno 5 ml 0,4 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,5. Jaké množství
látky obsahuje neznámý vzorek, jehož absorbance byla 0,3? (Objem reakčních směsí byl v obou
případech stejný).
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
při stejném objemu reakční směsi A je přímo úměrná n
množství látky ve standardním vzorku: 0,4 mmol v 1 l vzorku = 0,4 μmol v 1 ml vzorku =
0,4 . 5 = 2 μmol v 5 ml vzorku
absorbance standardního vzorku (2 μmol) = 0,5 =>
vzorek poskytující absorbanci 0,3 obsahuje 1,2 μmol látky
příklady:
1) Ke standardizaci fotometrického stanovení bylo do zkumavky pipetováno 2,5 ml 2 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,8. Jaké množství
látky obsahuje neznámý vzorek, jehož absorbance byla 0,2? (Objem reakčních směsí byl v obou
případech stejný).
2) Ke standardizaci fotometrického stanovení byly do zkumavky pipetovány 2 ml 3 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,35. Jaké množství
látky obsahuje neznámý vzorek, jehož absorbance byla 0,7? (Objem reakčních směsí byl v obou
případech stejný).
3) Ke standardizaci fotometrického stanovení bylo do zkumavky pipetováno 1,5 ml 4 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,8. Jaké množství
látky obsahuje neznámý vzorek, jehož absorbance byla 0,6? (Objem reakčních směsí byl v obou
případech stejný).
4) Ke standardizaci fotometrického stanovení byly do zkumavky pipetovány 2 ml 0,5 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,6. Jaké množství
látky obsahuje neznámý vzorek, jehož absorbance byla 0,75? (Objem reakčních směsí byl v obou
případech stejný).
5) Ke standardizaci fotometrického stanovení byly do zkumavky pipetovány 3 ml 2 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,7. Jaké množství
látky obsahuje neznámý vzorek, jehož absorbance byla 0,35? (Objem reakčních směsí byl v obou
případech stejný).
řešení:
1 2 3 4 5
1,25 μmol 12 μmol 4,5 μmol 1,25 μmol 3 μmol
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 32
příklad:
Ke standardizaci fotometrického stanovení bylo do zkumavky pipetováno 5 ml 0,4 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,5. Jakou koncentraci
látky obsahuje neznámý vzorek, jestliže ke jej stanovení bylo pipetováno 3 ml a jeho absorbance byla
0,3? (Celkový objem reakční směsi byl v obou případech stejný.)
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
při stejném objemu reakční směsi A je přímo úměrná n
množství látky ve standardním vzorku: 0,4 mmol v 1 l vzorku = 0,4 μmol v 1 ml vzorku =
= 0,4 . 5 = 2 μmol v 5 ml vzorku
2 μmol látky poskytují absorbanci 0,5 => absorbanci 0,3 poskytuje 1,2 μmol látky
koncentrace neznámého vzorku: 1,2 : 3 = 0,4 μmol/ml = 0,4 mmol/l
příklady:
1) Ke standardizaci fotometrického stanovení byly do zkumavky pipetovány 3 ml 2 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,7. Jakou koncentraci
látky obsahuje neznámý vzorek, jestliže ke jej stanovení byly pipetovány 2 ml a jeho absorbance 0,35?
(Celkový objem reakční směsi byl v obou případech stejný.)
2) Ke standardizaci fotometrického stanovení byly do zkumavky pipetovány 2 ml 0,5 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,6. Jakou koncentraci
látky obsahuje neznámý vzorek, jestliže ke jej stanovení bylo pipetováno 10 ml a jeho absorbance byla
0,75? (Celkový objem reakční směsi byl v obou případech stejný.)
3) Ke standardizaci fotometrického stanovení bylo do zkumavky pipetováno 1,5 ml 4 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,8. Jakou koncentraci
látky obsahuje neznámý vzorek, jestliže ke jej stanovení bylo pipetováno 9 ml a jeho absorbance byla
0,6? (Celkový objem reakční směsi byl v obou případech stejný.)
4) Ke standardizaci fotometrického stanovení byly do zkumavky pipetovány 2 ml 3 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,35. Jakou
koncentraci látky obsahuje neznámý vzorek, jestliže ke jej stanovení byly pipetovány 4 ml a jeho
absorbance byla 0,7? (Celkový objem reakční směsi byl v obou případech stejný.)
5) Ke standardizaci fotometrického stanovení bylo do zkumavky pipetováno 2,5 ml 2 mmol/l
standardního roztoku látky. Po přidání reakčních činidel byla absorbance vzorku 0,8. Jakou koncentraci
látky obsahuje neznámý vzorek, jestliže ke jej stanovení bylo pipetováno 5 ml a jeho absorbance byla
0,2? (Celkový objem reakční směsi byl v obou případech stejný.)
řešení:
1 2 3 4 5
1,5 mmol/l 0,125 mmol/l 0,5 mmol/l 3 mmol/l 0,25 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 33
příklad:
Při pH = 4 byla naměřena absorbance vzorku obsahujícího produkt enzymové reakce 0,3. Bylo
spočteno, že aktivita enzymu ve vzorku byla 0,5 μmol/min. Při pH = 7 byla zjištěna aktivita enzymu ve
vzorku 0,65 μmol/min. Jaká byla absorbance vzorku obsahujícího produkt reakce?
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
aktivita enzymu je přímo úměrná c (vzniklého produktu) => A je přímo úměrná aktivitě enzymu
při aktivitě enzymu 0,5 μmol/min A = 0,3 => při aktivitě enzymu 0,65 μmol/min A = 0,39
příklady:
1) Při pH = 4 byla naměřena absorbance vzorku obsahujícího produkt enzymové reakce 0,4. Bylo
spočteno, že aktivita enzymu ve vzorku byla 0,5 μmol/min. Při pH = 7 byla zjištěna aktivita enzymu ve
vzorku 0,6 μmol/min. Jaká byla absorbance vzorku obsahujícího produkt reakce?
2) Při pH = 4 byla naměřena absorbance vzorku obsahujícího produkt enzymové reakce 0,15. Bylo
spočteno, že aktivita enzymu ve vzorku byla 0,25 μmol/min. Při pH = 7 byla zjištěna aktivita enzymu ve
vzorku 0,7 μmol/min. Jaká byla absorbance vzorku obsahujícího produkt reakce?
3) Při pH = 4 byla naměřena absorbance vzorku obsahujícího produkt enzymové reakce 0,15. Bylo
spočteno, že aktivita enzymu ve vzorku byla 0,3 μmol/min. Při pH = 7 byla zjištěna aktivita enzymu ve
vzorku 0,5 μmol/min. Jaká byla absorbance vzorku obsahujícího produkt reakce?
4) Při pH = 4 byla naměřena absorbance vzorku obsahujícího produkt enzymové reakce 0,45. Bylo
spočteno, že aktivita enzymu ve vzorku byla 0,5 μmol/min. Při pH = 7 byla zjištěna aktivita enzymu ve
vzorku 0,6 μmol/min. Jaká byla absorbance vzorku obsahujícího produkt reakce?
5) Při pH = 4 byla naměřena absorbance vzorku obsahujícího produkt enzymové reakce 0,15. Bylo
spočteno, že aktivita enzymu ve vzorku byla 0,25 μmol/min. Při pH = 7 byla zjištěna aktivita enzymu ve
vzorku 0,8 μmol/min. Jaká byla absorbance vzorku obsahujícího produkt reakce?
řešení:
1 2 3 4 5
0,48 0,42 0,25 0,54 0,48
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 34
příklad:
Jaký je název základní jednotky enzymové aktivity v soustavě SI a jak je definována?
řešení:
katal (kat) = mol/s
příklad:
Vyjádřete velikost základní jednotky enzymové aktivity v soustavě SI v jednotkách μmol/min.
