JÁRO 2024 E2050 LABORATORNÍ CVIČENÍ Z MOLEKULÁRNÍ BIOLOGIE A MIKROBIOLOGIE ÚVOD, BOZP A PO Životní prostředí a zdraví Mgr. Pavla Holochová, Ph.D Mgr. Petra Brenerová, Ph.D Mgr. Michaela Kouřilová Změna organizace cvičení Nový termín: ÚTERÝ 8:00-10:50 POUZE pro studenty ze ČTVRTEČNÍ SKUPINY Pro 10-14 studentů ©0ô Rozvrh cvičení UVDD BDZP Práce v laboratoři IZDLACE Kolonková metoda z bukálního steru PCR AmplifikacE mikrobiálni DNA zvyizolovaného bukálního steru MIKROBIOLOGIE Gramovo barvení qPCR EubakteriálníqPCR z bukálního steru SEKVENACE Teoretický úvod Základní analýzy IZDLACE Chloroformová izolace DNA z krve KONTROLA DNA Kontrola kvality a kvantity vyizolované lidské DNA z krve KONTROLA PCR Kontrola PCR produktu pomoci gelové elektroforézy MIKROBIOLOGIE Personálnímonitoring Stanovení polymorfizmu z bukálního steru DISKUZE Zpětná vazba • 1. Základy pipetování Automatické pipety Automatické pipety Ergonomická rukojeť Odhazovač špiček Píst Odhazovač špiček Digitální display Nástavec na špičky Method 1: Forward pipetting Vil @andy]connelly Upper stop First stop Second stop- lít Method 2: Reverse pipetting Upper stop-First stop-Second stop- EE HE 1 lcml andyjconnelly Pipetování roztoků Automatické pipety Eppendorf Reference 2. Odběr bukálního steru BUKALNl ster 1 2 Odběr provádíme minimálně 1 hodinu od posledního jídla a pití. Odběrovou zkumavku si každý student popíše svým celým jménem, aktuálním datem a typem odběru (bukální stěr). Popsanou a otevřenou zkumavku nachystat do stojánku. 3 4 Bukální stěr - pomocí odběrové štětičky FloqSwab setřít vnitřní stranu sliznice tváře, stěr provádět krouživým pohybem, cca 10x z obou stran sliznice tváře. Nedotýkat se jiné části úst a zubů Štětičku vložit do předpřipravené zkumavky ve stojánku a poté štětičku ve zúženém místě zalomit o hrdlo zkumavky, do které je vložena. Zkumavku zavřít víčkem. Případné odchylky od tohoto postupu zapište do protokolu, pro zpětnou kontrolu výsledků Informace o duševním vlastnictví • Tato prezentace je autorským dílem vytvořeným zaměstnanci Masarykovy univerzity. • Studenti kurzu/předmětu mají právo pořídit si kopii prezentace pro potřeby vlastního studia. • Jakékoliv další šíření prezentace nebo její části bez svolení Masarykovy univerzity je v rozporu se zákonem. 11 Poděkování • Toto cvičení bylo provedeno za podpory Výzkumné infrastruktury RECETOX (ID LM2023069) DOTAZY