Pro amplifikaci sekvence uložené v GenBank pod číslem AY842851 navrhněte dvojici primerů o délce 24-26 bp s modifikovanými 5‘-konc tak, aby bylo možné produkt PCR klonovat do vektoru štěpeného EcoRI/BamHI. Velikost produktu PCR by měla být 500 – 600 bp.

První primer bude obsahovat na 5‘-konci restrikční místo EcoRI (rozpoznávací sekvence GAATTC, efektivní štěpení restriktázou vyžaduje navíc přítomnost 1 báze na 5‘-konci)

Druhý primer bude obsahovat na 5‘-konci restrikční místo BamHI (rozpoznávací sekvence GGATCC, efektivní štěpení vyžaduje navíc přítomnost 2 bází na 5‘-konci)


Uvěďte hodnoty Tm obou primerů, tvorbu vlásenek a duplexů a délku sekvence a pozici amplifikovaného produktu PCR

Vyhledejte další restrikční místa na uvedené sekvenci.