řešení:
kat (katal) = mol/s = 106
μmol/s = 60.106
μmol/min = 6.107
μmol/min
příklad:
Vyjádřete velikost jednotky enzymové aktivity μmol/min v základních jednotkách soustavy SI.
řešení:
μmol/min = 10-6
mol/min = 10-6
mol/60 s = 1/6.10-7
mol/s = 1/6.10-7
kat
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 35
příklad:
Přepočtěte rychlost enzymové reakce:
a) v (μmol/min) = 0,8, v (nkat) = ?
b) v (nkat) = 80, v (μmol/min) = ?
řešení:
a) 1 μmol/min = 10-6
mol/min = 10-6
mol/60 s = 1/6.10-7
mol/s = 1/6 .102
nkat = 16,67 nkat
0,8 μmol/min = 0,8 . 16, 67 = 13,3 nkat
b) 1 kat = 1 mol/s = 106
μmol/s = 60.106
μmol/min = 6.107
μmol/min
1 nkat = 6.10-2
μmol/min = 0,06 μmol/min
80 nkat = 0,06 . 80 = 4,8 μmol/min
příklady:
1) Přepočtěte rychlost enzymové reakce:
a) v (μmol/min) = 0,2, v (nkat) = ?
b) v (nkat) = 20, v (μmol/min) = ?
2) Přepočtěte rychlost enzymové reakce:
a) v (μmol/min) = 0,6, v (nkat) = ?
b) v (nkat) = 60, v (μmol/min) = ?
3) Přepočtěte rychlost enzymové reakce:
a) v (μmol/min) = 0,4, v (nkat) = ?
b) v (nkat) = 40, v (μmol/min) = ?
4) Přepočtěte rychlost enzymové reakce:
a) v (μmol/min) = 0,5, v (nkat) = ?
b) v (nkat) = 50, v (μmol/min) = ?
5) Přepočtěte rychlost enzymové reakce:
a) v (μmol/min) = 0,3, v (nkat) = ?
b) v (nkat) = 30, v (μmol/min) = ?
řešení:
1 2 3 4 5
3,3 nkat
1,2 μmol/min
10 nkat
3,6 μmol/min
6,7 nkat
2,4 μmol/min
8,3 nkat
3,0 μmol/min
5 nkat
1,8 μmol/min
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 36
příklad:
Vypočítejte molekulární aktivitu (číslo přeměny) enzymu, jehož 0,03 mg má aktivitu
3000 nkat. Molekulová hmotnost enzymu je 40 000.
řešení:
40 000 g enzymu...... 1 mol
0,03 mg enzymu.......0,75 nmol
0,75 nmol enzymu přemění 3000 nmol substrátu za sekundu
1 mol enzymu přemění 4000 mol substrátu za sekundu => číslo přeměny = 4000 s-1
příklady:
1) Vypočítejte molekulární aktivitu (číslo přeměny) enzymu, jehož 0,05 mg má aktivitu
1000 nkat. Molekulová hmotnost enzymu je 20 000.
2) Vypočítejte molekulární aktivitu (číslo přeměny) enzymu, jehož 0,01 mg má aktivitu
2000 nkat. Molekulová hmotnost enzymu je 25 000.
3) Vypočítejte molekulární aktivitu (číslo přeměny) enzymu, jehož 0,06 mg má aktivitu
3000 nkat. Molekulová hmotnost enzymu je 30 000.
4) Vypočítejte molekulární aktivitu (číslo přeměny) enzymu, jehož 0,02 mg má aktivitu
2500 nkat. Molekulová hmotnost enzymu je 40 000.
5) Vypočítejte molekulární aktivitu (číslo přeměny) enzymu, jehož 0,08 mg má aktivitu
4000 nkat. Molekulová hmotnost enzymu je 50 000.
řešení:
1 2 3 4 5
400 s-1
5000 s-1
1500 s-1
5000 s-1
2500 s-1
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 37
příklad:
Do reakční směsi bylo pipetováno 0,25 ml enzymu, 0,75 ml vody, 2 ml pufru a 1 ml roztoku substrátu.
Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 4.103
mol-1
.l.cm-1
, délka optické dráhy =
1 cm) byla 0,3. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 6 minut? (vyjádřete
v μmol/min)
řešení:
koncentrace produktu v reakční směsi: c = A/(ε .l)
c = 0,3/(4.103
. 1) = 0,075.10-3
mol/l = 0,075 mmol/l
objem reakční směsi: 0,25 + 0,75 + 2 + 1 = 4 ml
látkové množství produktu ve směsi: 0,075 mmol v 1 l směsi = 0,075 μmol v 1 ml směsi =
= 0,075 . 4 = 0,3 μmol ve 4 ml směsi
rychlost enzymové reakce (aktivita enzymu): 0,3/6 = 0,05 μmol/min
příklady:
1) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,1 ml enzymu, 0,9 ml vody, 1 ml pufru a 0,5 ml roztoku substrátu.
Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 5.103
mol-1
.l.cm-1
, délka optické dráhy =
1 cm) byla 0,4. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 5 minut? (vyjádřete
v μmol/min)
2) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,2 ml enzymu, 0,8 ml vody, 1,5 ml pufru a 1,5 ml roztoku
substrátu. Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 6.103
mol-1
.l.cm-1
, délka
optické dráhy = 1 cm) byla 0,75. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 10 minut?
(vyjádřete v μmol/min)
3) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,05ml enzymu, 0,95 ml vody, 1,3 ml pufru a 0,7 ml roztoku
substrátu. Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 2.103
mol-1
.l.cm-1
, délka
optické dráhy = 1 cm) byla 0,5. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 15 minut?
(vyjádřete v μmol/min)
4) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,15 ml enzymu, 0,85 ml vody, 1 ml pufru a 0,5 ml roztoku
substrátu. Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 2,5.103
mol-1
.l.cm-1
, délka
optické dráhy = 1 cm) byla 0,8. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 10 minut?
(vyjádřete v μmol/min)
5) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,25 ml enzymu, 0,75 ml vody, 1,5 ml pufru a 1,5 ml roztoku
substrátu. Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 5.103
mol-1
.l.cm-1
, délka
optické dráhy = 1 cm) byla 0,6. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 8 minut?
(vyjádřete v μmol/min)
řešení:
1 2 3 4 5
0,04
μmol/min
0,05
μmol/min
0,05
μmol/min
0,08
μmol/min
0,06
μmol/min
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 38
příklad:
Do reakční směsi bylo pipetováno 0,2 ml enzymu, 0,8 ml vody, 1 ml pufru (koncentrace 0,4 mol/l) a 2
ml roztoku substrátu (koncentrace 20 mmol/l). Vypočtěte výslednou koncentraci pufru a substrátu
v reakční směsi.
Enzymová reakce ve výše popsané reakční směsi byla zastavena přídavkem 1 ml kyseliny octové.
Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 2.103
mol-1
.l.cm-1
, délka optické dráhy =
1 cm) byla 0,2. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 10 minut? (vyjádřete
v μmol/min)
Jaké látkové množství nespotřebovaného substrátu zbylo ve výše popsané reakční směsi po skončení
reakce? (reakční stechiometrie = S ─> P)
řešení:
celkový objem reakční směsi: 0,2 + 0,8 + 1 + 2 = 4 ml
ředění pufru: 4 x (4 : 1 = 4)
výsledná koncentrace pufru: 0,4 : 4 = 0,1 mol/l
ředění substrátu: 2 x (4 : 2 = 2)
výsledná koncentrace substrátu: 10 mmol/l
objem směsi pro fotometrii (po přídavku kyseliny octové): 4 + 1 = 5 ml
koncentrace produktu ve směsi: c = A/(ε .l)
c = 0,2/(2.103
. 1) = 0,1.10-3
mol/l = 0,1 mmol/l
látkové množství produktu ve směsi: 0,1 mmol v 1 l směsi = 0,1 μmol v 1 ml směsi =
= 0,1 . 5 = 0,5 μmol v 5 ml směsi
aktivita enzymu (rychlost enzymové reakce) = 0,5 : 10 = 0,05 μmol/min
koncentrace substrátu v reakční směsi: 10 mmol/l = 10 μmol/ml
objem reakční směsi: 4 ml
látkové množství substrátu v reakční směsi na počátku reakce: 40 μmol
látkové množství substrátu v reakční směsi na konci reakce: 40 – 0,5 = 39,5 μmol
příklady:
1) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,1 ml enzymu, 0,9 ml vody, 2 ml pufru (koncentrace 0,3 mol/l) a
1 ml roztoku substrátu (koncentrace 40 mmol/l). Vypočtěte výslednou koncentraci pufru a substrátu
v reakční směsi.
