Krev a krvetvorba Funkce krve • Termoregulace • Imunitní funkce • Transport látek a živin Složení krve 55 % plazma 90 % H2O 7 % plazmatické proteiny 3 % aminokyseliny, sacharidy, lipidy, hormony, elektrolyty 45 % formované elementy (krvinky) Plazma Buffycoat(bílé krvinky, destičky) Erytrocyty(červené krvinky) Hematokrit ♂42 –52 % ♀37 –47 % Stanford blood center Krevní buňky - formované elementy Krevní buňky (formované elementy) 150 000 – 300 000/ 1 l 5 000 – 9 000 / 1 l 4 – 6 millionů/ 1 l Erytrocyty • 4 – 6 milionů/μl • tvar: bikonkávní terčík • velikost: 7.4 μm (normocyt) • struktura: • plazmalema • cytoplazma + hemoglobin 33 % • chybí jádro a buněčné organely!!! • životnost: 120 dní • funkce: transport O2 a CO2 Poikilocytóza a anisocytóza sferocyty drepanocyty různé tvary ery různá velikost ery • Polyglobulie (chronická hypoxie), polycytémie (hematopoéza), erytrocytóza (snížení plasmy) – zvýšený počet ery • anemie – snížený počet ery • osmotická rezistence – v hypertonickém roztoku – ery se smršťují → echinocyty • v hypotonickém roztoku – ery bobtnají, plazmalema praská - hemolýza VectorStock.com/23868089 Leukocyty •Granulocyty: - neutrofily - eozinofily - bazofily polymorfonukleáry acidofilní cytoplazma specifická + azurofilní granula •Agranulocyty - lymfocyty - monocyty mononukleáry basofilní cytoplazma jenom azurofilní granula monocyt lymfocyt neutrofilní granulocyt - tyčka neutrofilní granulocyt - segment eosinofilní granulocyt bazofilní granulocyt trombocyt erytrocyty Neutrofilní granulocyty • 71 % z DBOK •  10 – 12 m • cytoplazma: acidofilní • specifická granula: neutrofilní • jádro: tyčka (4 %) nebo segmenty (67 %) • životnost: několik hodin nebo dní • funkce: mikrofág Eozinofilní granulocyty • 1– 4 % z DBOK •  12 – 14 m • cytoplazma: acidofilní • specifická granula: eozinofilní • jádro: 2 laloky + chromatinov můstek, (činka nebo brýle) • funkce: fagocytóza antigen-protilátka komplexů  - eozinofilní granulocytóza – alergie, parazitární onemocnění Eozinofilní granulocyt (ELM) Bazofilní granulocyty • do 1 % z DBOK •  do 10 m • cytoplazma: lehce bazofilní • specifická granula: • bazofilní - heparin, histamin, .. • jádro: nepravidelně laločnaté, („tlusté S“) • funkce: hypersenzitivita, alergické reakce • Histamin, serotonin • heparin Agranulocyty • obecná charakteristika: - mononukleáry – jádro je sférické, oválné nebo ledvinovité - bazofilní cytoplazma - chybí specifická granula - azurofilní granula s lyzosomálními enzymy - Lymfocyty a monocyty Lymfocyty • 20 -25 % z DBOK • cytoplazma – modrá s azurofilními granuly, četné ribosomy • jádro – kulaté, hyperchromatické • třídění: - T- a B-lymfocyty - malé ( 8 m), střední ( 10-12 m), velké ( 16-18 m) Monocyty • 5 % z DBOK • velikost:  15 – 20 m • cytoplazma – objemná, šedomodrá, nespecifická granula a četné ribosomy, • jádro – ledvinovité až laločnaté, většinou v excentrické pozici, chromatin je jemně vláknitý • funkce : Fagocytující makrofágy https://biosci.mcdb.ucsb.edu/immunology/Cells-Organs/monocyte.htm Trombocyty • nejsou buňky, ale fragmenty cytoplazmy megakaryocytů • velikost: 2 – 4 m • hyalomera světle modrá periferie • granulomera červeně zbarvená zrníčka v centru destičky • životnost: 10-12 dnů • funkce : hemostáza /zástava krvácení/ FujiMan Production(Japan) monocyt