1
Petra Vašíčková
pvasickova@sci.muni.cz
Původci hepatitid
Virus hepatitidy A (HAV)
Čeleď Picornaviridae
Rod Hepatovirus
Neobalený virus, 30 nm
• Genom
➢ +ss RNA,
➢ velikost 7,5 kb
➢ ORF (P1 – strukturální
proteiny, P2 a P3
nestrukturální proteiny)
(Anderson and Shrestha, 2002)
Patogen
Doba
inkubace
Symptomy
Infekční
dávka
Norovirus 12 - 48 hodin křeče v břiše, průjem, zvracení, horečka 10-100
Virus hepatitidy A 14- 28 dní
bolest břicha, nevolnost, horečka,
žloutenka, tmavá moč
10-50
Rotavirus 1 – 3 dny
horečka, mnohočetné průjmy, bolesti v
nadbřišku
100-1000
Virus hepatitidy E 40 - 60 dní
bolest břicha, nevolnost, horečka,
žloutenka, tmavá moč
100 ?
Virus klíšťově
encefalitidy
7 - 30 dní
příznaky lehké chřipky, vysoké horečky,
prudké bolesti hlavy, nevolnost, zvracení,
ztuhnutí svalů na šíji, svalový třes
?
Viry způsobující alimentární infekce
(EFSA 2011)
Patogeny v souvislosti s onemocněním z
potraviny (EFSA, report za rok 2014)
Viry – epidemie (potraviny)
• 2013 – 2014 Německo, Holandsko, Švédsko a Polsko, mražené bobulovité
ovoce z Itálie, HAV
• 2013 – Holandsko, mražené maliny z Polska, NoV
• 2012 – 2013 – Skandinávie, mražené bobulovité ovoce , HAV
• 2012 – Irsko, ústřice z Holandska, NoV
• 2010 – Irsko, ústřice, NoV
• 2009 – Dánsko, mražené maliny ze Srbska a Belgie, NoV
• 2009 – Finsko, mražené maliny z Polska, NoV (>100 )
• 2006 – Holandsko, mražené maliny z Chile, NoV (45)
• 2005 – Dánsko, mražené maliny z Polska, NoV (>350 )
• 2005 – Rusko, pivo (voda užitá při přípravě), HAV (> 500 )
• 1979 – ČR, mražené jahody z Polska, epidemie, HAV
Kontaminace potravin
HAV – molekulární epidemiologie
(Vaughan et al., 2014)
• 6 genotypů
• I, II, III lidé
( 15 %)
➢ subtypy
A, B ( 7- 7,5 %)
• III, IV, V
opice
HAV – genotypy výskyt ve světe
(Cristina and Costa-Mattioli, 2007)
Drobné ovoce a zelenina – zahraničí
Vzorek NoV HAV HEV
Jahody/maliny čerstvé 0/81 0/81 0/81
Jahody/maliny
mražené
0/39 0/39 1/39
Listový salát 3/210 4/175 0/175
Voda 2/41 0/41 0/41
Ruce 0/117 0/117 0/117
(Maunula et al., 2013; Kokkinos et al., 2013)
Drobné ovoce (2013-2016)
Farmy NoV HAV
Jahody 2/156 0/156
Voda 3/23 0/23
Prostředí (stěry) 3/218* 0/218
Tržní síť
Jahody CZ 0/45 0/45
Jahody dovoz 1/24 0/24
* ruce sběračů, toaleta
Zelenina (2013-2016)
Farmy NoV HAV
Zelenina 1/318 0/318
Voda 1/12 0/12
Prostředí (stěry) 0/58 0/58
Tržní síť
Zelenina CZ 1/37 0/37
Zelenina dovoz 1/40 0/40
Krájená zelenina (mrazená,
salát)
2/117 0/117
Byliny (2013-2016)
Farmy NoV HAV
Byliny 4/115 0/115
Voda 5/14 0/14
Prostředí (stěry) 2/80* 0/80
Tržní síť
Zelenina CZ 2/65 0/65
Zelenina dovoz 2/47 0/47
* ruce sběračů
Virus hepatitidy E (HEV)
Neobalený virus, 27-30 nm
• Genom
➢ +ss RNA,
➢ velikost 7,2 kb
➢ ORF1, ORF2, ORF3
(Anderson and Shrestha, 2002)
(Johne et al., 2014)
Virus hepatitidy E (HEV)
1978 – popis onemocnění, Kašmír, Indie
(Khuroo, 1978)
1983 – EM původce (Balayan et al., 1983)
1991 – charakteristika genomu (Tam et al.,
1991)
1997 – popis u prasat domácích (Meng et
al., 1997)
2003 - alimentární přenos (Tei et al.,
2003; Matsuda et al., 2003)
(Khuroo et al., 2011)
(Johne et al., 2014)
(Doceul et al., 2016)
HEV - klasifikace
(Anderson and Shrestha, 2002)
Čeleď Rod Druh Hostitel Genotyp
Hepeviridae Ortohepevirus Ortohepevirus A člověk HEV-1
člověk HEV-2
člověk, prase domácí a
divoké, jelenovití, králík,
promyka
HEV-3
člověk, prase domácí a
divoké
HEV-4
prase divoké HEV-5
prase divoké HEV-6
velbloud, člověk HEV-7
velbloud HEV-8 ???