Enzymová reakce ve výše popsané reakční směsi byla zastavena přídavkem 1 ml kyseliny octové.
Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 5.103
mol-1
.l.cm-1
, délka optické dráhy =
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 39
1 cm) byla 0,4. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 5 minut? (vyjádřete
v μmol/min)
Jaké látkové množství nespotřebovaného substrátu zbylo ve výše popsané reakční směsi po skončení
reakce? (reakční stechiometrie = S ─> P)
2) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,3 ml enzymu, 0,7 ml vody, 2 ml pufru (koncentrace 0,5 mol/l) a
1 ml roztoku substrátu (koncentrace 60 mmol/l). Vypočtěte výslednou koncentraci pufru a substrátu
v reakční směsi.
Enzymová reakce ve výše popsané reakční směsi byla zastavena přídavkem 1 ml kyseliny octové.
Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 8.103
mol-1
.l.cm-1
, délka optické dráhy =
1 cm) byla 0,4. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 5 minut? (vyjádřete
v μmol/min)
Jaké látkové množství nespotřebovaného substrátu zbylo ve výše popsané reakční směsi po skončení
reakce? (reakční stechiometrie = S ─> P)
3) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,1 ml enzymu, 0,9 ml vody, 2 ml pufru (koncentrace 0,2 mol/l) a
1 ml roztoku substrátu (koncentrace 40 mmol/l). Vypočtěte výslednou koncentraci pufru a substrátu
v reakční směsi.
Enzymová reakce ve výše popsané reakční směsi byla zastavena přídavkem 1 ml kyseliny octové.
Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 2,5.103
mol-1
.l.cm-1
, délka optické dráhy
= 1 cm) byla 0,4. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 20 minut? (vyjádřete
v μmol/min)
Jaké látkové množství nespotřebovaného substrátu zbylo ve výše popsané reakční směsi po skončení
reakce? (reakční stechiometrie = S ─> P)
4) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,2 ml enzymu, 0,8 ml vody, 1 ml pufru (koncentrace 0,2 mol/l) a
2 ml roztoku substrátu (koncentrace 30 mmol/l). Vypočtěte výslednou koncentraci pufru a substrátu
v reakční směsi.
Enzymová reakce ve výše popsané reakční směsi byla zastavena přídavkem 1 ml kyseliny octové.
Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 5.103
mol-1
.l.cm-1
, délka optické dráhy =
1 cm) byla 0,8. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 10 minut? (vyjádřete
v μmol/min)
Jaké látkové množství nespotřebovaného substrátu zbylo ve výše popsané reakční směsi po skončení
reakce? (reakční stechiometrie = S ─> P)
5) Do reakční směsi bylo pipetováno 0,3 ml enzymu, 0,7 ml vody, 2 ml pufru (koncentrace 0,1 mol/l) a
1 ml roztoku substrátu (koncentrace 50 mmol/l). Vypočtěte výslednou koncentraci pufru a substrátu
v reakční směsi.
Enzymová reakce ve výše popsané reakční směsi byla zastavena přídavkem 1 ml kyseliny octové.
Absorbance směsi obsahující produkt (absorpční koeficient = 4.103
mol-1
.l.cm-1
, délka optické dráhy =
1 cm) byla 0,6. Jaká byla aktivita enzymu, jestliže reakce probíhala po dobu 5 minut? (vyjádřete
v μmol/min)
Jaké látkové množství nespotřebovaného substrátu zbylo ve výše popsané reakční směsi po skončení
reakce? (reakční stechiometrie = S ─> P)
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 40
řešení:
1 2 3 4 5
0,15 M
10 mM
0,25 M
15 mM
0,1 M
10 mM
0,05 M
15 mM
0,05 M
12,5 mM
0,08
μmol/min
0,05
μmol/min
0,04
μmol/min
0,08
μmol/min
0,15
μmol/min
39,6 μmol 59,75 μmol 39,2 μmol 59,2 μmol 49,25 μmol
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 41
příklad:
2 ml slin zředíme v odměrné baňce na objem 50 ml. Do zkumavky pipetujeme 2 ml zředěných slin, 1
ml roztoku škrobu a 1 ml pufru. Ve vzorku stanovíme aktivitu amylasy 5 nkat. Jaká je specifická aktivita
amylasy ve slinách?
řešení:
ředění slin: 25 x (50 : 2 = 25)
aktivita 2 ml ředěných slin: 5 nkat =>
aktivita 1 ml ředěných slin: 2,5 nkat
specifická aktivita neředěných slin: 2,5 . 25 = 62,5 nkat/ml
příklady:
1) 4 ml slin zředíme v odměrné baňce na objem 50 ml. Do zkumavky pipetujeme 1 ml zředěných slin,
1 ml roztoku škrobu a 2 ml pufru. Ve vzorku stanovíme aktivitu amylasy 8 nkat. Jaká je specifická
aktivita amylasy ve slinách?
2) 2,5 ml slin zředíme v odměrné baňce na objem 50 ml. Do zkumavky pipetujeme 2 ml zředěných slin,
1 ml roztoku škrobu a 2 ml pufru. Ve vzorku stanovíme aktivitu amylasy 4 nkat. Jaká je specifická
aktivita amylasy ve slinách?
3) 4 ml slin zředíme v odměrné baňce na objem 25 ml. Do zkumavky pipetujeme 1 ml zředěných slin,
1 ml roztoku škrobu a 2 ml pufru. Ve vzorku stanovíme aktivitu amylasy 12 nkat. Jaká je specifická
aktivita amylasy ve slinách?
4) 5 ml slin zředíme v odměrné baňce na objem 100 ml. Do zkumavky pipetujeme 2 ml zředěných slin,
1 ml roztoku škrobu a 2 ml pufru. Ve vzorku stanovíme aktivitu amylasy 15 nkat. Jaká je specifická
aktivita amylasy ve slinách?
5) 2 ml slin zředíme v odměrné baňce na objem 100 ml. Do zkumavky pipetujeme 1 ml zředěných slin,
1 ml roztoku škrobu a 2 ml pufru. Ve vzorku stanovíme aktivitu amylasy 1,5 nkat. Jaká je specifická
aktivita amylasy ve slinách?
řešení:
1 2 3 4 5
100 nkat/ml 40
nkat/ml
75
nkat/ml
150 nkat/ml 75
nkat/ml
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 42
příklad:
Do měřící nádobky byl napipetován pufr, substrát a 10 μl suspenze buněk. Spotřeba kyslíku byla 8
nmol/min. Vypočtěte specifickou oxidasovou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti),
jestliže suchá hmotnost buněk byla 40 mg/ml suspenze.
řešení:
suchá hmotnost buněk: 40 mg/ml suspenze = 4 mg/100 μl suspenze = 0,4 mg/10 μl suspenze
specifická oxidasová aktivita buněk: 8 : 0,4 = 20 nmol.min-1
.mg-1
příklady:
1) Do měřící nádobky byl napipetován pufr, substrát a 50 μl suspenze buněk. Spotřeba kyslíku byla 20
nmol/min. Vypočtěte specifickou oxidasovou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti),
jestliže suchá hmotnost buněk byla 100 mg/ml suspenze.
