Vyšetření komplementového systému
•a) Stanovují se hladiny jednotlivých složek K v séru –
•        za pomoci antisér, většinou proti C3, C4, C1q, C1 inhibitor (hereditátní angiedém),
nefelometrické a turbidimetrické stanovení, ELISA
•b) Celková aktivita komplementové kaskády-se provádí testem CH50 – (50% hemolýza způsobená
komplementem – membranolytická aktivita), stupeň hemolýzy závisí na množství přidaného K, nepřímá
úměra, hemolýza – spektrofotometrie
•Beranní krvinky, hemolyzin, komplement
•Využití:  K detekci poruch nedostatečného mn. nebo defektů složek K systému
•Reakční směs:
•2% nálev krvinek,  Ab(hemolyzin), C komerční (vyšetřované sérum)
•Výsledek: lýze buněk, vyčeření
•
•

Využití:
•Imunokomplexové choroby (stanovení C3 a C4)
•Podezdření na deficity jedn. Složek
•U vleklých infekcí a imunodeficit
•
•

Komplementové metody
metody využívající faktu aktivace komplementového systému komplexem – antigen-protilátka, KFR
•
•Složky reakce: Ab, Ag, C, ERY, hemolyzin
•· Ab- vyšetřované sérum
•- chceme v něm prokázat protilátku / komplement v séru je tepelně inaktivován /
•· známý specifický Ag
•- jsou-li v séru Ab, vytvoří se imunokomplex IK
•
•· KOMPLEMENT - zdrojem nejčastěji sérum morčete (váže se na IK a aktivuje protilátku)
•hemolytický komplex: komplex Ag /beraní ERY/ a protilátky ~ EMBOCEPTORu /hemolyzinu/, získaného
imunizací králičího séra beraními erytrocyty
®aby došlo k hemolýze je nutná spoluúčast KOMPLEMENTU a inkubace 30 minut při 30 °C
®

KFR
•průběh reakce:
•* POZITIVNÍ ~ ve vyšetřovaném séru je Ab
•protilátka v séru vytvoří komplex s Ag – na něj se naváže komplement. Po přidání hemolytického
systému nezbývá již komplement do 2. části reakce
•® k hemolýze NEDOJDE:
•* NEGATIVNÍ ~ ve vyšetřovaném séru není Ab
•- v 1. fázi reakce se nevytvoří IK – komplement se nevyváže a zbývá do 2. fáze reakce, kdy
aktivuje hemolyzin
•® DOJDE k hemolýze:
•

KFR
•- velmi záleží na množství komplementu – každý vzorek se musí titrovat, aby bylo množství
komplementu konstantní
•- použití:
•· diagnostika příjice /syfilis/, bruceózy, pasteurely
•· ve virologii průkaz protilátek téměř všech virových nákaz
•· typizace neznámých Ag nově izolovaných virů
•· průkaz protiorgánových Ab
•