Ortohepevirus B kur HEV-B1-4
Ortohepevirus C potkan HEV-C1
fretka HEV-C2
Ortohepevirus D netopýr
Piscihepeviru Piscihepevirus A pstruh
(http://www.ictvonline.org/virusTaxonomy.asp)
HEV - klasifikace
(Anderson and Shrestha, 2002)
Čeleď Rod Druh Hostitel Genotyp
Hepeviridae Ortohepevirus Ortohepevirus A člověk HEV-1
člověk HEV-2
člověk, prase domácí a
divoké, jelenovití, králík,
promyka
HEV-3
člověk, prase domácí a
divoké, skot, ovce, koza
HEV-4
prase divoké HEV-5
prase divoké HEV-6
velbloud, člověk HEV-7
velbloud HEV-8 ???
Ortohepevirus B kur HEV-B1-4
Ortohepevirus C potkan HEV-C1
fretka HEV-C2
Ortohepevirus D netopýr
Piscihepeviru Piscihepevirus A pstruh
(http://www.ictvonline.org/virusTaxonomy.asp)
HEV-1, HEV-2
̶ Lidé
̶ Epidemie - rozvojové země
̶ Přenos
➢ kontaminovaná voda
➢ přímý kontakt
̶ Onemocnění - věkové rozmezí 15 – 30 let
̶ Letalita 1 % (25 % těhotné ženy)
(Khuroo et al., 2011)
(Johne et al., 2014)
HEV-3, HEV-4
̶ Člověk, prase domácí i divoké, jelenovití
̶ Sporadické případy – celý svět
̶ Zoonotický přenos
(Dalton et al., 2014)
• Onemocnění – střední až
pokročilý věk (muži)
• Asymptomatická infekce
(68 – 98 %)
• Chronicita
(Johne et al., 2014)
HEV-3, HEV-4, průkaz v potravinách
• Nedostatečně tepelně upravené maso a droby
rezervoárových zvířat a výrobky z nich (figatelli, grilovaná játra,
sashimi)
• Dostatečně tepelně upravené potraviny - možnost
křížových kontaminací během přípravy (zabíjačkové výrobky)
• Mléko (kráva, velbloud?, i po pasteraci)
• Mlži
• Listový salát, jahody, mražené maliny
• Byliny a koření
Teplota (°C) Čas (min) Vylučování HEV prasaty Imunitní odpověď
bez ošetření 0 ano ano
62 5 ano ano
62 20 ano ano
62 120 ano ano
68 5 ano ano
68 10 ano ne ?
68 20 ano ano
71 5 ano ano
71 10 ano ano
71 20 ne ne
(Barnaud et al., 2012)
(EPIDAT)
• Holandsko 55,0 % (Rutjes et al., 2007)
• Dánsko 49,5 % (Breum et al., 2010)
• Itálie 42,0 % (Di Bartolo et al., 2008)
• Španělsko 37,7 % (de Deus et al., 2007)
• Maďarsko 36,0 % (Fordach et al., 2010)
• Slovinsko 20,3 % (Steyer et al., 2012)
Prasata domácí – chovy, Evropa
̶ 62,6 % (21) chovů HEV pozitivních
̶ 17,7 % (70) prasat HEV pozitivních (trus)
Prasata domácí – chovy, ČR
• Holandsko 55,0 % (Rutjes et al., 2007)
• Dánsko 49,5 % (Breum et al., 2010)
• Itálie 42,0 % (Di Bartolo et al., 2008)
• Španělsko 37,7 % (de Deus et al., 2007)
• Maďarsko 36,0 % (Fordach et al., 2010)
• Slovinsko 20,3 % (Steyer et al., 2012)
Prasata domácí – chovy, Evropa
Prasata domácí – jatky, ČR
Typ
chovu
Játra Žluč
Obsah
střevní
Celkem
Bio 2/113 (1,8 %) 8/112 (7,14 % 2/113 (1,77 %) 10/113 (8,8 %)
Konvenční 4/150 (2,7 %) 5/150 (3,33 %) 0/150 (0 %) 9/150 (6,0 %)
Infekce není rozpoznatelná během běžné veterinární
prohlídky (ante- i post-mortem), pouze mikroskopické
změny – maso a vnitřnosti volně šířeny do tržní sítě
Masné výrobky – prodejny, ČR
Vzorek HEV NoV
Krájené masné výrobky 0/135 6/135
Mleté maso 1/100 3/100
Masné výrobky (zabíjačky) 1/145 5/145
Stěry prostředí 0/160 6/160