2) Do měřící nádobky byl napipetován pufr, substrát a 25 μl suspenze buněk. Spotřeba kyslíku byla 10
nmol/min. Vypočtěte specifickou oxidasovou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti),
jestliže suchá hmotnost buněk byla 50 mg/ml suspenze.
3) Do měřící nádobky byl napipetován pufr, substrát a 100 μl suspenze buněk. Spotřeba kyslíku byla 30
nmol/min. Vypočtěte specifickou oxidasovou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti),
jestliže suchá hmotnost buněk byla 25 mg/ml suspenze.
4) Do měřící nádobky byl napipetován pufr, substrát a 40 μl suspenze buněk. Spotřeba kyslíku byla 10
nmol/min. Vypočtěte specifickou oxidasovou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti),
jestliže suchá hmotnost buněk byla 20 mg/ml suspenze.
5) Do měřící nádobky byl napipetován pufr, substrát a 20 μl suspenze buněk. Spotřeba kyslíku byla 20
nmol/min. Vypočtěte specifickou oxidasovou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti),
jestliže suchá hmotnost buněk byla 40 mg/ml suspenze.
řešení:
1 2 3 4 5
4
nmol.min-1
.mg-1
8
nmol.min-1
.mg-1
12
nmol.min-1
.mg-1
12,5
nmol.min-1
.mg-1
25
nmol.min-1
.mg-1
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 43
příklad:
200 mg kvasnic bylo rozsuspendováno v 10 ml pufru, Z této suspenze bylo odebráno 0,25 ml a
doplněno na objem 20 ml. Ze zředěné suspenze bylo dále odebráno 1,2 ml ke stanovení enzymové
aktivity sacharasy. Kolik miligramů kvasnic bylo odebráno?
Bylo zjištěno, že během sacharasové reakce trvající 5 minut vzniklo 30 μmolů reakčního produktu. Jaká
byla aktivita sacharasy ve vzorku (vyjádřete a) jako rychlost vzniku produktů – redukujících sacharidů,
b) jako rychlost úbytku substrátu; jednotky času ponechejte v minutách)?
Jaká byla specifická aktivita sacharasy v kvasnicích (vyjádřete jako rychlost vzniku produktu a jako
rychlost úbytku substrátu, jednotky času ponechejte v minutách) za výše uvedených podmínek?
řešení:
koncentrace neředěné suspenze kvasnic: 200 mg v 10 ml pufru = 200 : 10 = 20 mg/ml
ředění suspenze kvasnic: 80 x (20 : 0,25 = 80)
koncentrace ředěné suspenze: 20 : 80 = 0,25 mg/ml
hmotnost odebraných kvasnic: 0,25 . 1,2 = 0,3 mg
stechiometrie sacharasové reakce: S → 2 P
rychlost reakce (vznik produktu): 30 : 5 = 6 μmol/min
rychlost reakce (úbytek substrátu): 6 : 2 = 3 μmol/min
specifická aktivita sacharasy (vznik produktu): 6 : 0,3 = 20 μmol.min-1
.mg-1
specifická aktivita sacharasy (úbytek substrátu): 3 : 0,3 = 10 μmol.min-1
.mg-1
příklady:
1) 150 mg kvasnic bylo rozsuspendováno v 5 ml pufru, Z této suspenze bylo odebráno 0,2 ml a
doplněno na objem 40 ml. Ze zředěné suspenze byly dále odebrány 2 ml ke stanovení enzymové
aktivity sacharasy. Kolik miligramů kvasnic bylo odebráno?
Bylo zjištěno, že během sacharasové reakce trvající 3 minuty vzniklo 90 μmolů reakčního produktu.
Jaká byla aktivita sacharasy ve vzorku (vyjádřete a) jako rychlost vzniku produktů – redukujících
sacharidů, b) jako rychlost úbytku substrátu; jednotky času ponechejte v minutách)?
Jaká byla specifická aktivita sacharasy v kvasnicích (vyjádřete jako rychlost vzniku produktu a jako
rychlost úbytku substrátu, jednotky času ponechejte v minutách) za výše uvedených podmínek?
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 44
2) 100 mg kvasnic bylo rozsuspendováno ve 20 ml pufru, Z této suspenze bylo odebráno 5 ml a
doplněno na objem 25 ml. Ze zředěné suspenze byl dále odebrán 2,5 ml ke stanovení enzymové aktivity
sacharasy. Kolik miligramů kvasnic bylo odebráno?
Bylo zjištěno, že během sacharasové reakce trvající 5 minut vzniklo 75 μmolů reakčního produktu. Jaká
byla aktivita sacharasy ve vzorku (vyjádřete a) jako rychlost vzniku produktů – redukujících sacharidů,
b) jako rychlost úbytku substrátu; jednotky času ponechejte v minutách)?
Jaká byla specifická aktivita sacharasy v kvasnicích (vyjádřete jako rychlost vzniku produktu a jako
rychlost úbytku substrátu, jednotky času ponechejte v minutách) za výše uvedených podmínek ?
3) 250 mg kvasnic bylo rozsuspendováno v 50 ml pufru, Z této suspenze bylo odebráno 0,5 ml a
doplněno na objem 10 ml. Ze zředěné suspenze byly dále odebrány 2 ml ke stanovení enzymové
aktivity sacharasy. Kolik miligramů kvasnic bylo odebráno?
Bylo zjištěno, že během sacharasové reakce trvající 12 minut vzniklo 300 μmolů reakčního produktu.
Jaká byla aktivita sacharasy ve vzorku (vyjádřete a) jako rychlost vzniku produktů – redukujících
sacharidů, b) jako rychlost úbytku substrátu; jednotky času ponechejte v minutách)?
Jaká byla specifická aktivita sacharasy v kvasnicích (vyjádřete jako rychlost vzniku produktu a jako
rychlost úbytku substrátu, jednotky času ponechejte v minutách) za výše uvedených podmínek?
4) 80 mg kvasnic bylo rozsuspendováno v 5 ml pufru, Z této suspenze bylo odebráno 1,5 ml a doplněno
na objem 20 ml. Ze zředěné suspenze byl dále odebrán 1,5 ml ke stanovení enzymové aktivity
sacharasy. Kolik miligramů kvasnic bylo odebráno?
Bylo zjištěno, že během sacharasové reakce trvající 5 minut vzniklo 90 μmolů reakčního produktu. Jaká
byla aktivita sacharasy ve vzorku (vyjádřete a) jako rychlost vzniku produktů – redukujících sacharidů,
b) jako rychlost úbytku substrátu; jednotky času ponechejte v minutách)?
Jaká byla specifická aktivita sacharasy v kvasnicích (vyjádřete jako rychlost vzniku produktu a jako
rychlost úbytku substrátu, jednotky času ponechejte v minutách) za výše uvedených podmínek?
5) 50 mg kvasnic bylo rozsuspendováno ve 4 ml pufru, Z této suspenze bylo odebráno 0,4 ml a
doplněno na objem 25 ml. Ze zředěné suspenze bylo dále odebráno 2,5 ml ke stanovení enzymové
aktivity sacharasy. Kolik miligramů kvasnic bylo odebráno?
Bylo zjištěno, že během sacharasové reakce trvající 4 minuty vzniklo 52 μmolů reakčního produktu.
Jaká byla aktivita sacharasy ve vzorku (vyjádřete a) jako rychlost vzniku produktů – redukujících
sacharidů, b) jako rychlost úbytku substrátu; jednotky času ponechejte v minutách)?
Jaká byla specifická aktivita sacharasy v kvasnicích (vyjádřete jako rychlost vzniku produktu a jako
rychlost úbytku substrátu, jednotky času ponechejte v minutách) za výše uvedených podmínek?