lymfocyt neutrofilní granulocyt - tyčka neutrofilní granulocyt - segment eosinofilní granulocyt bazofilní granulocyt trombocyt erytrocyty Krevní nátěr - příprava 1 2 3 4 • krevní nátěr fixován methylalkoholem, 3-5 minut • Barvení - speciální panoptické barvení dle Pappenheima Stanovení diferenciálního bílého obrazu krevního -DBOK • krevní nátěr nutno prohlížet systematicky – meandrovitě nebo vertikálně horizontálně Tabulka 1 2 Neu tyčky / Neu segmenty //// // /// Eos / Baso Ly // //// Mono // 10 10 9 10 výsledky norma // 4 % //// / /// 67 % / // 3 % / 1 % / //// 20 % 5 % 10 10 100 100 % Neutrofily • tyčky : segmenty - 4 % : 68 % →1 : 17 • posun doleva • posun doprava • Hynkovo číslo – 2,7 -sečíst segmenty jader ve 100 neutrofilech = 270 (obvykle) - podělit 100 270 : 100 = 2,7 5 35 41 17 2 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 band 2 segm. 3 segm. 4 segm. 5 segm. neutrophils (nuclei) % tyčka 2 segm. 3 segm. 4 segm. 5 segm. Posun doprava > 2,7 Posun doleva > 2,7 Diferenciální bílý obraz krevní - průměrné hodnoty Neutrofily - tyčky 4 % - segmenty 68 % Eozinofily 3 % Bazofily 1 % Lymfocyty 20 % Monocyty 4 % ∑ = 100 % !!! Anomálie DBOK   Neutrofily neutrofilní granulocytóza neutrofilní granulocytopenie Eozinofily eozinofilní granulocytóza eozinofilní granulocytopenie Bazofily bazofilní granulocytóza bazofilní granulocytopenie Lymfocyty lymfocytóza lymfocytopenie Monocyty monocytóza monocytopenie Hematopoesis – vývoj krve Michał Komorniczak (Poland), based on: B.F. Rodak, G.A. Fritsma. K. Doig: Hematology: Clinical Principles and Applications. 3rd ed.. Saunder, 2007. ISBN 9781416030065 Figure 7-1 R. Hoffman et al.: Hematology: Basic Principles and Practice, 5th ed.. Philadelphia: Churchill Livingstone, An Imprint of Elsevier, 2009. ISBN 978-0-443-06715-0. I. Damjanov: Patofizjologia, Wrocław 2010, Elsevier Urban & Partner. ISBN 9788376092010 File:Human skeleton front no-text no-color.svg by: LadyofHats Mariana Ruiz Villarreal Prenatální hematopoeza • Mezoblastické období – 1. – 2. měsíc i.u. mezoblast žloutkového váčku a zárodečného stvolu a intraembryonální mezenchym : INSULAE SANGUINAE (krevní ostrůvky) - angioblasty - hemoblasty  primitivní erytrocyty s jádrem • Hepatolienální období – 2. – 7. měsíc i.u. v játrech a slezině • Medulární období – od ±4. měsíc i.u. kostní dřeň https://www.wikiskripta.eu/w/Krvetvorba_(histologie)Skrobanekpavel Postnatální hematopoeza • Kostní dřeň: erytrocyty leukocyty trombocyty • Thymus: T–lymfocyty • Lymf. orgány: B–lymfocyty Kostní dřeň • červená – retikulární vazivo + hematopoietické buňky v dosp. – v dlouhých a krátkých kostech (sternum, klíční kost, lebeční a pánevní kosti, obratle) a proximální epifýzy dlouhých kostí • žlutá – retikulární vazivo + adipocyty [možná reverze v hematogenní dřeň] • „Šedá“ – pouze retik. vazivo (stáří, kachexie) Krevní sinusoidy adipocyty Nezralé a zralé krvinky makrofágy Retikulární vazivo: retik. vlákna + retik. buňky Stavba kostní dřeně Kostní dřeň mez trabekulami kostní tkáně Myeloidní • Erythropoéza • Monocytopoéza • Granulopoéza • Trombocytopoéza Lymphoidní • Produkce T lymfocytů • Produkce B lymfocytů Větve hematopoézy Vývoj krvinek - opakované mitózy - mesoblast hemoblast stem cells progenitor cells mature blood cells hematopoeza