HEV prasata domácí, ČR
• U prasat domácích zjištěn výskyt dvou hlavních fylogenetických
skupin (Holandsko, Německo, Švédsko × Srbsko, Kyrgyzstán)
̶ Zjištěna významná podobnost specifické oblasti genomu
humánního izolátu a izolátů od prasat domácích → potvrzení
zoonotického přenosu HEV
Zvěř
(Foto M. Klimeš)
Zvěř volně žijící
Volnost
Prase
divoké
Jelen
lesní
Daněk
evropský
Srnec
obecný
Muflon
obecný
Jelen sika
1 16/62 2/145 0/19 0/23 0/0 0/0
2 4/22 0/4 0/1 1/4 0/0 0/0
3 8/17 0/10 0/0 0/0 0/0 0/0
4 0/26 0/0 0/0 0/2 0/1 0/0
5 2/26 0/5 0/0 0/0 1/1 0/0
6 5/37 0/5 0/0 0/1 0/0 0/18
Celkem 35/190 2/169 0/20 1/30 1/2 0/18
18,42% 1,18% - - - -
Zvěř volně žijící – prase divoké
(M.Bena)
Zvěř volně žijící – prase divoké
(M.Bena)
Lokalita Pozitivní/celkem
Žluč Játra Obsah střevní
Pozitivní/celkem
1 1/20 1/18 0/20 0/20
2 0/17 0/12 0/17 0/17
3 4/21 3/20 3/21 1/21
4 0/5 0/5 0/5 0/5
5 0/2 0/2 0/2 0/2
6 5/21 5/19 3/20 3/21
7 3/20 3/18 3/20 3/20
8 2/2 2/2 1/2 0/2
9 1/22 0/20 1/22 0/22
10 6/15 3/14 6/15 3/15
11 3/14 1/13 2/14 1/14
12 2/20 2/20 2/20 2/20
13 4/20 3/19 3/19 3/20
14 2/20 2/20 0/20 2/20
15 3/22 2/22 3/22 2/22
16 4/20 1/20 4/20 1/20
Celkem (13/16) 40/261 28/244 31/259 21/261
% pozitivních 15.3% 11.5% 12.0% 8.1%
Zvěř obory
Obora
Prase
divoké
Jelen
lesní
Daněk
evropský
Srnec
obecný
Muflon
obecný
Jelen sika
A 14/63 0/0 0/36 0/0 2/15 0/0
B 39/91 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0
C 0/0 0/0 0/0 0/0 2/22 0/0
D 8/106 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0
Celkem 61/260 0/0 0/36 0/0 4/37 0/0
23,46% - - - - -
Zvěř volně žijící x obory
volno
st
obory
celke
m
Věkové kategorie
(Foto M. Bena, J. Drimaj, I. Slaná)
•Prase divoké
➢ Německo 68,2 %, lokality až 100 % (Adlhoch et al., 2009)
➢ Itálie 25,0 % (Martelli et al., 2008)
➢ Španělsko 19,6 % (de Deus et al., 2008)
➢ Maďarsko 12,2 % (Forgach et al., 2010)
➢ Holandsko 8,0 % (Rutjes et al., 2010)
•Jelenovití – Maďarsko, Holandsko
Zvěř – volnost, Evropa
HEV prasata divoká, ČR
• U prasat divokých zjištěn větší genetická variabilita (sousední státy)
• Zjištěna významná podobnost specifické oblasti genomu izolátů od prasat
divokých a domácích
̶ Zjištěna významná podobnost specifické oblasti genomu humánního izolátu a
izolátů od prasat divokých → potvrzení zoonotického přenosu HEV
HEV – Evropský úřad pro bezpečnost potravin
̶ Vědecké stanovisko související s rizikem spojeným s virem
hepatitidy E (HEV) a jeho přenosem potravinami (EFSA-Q-2016-
00315)
➢ Kriticky zhodnotit stávají metody průkazu HEV se zaměřením na
sledování viru ve vzorcích od zvířat a vzorcích potravin
➢ Sumarizovat data o výskytu HEV u lidí a různých zvířecích druhů
(rezervoárů × nahodilých hostitelů)
➢ Zjistit aktuální data o geografickém rozšíření HEV (genotypy,
subgenotypy), výskytu a perzistenci HEV v potravinách a návycích
spotřebitelů/konzumentů
➢ Navrhnout možná kontrolní opatření v rámci potravinových řetězců a
vyhodnotit dekontaminační procesy
̶ červen 2017