řešení:
1 2 3 4 5
0,3 mg 2,5 mg 0,5 mg 1,8 mg 0,5 mg
30; 15
μmol/min
15; 7,5
μmol/min
25; 12,5 μmol/min 18; 9
μmol/min
13; 6,5
μmol/min
100; 50
μmol.min-1
.mg-1
6; 3
μmol.min-1
.mg-1
50; 25
μmol.min-1
.mg-1
10; 5
μmol.min-1
.mg-1
26; 13
μmol.min-1
.mg-1
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 45
příklad:
1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení absorbanci
0,3. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za stejných
podmínek absorbanci 0,45?
Určete specifickou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti buněk), jestliže 10 μl suspenze
buněk vytvořilo toto množství produktu za 15 minut. Suchá hmotnost buněk byla 80 mg/ml suspenze.
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
1 mmol/l roztok poskytuje absorbanci 0,3 => absorbanci 0,45 poskytuje 1,5 mmol/l roztok
látkové množství produktu: 1,5 mmol v 1 l roztoku = 1,5 μmol v 1 ml roztoku =
= 3 μmol ve 2 ml roztoku
aktivita buněk: 3 : 15 = 0,2 μmol/min
suchá hmotnost buněk: 80 mg/ ml suspenze = 8 mg/100 μl suspenze = 0,8 mg/ 10 μl suspenze
specifická aktivita buněk: 0,2 : 0,8 = 0,25 μmol.min-1
.mg-1
příklady:
1) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,2. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,8?
Určete specifickou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti buněk), jestliže 40 μl suspenze
buněk vytvořilo toto množství produktu za 10 minut. Suchá hmotnost buněk byla 50 mg/ml suspenze.
2) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,5. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,3?
Určete specifickou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti buněk), jestliže 20 μl suspenze
buněk vytvořilo toto množství produktu za 6 minut. Suchá hmotnost buněk byla 40 mg/ml suspenze.
3) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,4. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,25?
Určete specifickou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti buněk), jestliže 50 μl suspenze
buněk vytvořilo toto množství produktu za 5 minut. Suchá hmotnost buněk byla 25 mg/ml suspenze.
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 46
4) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,25. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,75?
Určete specifickou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti buněk), jestliže 20 μl suspenze
buněk vytvořilo toto množství produktu za 15 minut. Suchá hmotnost buněk byla 40 mg/ml suspenze.
5) 1 mmol/l roztok produktu enzymové reakce poskytuje za standardních podmínek stanovení
absorbanci 0,3. Jaké látkové množství produktu vzniklo v kyvetě o objemu 2 ml, jestliže poskytl za
stejných podmínek absorbanci 0,75?
Určete specifickou aktivitu buněk (vztaženou na mg suché hmotnosti buněk), jestliže 20 μl suspenze
buněk vytvořilo toto množství produktu za 20 minut. Suchá hmotnost buněk byla 25 mg/ml suspenze.
řešení:
1 2 3 4 5
8 μmol 1,2 μmol 1,25 μmol 6 μmol 5 μmol
0,4
μmol.min-1
.mg-1
0,25
μmol.min-1
.mg-1
0,2
μmol.min-1
.mg-1
0,5
μmol.min-1
.mg-1
0,5
μmol.min-1
.mg-1
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 47
příklad:
Vypočtěte koncentraci produktu enzymové reakce, jestliže absorbance jeho roztoku v kyvetě
s optickou dráhou 1 cm je 0,8 a absorpční koeficient 5.103
l.mol-1
.cm-1
.
Vypočtěte vzniklé látkové množství tohoto produktu, jestliže objem reakční směsi byl 3 ml.
Vypočtěte rychlost enzymové reakce (μmol/min), jestliže látkové množství produktu vzniklo v reakční
směsi po 4 minutách enzymové reakce.
Vypočtěte specifickou aktivitu enzymového preparátu vztaženou na 1 ml preparátu, jestliže objem
enzymového preparátu v reakční směsi byl 0,5 ml.
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) c = A/(l . ε)
koncentrace produktu: 0,8/(5.103
. 1) = 0,16.10-3
mol/l = 0,16 mmol/l
látkové množství produktu: 0,16 mmol v 1 l reakční směsi = 0,16 μmol v 1 ml reakční směsi
= 0,16 . 3 = 0,48 μmol ve 3 ml reakční směsi
rychlost enzymové reakce: 0,48 : 4 = 0,12 μmol/min
specifická aktivita enzymu: 0,12 : 0,5 = 0,24 μmol.min-1
.ml-1
příklady:
1) Vypočtěte koncentraci produktu enzymové reakce, jestliže absorbance jeho roztoku v kyvetě
s optickou dráhou 1 cm je 0,4 a absorpční koeficient 2.103
l.mol-1
.cm-1
.
Vypočtěte vzniklé látkové množství tohoto produktu, jestliže objem reakční směsi byl 3 ml.
Vypočtěte rychlost enzymové reakce (μmol/min), jestliže látkové množství produktu vzniklo v reakční
směsi po 5 minutách enzymové reakce.
Vypočtěte specifickou aktivitu enzymového preparátu vztaženou na 1 ml preparátu, jestliže objem
enzymového preparátu v reakční směsi byl 0,2 ml.
2) Vypočtěte koncentraci produktu enzymové reakce, jestliže absorbance jeho roztoku v kyvetě
s optickou dráhou 1 cm je 0,6 a absorpční koeficient 4.103
l.mol-1
.cm-1
.
Vypočtěte vzniklé látkové množství tohoto produktu, jestliže objem reakční směsi byl 2 ml.
Vypočtěte rychlost enzymové reakce (μmol/min), jestliže látkové množství produktu vzniklo v reakční
směsi po 6 minutách enzymové reakce.
Vypočtěte specifickou aktivitu enzymového preparátu vztaženou na 1 ml preparátu, jestliže objem
enzymového preparátu v reakční směsi byl 0,1 ml.
3) Vypočtěte koncentraci produktu enzymové reakce, jestliže absorbance jeho roztoku v kyvetě
s optickou dráhou 1 cm je 0,5 a absorpční koeficient 2,5.103
l.mol-1
.cm-1
.
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 48
Vypočtěte vzniklé látkové množství tohoto produktu, jestliže objem reakční směsi byl 4 ml.
Vypočtěte rychlost enzymové reakce (μmol/min), jestliže látkové množství produktu vzniklo v reakční
směsi po 8 minutách enzymové reakce.
Vypočtěte specifickou aktivitu enzymového preparátu vztaženou na 1 ml preparátu, jestliže objem
enzymového preparátu v reakční směsi byl 0,25 ml.
4) Vypočtěte koncentraci produktu enzymové reakce, jestliže absorbance jeho roztoku v kyvetě
s optickou dráhou 1 cm je 0,25 a absorpční koeficient 5.103
l.mol-1
.cm-1
.
Vypočtěte vzniklé látkové množství tohoto produktu, jestliže objem reakční směsi byl 5 ml.
Vypočtěte rychlost enzymové reakce (μmol/min), jestliže látkové množství produktu vzniklo v reakční
směsi po 5 minutách enzymové reakce.
Vypočtěte specifickou aktivitu enzymového preparátu vztaženou na 1 ml preparátu, jestliže objem
enzymového preparátu v reakční směsi byl 0,2 ml.
5) Vypočtěte koncentraci produktu enzymové reakce, jestliže absorbance jeho roztoku v kyvetě
s optickou dráhou 1 cm je 0,75 a absorpční koeficient 2,5.103
l.mol-1
.cm-1
.
Vypočtěte vzniklé látkové množství tohoto produktu, jestliže objem reakční směsi byl 2 ml.
Vypočtěte rychlost enzymové reakce (μmol/min), jestliže látkové množství produktu vzniklo v reakční
směsi po 10 minutách enzymové reakce.
Vypočtěte specifickou aktivitu enzymového preparátu vztaženou na 1 ml preparátu, jestliže objem
enzymového preparátu v reakční směsi byl 0,3 ml.
