Rostlinné explantáty – cvičení

Jarní semestr 2023


16.2.2023      1. Úvod do praktika: podmínky axenické kultury a požadavky na vybavení laboratoře,
typy kultur, kultivační nádoby a různé způsoby kultivace, seznámení s kultivačním systémem RITA®,
bezpečnost a organizace práce, protokoly, literatura.

23.2.2023      2. Média: různé varianty tekutého a agarem ztuženého média (MURASHIGE – SKOOG 1962,
GAMBORG a kol. 1968, atd.), příprava a rozlití do kultivačních nádob.

2.3.2023         3. Nácvik práce ve sterilních podmínkách: sterilizace nástrojů, vody, nádob,
živných médií, pracovního prostoru, metody povrchové desinfekce semen, sterilní výsev semen, spor
kapradin apod. (tabák, slunečnice, mrkev, řeřicha, aj.).

9.3.2023         4. Nácvik práce ve sterilních podmínkách: pasážování (přesazování explantátů do
čerstvého média) sterilních kultur (Drosera, Dionaea, Saintpaulia, Streptocarpus).

16.3.2023      Cvičení se nekoná z organizačních důvodů.

23.3.2023      5. Mikropropagace: Odvození primární kultury bylin, různé zdroje explantátů – list,
stonek, rhizom. A. regenerace de novo: Saintpaulia, Streptocarpus, Begonia, Nephrolepis, B.
reprodukce: množení nodálními segmenty (Rosa).

30.3.2023      6. Kalusové kultury: A. iniciace kalogeneze – založení primární kultury kambiálních
segmentů kořene (Daucus), založení kalusové kultury ze segmentů hypokotylů klíčních rostlin. B.
udržování kalogeneze: pasážování kalusové kultury

6.4.2023         7. Meristémové kultury: A. Izolace apikálních a axilárních meristémů bylin a
dřevin (Dianthus, Clematis, Rubus), B. indukce tuberizace na nodálních segmentech (Solanum
tuberosum).

13.4.2023      8. Izolace zygotických embryí: A. založení kultury – desinfekce semen, izolace
embryí a jejich inokulace do živného média (Picea, Zea, Capsella).

20.4.2023      9. Fytopatologie in vitro: certifikace čistoty kultur, test čistoty kultur Solanum
tuberosum, Saintpaulia ionantha apod. – příprava a rozlití testovacího média, inokulace explantátů.

27.4.2023      10. Převod rostlin do nesterilních podmínek, aklimatizace (Saintpaulia,
Streptocarpus, Nephrolepis, Droserea, Dionaea).

4.5.2023         11. Morfogeneze kalusu: pasáž kalusu na média o různé koncentraci rostlinných
hormonů.

11.5.2023      12. (Založení suspenzní kultury z kalusu tabáku) nebo Exkurze do Laboratoře
rostlinných explantátů Mendelovy univerzity v Brně a Botanické zahrady a arboreta Mendelu.

Ukončení všech experimentů, dokončování protokolů.

18.5.2023            Zápočet