NA STOPĚ PACHATELE Díl šestý: Další gramnegativní koky a tyčinky Mikrobiologický ústav uvádí Opět začneme testíkem… n Které jsou klinicky významné G+ koky? Stafylokoky, streptokoky, enterokoky n A které klinicky významné G+ tyčinky? Např. listerie, koryneformní tyčinky, bacily n Které bakterie rostou na Endově půdě? Enterobakterie, Vibrionaceae a nefermentující n Které gramnegativní na Endu nerostou? Z těch, které byly v praktiku, jsou to kampylobaktery, helikobaktery a hemofily Testík pokračuje… n Které půdy se používají na enterobakterie? Např. Endova, XLD, MAL, CIN a další n Jak poznáte nefermentující od enterobakterií? Nefermentující nefermentují glukózu, např. Hajnova půda zůstává celá červená n Jak rozlišíte EPEC od jiných kmenů E. coli? Antigenní analýzou – sklíčkovou aglutinací n Uveďte několik bakterií, které nerostou na MH Např. streptokoky a hemofily A testík ještě pokračuje… n Co je charakteristické pro pseudomonády? Typická vůně, pigment (zelený, vzácněji jiný), pozitivní oxidázová reakce n Kdy mohou růst hemofily na krevním agaru? Když rostou kolem stafylokoka jako satelit n Které růstové faktory vyžaduje H. influenzae? Vyžaduje jak faktor X, tak i faktor V. n Proč ubylo hemofilových invazivních infekcí? Protože děti jsou nyní proti „Hib“ očkovány Úvod: Medická sprostonárodní Na patologické anatomii hrabou se medičky ve shnilém pyji Nevěří svému oku co je tam gonokoků Co mi to vytéká z močové roury? Chytil jsem kapavku od ňáké coury Hnis mi tam odkapuje Trenýrky zaplavuje Příběh první n Honza byl maminčin mazlíček a s holkami to neuměl. Tak se stalo, že ještě ve dvaceti neměl žádnou sexuální zkušenost. Kamarádi z něj měli legraci. Jednou se na něj domluvili, opili ho a zaplatili mu „společnici“ na večer. Honza měl pocit, že je konečně mužem… do doby, než začal mít pocit, že je netěsnícím vodovodním kohoutkem, z kterého neustále něco odkapává (totiž hnis…) Určitě tušíte, kdo je viníkem n Samozřejmě, je to Neiserria gonorrhoeae, (gonokok) původce kapavky. n Kapavka se projevuje jako zánět uretry, u žen také cervixu; asymptomaticky či symptomaticky se gonokoky vyskytují i ve faryngu a v rektu. n U žen naopak nejde o kolpitidu (zánět pochvy) a proto pochva není místem, odkud by bylo doporučeno odebírat u podezření na kapavku výtěry Gonokoky Příběh druhý n Lucie se už čtyři týdny učila na zkoušku z.fyziologie. Vůbec nevycházela z domu a jen seděla na zadnici. U zkoušky měla pocit, že ze sebe nic nevydoluje, ale nakonec si na cosi vzpomněla a prolezla s trojkou n Večer to s kamarádkami šla oslavit na taneční party. Bylo tam nakouřeno a tancovalo se do hluboké noci. Druhý den Lucce nebylo dobře, začala mít teploty a pak se objevila i vyrážka. (pokračování) n Až tehdy se nechala odvézt do nemocnice na infekční oddělení. V.sanitce upadla do bezvědomí a lékaři konstatovali rozvrat metabolismu. Po deseti hodinách marné snahy o zachování základních životních funkcí Lucka zemřela. n Takový průběh může bohužel někdy mít infekce způsobovaná velmi zákeřným pachatelem. Některé jeho kmeny jsou přítomny v krku zcela zdravých osob… A tímto viníkem je… Takto pronikají do tkání Meningokoková meningitida je celosvětově velmi závažnou nákazou Fotografie z databáze zločinců Ještě jeden zločinec: Moraxella (Branhamella) catarrhalis Neisserie – charakteristika n Mikroskopie: G – diplokoky tvaru kávového zrna, často intrecelulárně lokalizované n Kultivace: drobné, bezbarvé nebo nažloutlé (podle druhu) kolonie, rostoucí (podle druhu) na krevním či čokoládovém agaru n Biochemie: kataláza pozitivní, oxidáza pozitivní, vzájemně biochemicky rozlišitelné n Antigenní analýza: velký význam u meningokoka, seroskupina B není preventabilní očkováním! Úkol 1a: Defilé podezřelých (barvení kultur podle Grama) n Obarvěte podle Grama podezřelé kmeny (pro zopakování: natřít, nechat uschnout, fixovat plamenem, poté barvit: Gram 30 s, Lugol 30 s, alkohol 15 s, voda, safranin 60 s, voda, osušit, imerzní obj.) n Rozlišíte bakterie podle tvaru a typu buněčné stěny. Pro vzájemné G- koků musíte pokračovat dál. Úkol 1b: Prohlédnutí nátěrů kapavky n Všimněte si gramnegativních diplokoků tvaru kávového zrna, zejména intracelulárních. Intracelulární uložení je jejich typickou vlastností. Úkol 2 Otisky prstů (kultivace) n Popište kolonie gramnegativních koků na různých půdách, a hlavně si všimněte, jestli tam vůbec rostou. Úkoly 3: Základní biochemické testy n Rychlé testy s diagnostickými proužky velmi usnadňují diagnostiku n Neisserie jsou oxidáza pozitivní, moraxely také, ale mohou mít opožděnou reakci. n Moraxely se poznají podle pozitivního INAC testu n U INAC testu se postupuje jako u oxidázy, ale proužek je nutno zvlhčit a je nutno pět minut počkat. Zbarvení je modrozelené. Úkol 4 – druhové určení neisserií n K druhovému určení neisserií se používají biochemické testy různé provenience, u nás zpravidla NEISSERIAtest n Poměrně málo biochemicky aktivní jsou obě patogenní neisserie: gonokok štěpí jen glukózu, meningokok jen glukózu a maltózu. Úkol 5 – testy antibiotické citlivosti n Antibiotická citlivost se u patogenních neisserií určuje na půdách, na kterých jsou schopny růst, tj. nikoli na MH agaru n Lékem volby u meningokoka je stále klasický penicilin. Ten se osvědčuji i u gonokoka. Další možností jsou makrolidy, chinolony či cefriaxon. Tabulka zón citlivosti – MEN Tabulka zón citlivosti – BRA Ve světě používají i E-test Úkol 6 – antigenní analýza Úkol 7: Diagnostika bordetel, brucel, legionel a francisel n Různé gramnegativní tyčinky, které nerostou na Endově půdě a většinou ani na krevním agaru n K jejich diagnostice se používají speciální půdy nebo nepřímá diagnsotika (průkaz protilátek) n Infekce jsou méně časté, ale mohou být velmi závažné Bordetelly n B. pertussis a B. parapertussis způsobují dávivý kašel. B. bronchiseptica vyvolává různé patologické stavy u lidí i zvířat. n Užíval se pernazální výtěr Bordetella bronchiseptica: infekce kočky 7b – půda BCYE na legionely n Legionely se vyskytují ve vodovodech. Boj s nimi je hlavně stavebně technický. 7c Francisella n Původce tularemie – zaječího moru Odečet aglutinačního setu n Počítá se titr – tedy nejvyšší ředění, kdy ještě nalézáme pozitivní reakci 7d Vzpomínka na brucelly Nashledanou při dalším dílu!