řešení:
1 2 3 4 5
0,2 mM 0,15 mM 0,2 mM 0,05 mM 0,3 mM
0,6 μmol 0,3 μmol 0,8 μmol 0,25 μmol 0,6 μmol
0,12 μmol/min 0,05 μmol/min 0,1 μmol/min 0,05 μmol/min 0,06 μmol/min
0,6
μmol.min-1
.ml-1
0,5
μmol.min-1
.ml-1
0,4
μmol.min-1
.ml-1
0,25
μmol.min-1
.ml-1
0,2
μmol.min-1
.ml-1
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 49
příklad:
Enzymová reakce probíhá rychlostí (vzniku produktu) 0,3 μmol/min. Jaká byla výsledná koncentrace
substrátu v reakční směsi, jestliže objem reakční směsi byl 2 ml, původní koncentrace substrátu 150
mmol/l a reakce probíhala po dobu 10 minut? (reakční stechiometrie: S → P)
Jaká byla absorbance vzorku po skončení reakce, je-li absorpční koeficient produktu 0,5.103
l.mol-1
.cm-
1
? (délka optické dráhy = 1 cm)
řešení:
látkové množství vzniklého produktu: 0,3 . 10 = 3 μmol
látkové množství substrátu na počátku reakce: 150 mmol v 1 l reakční směsi =
= 150 μmol v 1 ml reakční směsi =
= 300 μmol ve 2 ml reakční směsi
látkové množství substrátu na konci reakce: 300 - 3 = 297 μmol
koncentrace substrátu na konci reakce: 297 : 2 = 148,5 μmol/ml = 148,5 mmol/l
koncentrace produktu na konci reakce: 3 : 2 = 1,5 μmol/ml = 1,5 mmol/l = 1,5.10-3
mol/l
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon)
A = 1,5.10-3
. 1 . 0,5.103
= 0,75
příklady:
1) Enzymová reakce probíhá rychlostí (vzniku produktu) 0,5 μmol/min. Jaká byla výsledná koncentrace
substrátu v reakční směsi, jestliže objem reakční směsi byl 2 ml, původní koncentrace substrátu 100
mmol/l a reakce probíhala po dobu 10 minut? (reakční stechiometrie: S → P)
Jaká byla absorbance vzorku po skončení reakce, je-li absorpční koeficient produktu 0,4.103
l.mol-1
.cm-
1
? (délka optické dráhy = 1 cm)
2) Enzymová reakce probíhá rychlostí (vzniku produktu) 0,1 μmol/min. Jaká byla výsledná koncentrace
substrátu v reakční směsi, jestliže objem reakční směsi byl 2,5 ml, původní koncentrace substrátu 200
mmol/l a reakce probíhala po dobu 5 minut? (reakční stechiometrie: S → P)
Jaká byla absorbance vzorku po skončení reakce, je-li absorpční koeficient produktu 2.103
l.mol-1
.cm-1
?
(délka optické dráhy = 1 cm)
3) Enzymová reakce probíhá rychlostí (vzniku produktu) 0,2 μmol/min. Jaká byla výsledná koncentrace
substrátu v reakční směsi, jestliže objem reakční směsi byl 4 ml, původní koncentrace substrátu 150
mmol/l a reakce probíhala po dobu 5 minut? (reakční stechiometrie: S → P)
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 50
Jaká byla absorbance vzorku po skončení reakce, je-li absorpční koeficient produktu 3.103
l.mol-1
.cm-1
?
(délka optické dráhy = 1 cm)
4) Enzymová reakce probíhá rychlostí (vzniku produktu) 0,4 μmol/min. Jaká byla výsledná koncentrace
substrátu v reakční směsi, jestliže objem reakční směsi byl 4 ml, původní koncentrace substrátu 250
mmol/l a reakce probíhala po dobu 5 minut? (reakční stechiometrie: S → P)
Jaká byla absorbance vzorku po skončení reakce, je-li absorpční koeficient produktu 103
l.mol-1
.cm-1
?
(délka optické dráhy = 1 cm)
5) Enzymová reakce probíhá rychlostí (vzniku produktu) 0,25 μmol/min. Jaká byla výsledná
koncentrace substrátu v reakční směsi, jestliže objem reakční směsi byl 2,5 ml, původní koncentrace
substrátu 80 mmol/l a reakce probíhala po dobu 8 minut? (reakční stechiometrie: S → P)
Jaká byla absorbance vzorku po skončení reakce, je-li absorpční koeficient produktu 2,5.103
l.mol-1
.cm-
1
? (délka optické dráhy = 1 cm)
řešení:
1 2 3 4 5
97,5 mmol/l 199,8 mmol/l 149,75 mmol/l 249,5mmol/l 79,2mmol/l
1 0,4 0,75 0,5 2
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 51
příklad:
Jaký objem 5 mol/l KOH je nutno přidat ke 100 ml 20 mol/l H2SO4 k její neutralizaci?
řešení:
2 KOH + H2SO4 → K2SO4 + 2 H2O
stechiometrie: 2 (mol) + 1 (mol)
látkové množství reagující H2SO4:
1 l roztoku obsahuje 20 mol
100 ml roztoku obsahuje 2 mol
potřebné látkové množství reagujícího KOH: 4 mol
objem reagujícího KOH: 1 l roztoku obsahuje 5 molů=> 4 mol jsou obsaženy v 0,8 l (800 ml) roztoku
příklady:
1) Jaký objem 10 mol/l NaOH je nutno přidat k 50 ml 25 mol/l H2SO4 k její neutralizaci?
2) Jaký objem 10 mol/l KOH je nutno přidat ke 200 ml 20 mol/l H2SO4 k její neutralizaci?
3) Jaký objem 5 mol/l NaOH je nutno přidat ke 40 ml 10 mol/l H2SO4 k její neutralizaci?
4) Jaký objem 10 mol/l KOH je nutno přidat ke 150 ml 25 mol/l H2SO4 k její neutralizaci?
5) Jaký objem 5 mol/l NaOH je nutno přidat ke 150 ml 10 mol/l H2SO4 k její neutralizaci?
řešení:
1 2 3 4 5
250 ml 800 ml 160 ml 750 ml 600 ml
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 52
příklad:
Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 1:1. Jaké bylo
množství látky v roztoku, jestliže spotřeba 0,025 mol/l titračního činidla byla 8 ml?
řešení:
koncentrace titračního činidla = 0,025 mol/l = 25 mmol/l = 25 μmol/ml
látkové množství činidla obsažené v 1 ml: 25 μmol
látkové množství činidla obsažené v 8 ml: 25 . 8 = 200 μmol = 0,2 mmol
stechiometrie reakce = 1:1 => množství stanovované látky v roztoku = 0,2 mmol
příklady:
1) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 1:1. Jaké bylo
množství látky v roztoku, jestliže spotřeba 0,05 mol/l titračního činidla byla 10 ml?
2) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 1:1. Jaké bylo
množství látky v roztoku, jestliže spotřeba 0,01 mol/l titračního činidla byla 20 ml?
3) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 1:1. Jaké bylo
množství látky v roztoku, jestliže spotřeba 0,02 mol/l titračního činidla byla 5 ml?
4) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 1:1. Jaké bylo
množství látky v roztoku, jestliže spotřeba 0,04 mol/l titračního činidla byla 5 ml?
5) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 1:1. Jaké bylo
množství látky v roztoku, jestliže spotřeba 0,075 mmol/l titračního činidla byla 20 ml?
řešení:
1 2 3 4 5
0,5 mmol 0,2 mmol 0,1 mmol 0,2 mmol 1,5 mmol
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 53
příklad:
Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 2:1. Jaká byla
koncentrace látky v roztoku o objemu 20 ml, jestliže spotřeba 0,04 mol/l titračního činidla byla 5 ml?