Promyeloblast3 types of erythroblasts Erythro(cyto)poiesis • Proerytroblast • Basofilní erytroblast • Polychromatofilní erytroblast • Ortochromní erytroblast • Reticulocyt ERYTROCYT Erythropoiesis Opakovamé mitózy:   buněk se zmenšuje z 20 m na 7,4 m  kondenzace jaderného chromatinu, ztráta jadérek, vyloučení jádra - enukleace  produkce hemoglobinu  změna barvitelnosti cytoplazmy –bazofilie (ribosomy)  acidofilie (hemoglobin) Proerytroblast •  15 – 20 m • bazofilní cytoplazma, „ouškovité“ protruze. • sférické jádro, 2 – 3 nucleoli Bazofilní erytroblast •  16 m • bazofilní cytoplazma • kondenzace jaderného chromatinu • absence jadérek Polychromatofilní erytroblast •  12 m • produkce hemoglobinu  nepravidelné barvení cytoplazmy – místy bazo-, místy acidofilní • kondenzace chromatinu Ortochromatofilní erytroblast •  9 – 10 m • acidofilní cytoplazma + hemoglobin • pyknotické jádro v excentrické pozici (před enukleací) Retikulocyty • Nezralé ery – vývojové stádium, v periferní krvi 0,5 – 1,5 % • Obsahují zbytky organel /polyribosomy, mitochondrie – substantia reticulofilamentosa/ • V ery dozrávají během 24 – 48 hod • Znázornění - brilantkresylová modř Erythropoiesis - rekapitulace Granulo(cyto)poiesis • Myeloblast • Promyelocyt • Myelocyt • Neutrofilní • eosinofilní • basofilní • Metamyelocyt • Neutrofilní • eosinofilní • basofilní GRANULOCYT Granulopoiesis Opakované mitózy: •  buněk se zmenšuje z 20 m na 10-14 m (vyjímka - promyelocyt) • kondenzace jaderného chromatinu, změna tvaru jádra (koule  tyčka) • produkce specifických granulí • změna barvitelnosti cytoplazmy – bazofilie (ribosomes)  acidofilie (specifická granula) Myeloblast •  20 m • světlá, bazofilní cytoplazma • Kulaté jádro, jemná struktura chromatinu, 2 – 5 jadérek Promyelocyt •  25 – 30 m • světlá, bazofilní cytoplazma + azurofilní granula • 0 - D jádro, ± jadérka Myelocyt neutro-, eosino-, basofilní •  15 – 20 m • světlá, acidofilní cytoplazma • produkce specifických granulí (neutro-, eosino-, bazofilních) • ledvinovité jádro bez jadérek, kondenzace chromatinu Metamyelocyt neutro-, eosino-, basofilní •  15 m • acidofilní cytoplazma + specifická granula (neutro-, eosino-, bazofilní) • jádro „ tlustá tyčka“, kondezace chromatinu Granulopoiesis - rekapitulace Lymphocytopoesis Monocytopoesis • Lymfocytoblast • Prolymfocyt • Monocytoblast • Promonocyt Thrombocytopoiesis • Megakaryoblast -  20 m • Promegakaryocyt -  40 - 50 m • Megakaryocyt -  80 - 100 m Endomitóza – opakované mitózy bez karyokineze a cytokineze. Výsledkem je obrovská, polyploidní b. - megakaryocyt Megakaryocyt platelets polyploid nucleus Thrombocytopoeza Vznik krevních destiček na povrchu megakaryocytu https://www.vetmed.ucdavis.edu/ • SCF= Stem Cell Factor • Tpo= Thrombopoietin • IL= Interleukin • GM-CSF= Granulocyte Macrophagecolony stimulating factor • Epo= Erythropoietin • M-CSF= Macrophage-colony stimulating factor • G-CSF= Granulocyte-colony stimulating factor • SDF-1= Stromal cell-derived factor-1 • FLT-3 ligand= FMS-like tyrosine kinase 3 ligand • TNF-a = Tumour necrosis factor- alpha • TGFβ = Transforming growth factor beta [[erytrocyt|Molecular cell biology. Lodish, Harvey F. 5. ed. : - New York : W. H. Freeman and Co., 2003, 973 s. b ill. ISBN 0-7167-4366-3]] Pluripotent Děkuji za pozornost