řešení:
koncentrace titračního činidla = 0,04 mol/l = 40 mmol/l = 40 μmol/ml
látkové množství činidla obsažené v 1 ml: 40 μmol
látkové množství činidla obsažené v 5 ml: 40 . 5 = 200 μmol = 0,2 mmol
stechiometrie reakce = 2:1 => množství stanovované látky v roztoku = 0,4 mmol
koncentrace stanovované látky:
0,4 mmol v objemu 20 ml = 0,4/20 = 0,02 mmol/ml = 0,02 mol/l = 20 mmol/l
příklady:
1) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 2:1. Jaká byla
koncentrace látky v roztoku o objemu 5 ml, jestliže spotřeba 0,05 mol/l titračního činidla byla 10 ml?
2) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 2:1. Jaká byla
koncentrace látky v roztoku o objemu 10 ml, jestliže spotřeba 0,01 mol/l titračního činidla byla 5 ml?
3) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 2:1. Jaká byla
koncentrace látky v roztoku o objemu 5 ml, jestliže spotřeba 0,02 mol/l titračního činidla byla 5 ml?
4) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 2:1. Jaká byla
koncentrace látky v roztoku o objemu 10 ml, jestliže spotřeba 0,025 mol/l titračního činidla byla 8 ml?
5) Při titraci reagovala stanovovaná látka a titrační činidlo ve stechiometrickém poměru 2:1. Jaká byla
koncentrace látky v roztoku o objemu 15 ml, jestliže spotřeba 0,075 mol/l titračního činidla byla 10 ml?
řešení:
1 2 3 4 5
200 mmol/l 10 mmol/l 40 mmol/l 40 mmol/l 100 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 54
příklad:
Jaká je hmotnost 15 μmolů látky s relativní molekulovou hmotností 40?
řešení:
1 mol látky má hmotnost 40 g
1 μmol látky má hmotnost 40 μg
15 μmol látky má hmotnost 40 . 15 = 600 μg
příklady:
1) Jaká je hmotnost 6 μmolů látky s relativní molekulovou hmotností 30?
2) Jaká je hmotnost 5 μmolů látky s relativní molekulovou hmotností 60?
3) Jaká je hmotnost 4 μmolů látky s relativní molekulovou hmotností 75?
4) Jaká je hmotnost 12 μmolů látky s relativní molekulovou hmotností 25?
5) Jaká je hmotnost 8 μmolů látky s relativní molekulovou hmotností 20?
řešení:
1 2 3 4 5
180 μg 300 μg 300 μg 300 μg 160 μg
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 55
příklad:
Relativní molekulová hmotnost nukleotidu je 350, relativní molekulová hmotnost kyseliny fosforečné
je 98. Jaký je hmotnostní zlomek (%) kyseliny fosforečné v nukleotidu?
řešení:
350 ...... 100 %
98 ....... x %
x : 100 = 98 :350
x = 9800 : 350 = 28 %
příklady:
1) Relativní molekulová hmotnost nukleotidu je 392, relativní molekulová hmotnost kyseliny
fosforečné je 98. Jaký je hmotnostní zlomek (%) kyseliny fosforečné v nukleotidu?
2) Relativní molekulová hmotnost nukleotidu je 280, relativní molekulová hmotnost kyseliny
fosforečné je 98. Jaký je hmotnostní zlomek (%) kyseliny fosforečné v nukleotidu?
3) Relativní molekulová hmotnost nukleotidu je 392, relativní molekulová hmotnost kyseliny
fosforečné je 98. Jaký je hmotnostní zlomek (%) kyseliny fosforečné v nukleotidu?
4) Relativní molekulová hmotnost nukleotidu je 350, relativní molekulová hmotnost kyseliny
fosforečné je 98. Jaký je hmotnostní zlomek (%) kyseliny fosforečné v nukleotidu?
5) Relativní molekulová hmotnost nukleotidu je 280, relativní molekulová hmotnost kyseliny
fosforečné je 98. Jaký je hmotnostní zlomek (%) kyseliny fosforečné v nukleotidu?
řešení:
1 2 3 4 5
25 % 35 % 25 % 28 % 35 %
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 56
příklad:
10 mg nukleové kyseliny bylo rozpuštěno v 50 ml fyziologického roztoku. K fotometrickému stanovení
kyseliny fosforečné byl odebrán 1 ml takto zředěného vzorku nukleové kyseliny, který poskytl
absorbanci 0,2. Absorbance standardního roztoku kyseliny fosforečné (0,2 mg/ml) byla 0,5. Vypočtěte
hmotnostní zlomek kyseliny fosforečné v nukleové kyselině.
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
absorbance standardního roztoku kyseliny fosforečné (0,2 mg/ml reakční směsi) = 0,5 =>
vzorek poskytující absorbanci 0,2 má koncentraci kyseliny fosforečné 0,08 mg/ml
ředění nukleové kyseliny: 10 mg do 50 ml roztoku, koncentrace = 10/50 = 0,2 mg/ml
vzorek obsahuje 0,2 mg/ml nukleové kyseliny ......... 100 %
0,08 mg/ml kyseliny fosforečné ....... x %
x : 100 = 0,08 : 0,2
x = 8 : 0,2 = 40 %
příklady:
1) 10 mg nukleové kyseliny bylo rozpuštěno ve 25 ml fyziologického roztoku.
K fotometrickému stanovení kyseliny fosforečné byl odebrán 1 ml takto zředěného vzorku nukleové
kyseliny, který poskytl absorbanci 0,2. Absorbance standardního roztoku kyseliny fosforečné (0,2
mg/ml) byla 0,5. Vypočtěte hmotnostní zlomek kyseliny fosforečné v nukleové kyselině.
2) 8 mg nukleové kyseliny bylo rozpuštěno ve 20 ml fyziologického roztoku. K fotometrickému
stanovení kyseliny fosforečné byl odebrán 1 ml takto zředěného vzorku nukleové kyseliny, který
poskytl absorbanci 0,3. Absorbance standardního roztoku kyseliny fosforečné (0,2 mg/ml) byla 0,6.
Vypočtěte hmotnostní zlomek kyseliny fosforečné v nukleové kyselině.
3) 5 mg nukleové kyseliny bylo rozpuštěno v 10 ml fyziologického roztoku. K fotometrickému stanovení
kyseliny fosforečné byl odebrán 1 ml takto zředěného vzorku nukleové kyseliny, který poskytl
absorbanci 0,25. Absorbance standardního roztoku kyseliny fosforečné (0,2 mg/ml) byla 0,5. Vypočtěte
hmotnostní zlomek kyseliny fosforečné v nukleové kyselině.
4) 10 mg nukleové kyseliny bylo rozpuštěno ve 20 ml fyziologického roztoku. K fotometrickému
stanovení kyseliny fosforečné byl odebrán 1 ml takto zředěného vzorku nukleové kyseliny, který
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 57
poskytl absorbanci 0,15. Absorbance standardního roztoku kyseliny fosforečné (0,2 mg/ml) byla 0,3.
Vypočtěte hmotnostní zlomek kyseliny fosforečné v nukleové kyselině.
5) 10 mg nukleové kyseliny bylo rozpuštěno ve 25 ml fyziologického roztoku. K fotometrickému
stanovení kyseliny fosforečné byl odebrán 1 ml takto zředěného vzorku nukleové kyseliny, který
poskytl absorbanci 0,25. Absorbance standardního roztoku kyseliny fosforečné (0,2 mg/ml) byla 0,5.
Vypočtěte hmotnostní zlomek kyseliny fosforečné v nukleové kyselině.
řešení:
1 2 3 4 5
20 % 25 % 20 % 20 % 25 %
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 58
příklad:
8 mmol/l roztok látky poskytl po enzymové reakci absorbanci 0,6 (délka optické dráhy = 1 cm). Určete
procento konverze látky, jestliže je absorpční koeficient jejího produktu 3.103
mol-1
.l.cm-1
.
řešení:
c = A/(ε .l)
koncentrace produktu: 0,6/(3.103
. 1) = 0,2.10-3
mol/l = 0,2 mmol/l
8 mmol/l ....... konverze látky na produkt = 100 %
0,2 mmol/l ....... konverze látky na produkt = x %
x : 100 = 0,2 : 8
x = 20 : 8 = 2,5 %
příklady:
1) 2 mmol/l roztok látky poskytl po enzymové reakci absorbanci 0,25 (délka optické dráhy = 1 cm).
Určete procento konverze látky, jestliže je absorpční koeficient jejího produktu 5.103
mol-1
.l.cm-1
.
2) 2,5 mmol/l roztok látky poskytl po enzymové reakci absorbanci 0,8 (délka optické dráhy = 1 cm).
Určete procento konverze látky, jestliže je absorpční koeficient jejího produktu 104
mol-1
.l.cm-1
.
3) 3 mmol/l roztok látky poskytl po enzymové reakci absorbanci 0,6 (délka optické dráhy = 1 cm).
Určete procento konverze látky, jestliže je absorpční koeficient jejího produktu 2,5.103
mol-1
.l.cm-1
.
4) 4 mmol/l roztok látky poskytl po enzymové reakci absorbanci 0,8 (délka optické dráhy = 1 cm).
Určete procento konverze látky, jestliže je absorpční koeficient jejího produktu 2.103
mol-1
.l.cm-1
.
5) 5 mmol/l roztok látky poskytl po enzymové reakci absorbanci 0,45 (délka optické dráhy = 1 cm).
Určete procento konverze látky, jestliže je absorpční koeficient jejího produktu 6.103
mol-1
.l.cm-1
.
řešení:
1 2 3 4 5
2,5 % 3,2 % 8,0 % 10,0 % 1,5 %
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 59
příklad:
0,2 mmol/l roztok síranu amonného poskytl při stanovení Nesslerovým činidlem absorbanci 0,4. Jaká
byla koncentrace močoviny v neznámém vzorku, jestliže byla jeho absorbance 0,2 - za předpokladu,
že proběhla 80 % konverze močoviny?
řešení:
A = c . l . ε (Lambertův-Beerův zákon) A je přímo úměrná c
0,2 mmol/l roztok síranu amonného poskytuje absorbanci 0,4 => absorbanci 0,2 poskytuje
0,1 mmol/l roztok močoviny (stechiometrie reakce = 1:1)
0,1 mmol/l ....... konverze síranu amonného na močovinu = 80 %
x mmol/l ....... konverze síranu amonného na močovinu = 100 %
x : 0,1 = 100 : 80
x = 10 : 80 = 0,125 mmol/l (koncentrace močoviny v neznámém vzorku)
příklady:
1) 0,25 mmol/l roztok síranu amonného poskytl při stanovení Nesslerovým činidlem absorbanci 0,5.
Jaká byla koncentrace močoviny v neznámém vzorku, jestliže byla jeho absorbance 0,25 - za
předpokladu, že proběhla 50 % konverze močoviny?
2) 0,5 mmol/l roztok síranu amonného poskytl při stanovení Nesslerovým činidlem absorbanci 0,8. Jaká
byla koncentrace močoviny v neznámém vzorku, jestliže byla jeho absorbance 0,2 - za předpokladu,
že proběhla 25 % konverze močoviny?
3) 1 mmol/l roztok síranu amonného poskytl při stanovení Nesslerovým činidlem absorbanci 0,6. Jaká
byla koncentrace močoviny v neznámém vzorku, jestliže byla jeho absorbance 0,3 - za předpokladu,
že proběhla 80 % konverze močoviny?
4) 2,5 mmol/l roztok síranu amonného poskytl při stanovení Nesslerovým činidlem absorbanci 0,4. Jaká
byla koncentrace močoviny v neznámém vzorku, jestliže byla jeho absorbance 0,8 - za předpokladu,
že proběhla 40 % konverze močoviny?
5) 3 mmol/l roztok síranu amonného poskytl při stanovení Nesslerovým činidlem absorbanci 0,7. Jaká
byla koncentrace močoviny v neznámém vzorku, jestliže byla jeho absorbance 0,35 - za předpokladu,
že proběhla 60 % konverze močoviny?
řešení:
1 2 3 4 5
0,25 mmol/l 0,5 mmol/l 0,625 mmol/l 12,5 mmol/l 2,5 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 60
příklad:
Vypočtěte Rf látky, která doputovala 2 cm od startu. Čelo chromatogramu je vzdáleno 8 cm od startu.
řešení:
Rf (retenční faktor) = vzdálenost středu skvrny od startu / vzdálenost čela rozpouštědla
od startu
Rf = 2/8 = 0,25
příklady:
1) Vypočtěte Rf látky, která doputovala 1,5 cm od startu. Čelo chromatogramu je vzdáleno
6 cm od startu.
2) Vypočtěte Rf látky, která doputovala 4 cm od startu. Čelo chromatogramu je vzdáleno
10 cm od startu.
3) Vypočtěte Rf látky, která doputovala 3 cm od startu. Čelo chromatogramu je vzdáleno
7,5 cm od startu.
4) Vypočtěte Rf látky, která doputovala 6 cm od startu. Čelo chromatogramu je vzdáleno
8 cm od startu.
5) Vypočtěte Rf látky, která doputovala 7,5 cm od startu. Čelo chromatogramu je vzdáleno
10 cm od startu.
řešení:
1 2 3 4 5
0,25 0,4 0,4 0,75 0,75
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 61
příklad:
Při stanovení koncentrace glukosy v roztoku pomocí enzymové elektrody poskytlo 10 μl 100 mM
standardního roztoku glukosy proudovou odezvu 40 nA. Jaká je koncentrace neznámého vzorku,
jestliže 20 μl vzorku poskytlo odezvu 20 nA?
řešení:
(proudová odezva elektrody je přímo úměrná koncentraci glukosy ve vzorku)
10 μl 100 mM standardního roztoku glukosy poskytuje proudovou odezvu 40 nA =>
20 μl 100 mM standardního roztoku glukosy poskytuje proudovou odezvu 80 nA
20 μl roztoku glukosy o neznámé koncentraci poskytuje proudovou odezvu 20 nA =>
koncentrace vzorku je 4 x nižší než koncentrace standardu (80 : 20 = 4)
koncentrace neznámého vzorku: 100 : 4 = 25 mmol/l
příklady:
1) Při stanovení koncentrace glukosy v roztoku pomocí enzymové elektrody poskytlo 10 μl 100 mmol/l
standardního roztoku glukosy proudovou odezvu 20 nA. Jaká je koncentrace neznámého vzorku,
jestliže 50 μl vzorku poskytlo odezvu 10 nA?
2) Při stanovení koncentrace glukosy v roztoku pomocí enzymové elektrody poskytlo 5 μl
100 mmol/l standardního roztoku glukosy proudovou odezvu 20 nA. Jaká je koncentrace neznámého
vzorku, jestliže 10 μl vzorku poskytlo odezvu 8 nA?
3) Při stanovení koncentrace glukosy v roztoku pomocí enzymové elektrody poskytlo 100 μl 100 mM
standardního roztoku glukosy proudovou odezvu 20 nA. Jaká je koncentrace neznámého vzorku,
jestliže 50 μl vzorku poskytlo odezvu 5 nA?
4) Při stanovení koncentrace glukosy v roztoku pomocí enzymové elektrody poskytlo 50 μl 100 mM
standardního roztoku glukosy proudovou odezvu 25 nA. Jaká je koncentrace neznámého vzorku,
jestliže 25 μl vzorku poskytlo odezvu 5 nA?
5) Při stanovení koncentrace glukosy v roztoku pomocí enzymové elektrody poskytlo 25 μl 100 mM
standardního roztoku glukosy proudovou odezvu 20 nA. Jaká je koncentrace neznámého vzorku,
jestliže 50 μl vzorku poskytlo odezvu 8 nA?
řešení:
1 2 3 4 5
10 mmol/l 20 mmol/l 50 mmol/l 40 mmol/l 20 mmol/l
Základní Praktikum z Biochemie – Ukázkové příklady 62